谢贝
- 作品数:61 被引量:206H指数:8
- 供职机构:广州市胸科医院更多>>
- 发文基金:广州市科技计划项目广东省自然科学基金广州市医药卫生科技项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- MPT64在MTB利福平和异烟肼耐药性检测方法中的应用被引量:4
- 2021年
- 目的建立一种以MPT64为指标的结核分枝杆菌(MTB)耐药性检测的快速方法,探讨MPT64在MTB利福平(RFP)和异烟肼(INH)耐药性检测中的应用。方法应用胶体金免疫层析法(GICA)分别检测MTB敏感株和耐多药株在含(观察组)与不含(对照组)RFP、INH的Middlebrook 7H9液体培养基上培养3、7、10 d的培养液中的MPT64,通过凝胶成像仪白光源拍照进行条带灰度分析(Image Jab Software 3.0),比较敏感株和耐多药株间的灰度比值的差异,依据受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)分析确定RFP、INH耐药的灰度比值界值;以比例法检测结果为金标准,评价新建方法的准确度、灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值。结果对照组中,随着培养时间的延长,12株MTB敏感株和11株耐多药株的灰度比值增大;观察组中,敏感株在不同的培养时间的灰度比值没有显著变化,而耐多药株则明显增大。3、7、10 d敏感菌与耐多药菌在药物培养基中MPT64检测灰度比值差异均有统计学意义(P均<0.05)。依据观察组灰度比值分别绘制以MPT64指示的RFP和INH耐药性检测的ROC曲线,两者的3 d AUC分别为0.84和0.77,灰度比值界值均为0.05;7、10 d AUC均为1.00,7 d的灰度比值界值分别为0.23与0.20;10 d的灰度比值界值分别为0.49和0.48。GICA检测MPT64用于34株MTB的RFP、INH耐药性鉴定的准确度分别为97%和94%,灵敏度分别为93%和86%,特异度均为100%,阳性预测值均为100%,阴性预测值分别为95%和91%。结论 GICA检测MPT64于MTB培养7 d时能准确检测抗结核药物RFP、INH耐药性,MPT64可作为MTB药敏试验的有效检测指标。
- 杨瑜李华邓丽雷杰王楠谢贝吴玲刘志辉孟繁荣
- 关键词:MPT64药物耐药性胶体金免疫层析法
- 流式细胞术检测结核分枝杆菌死活菌混合样本中活菌比例的研究
- 2020年
- 目的探讨利用基于荧光素二乙酸酯(FDA)的流式细胞术检测结核分枝杆菌(MTB)混合菌液中活菌比例的性能,为应用流式细胞术定量检测与分析MTB异质性耐药方法的创建提供实验依据。方法将10株1麦氏浊度MTB纯培养活菌悬液和其相应的1麦氏浊度85℃加热30 min处死的MTB菌液按一定比例混合得到MTB死活菌混合菌液(其中活菌比例分别为100%、75%、50%、25%和0%),应用FDA分别对其进行染色后,流式细胞仪检测其平均荧光强度(MFI),求其与对应100%活菌样本MFI值的比值来模拟MTB异质性耐药检验中的FDA敏感指数,双变量直线回归分析得到敏感指数与实际活菌比例之间的直线回归方程,并利用该方程计算另外10组死活菌混合菌液样本中MTB活菌比例。结果(1)死菌与活菌MTB样本经FDA染色后MFI值比较差异有统计学意义(P<0.05),该方法用于区分死菌与活菌的界值为1834,用该界值鉴定其余20个死、活未知的MTB样本,其检测的灵敏度为100%、特异度为100%。FDA染色能够明确鉴别MTB的死、活。(2)10组已知活菌比例的MTB死活菌混合菌液样本经FDA染色后各比例之间MFI值比较差异有统计学意义(P<0.05),敏感指数(Y)与混合样本中活菌比例(X)之间的直线回归方程:Ŷ=0.986X+0.016,该直线回归方程差异有统计学意义(P=0.000)。(3)应用这种染色方法对其余50个MTB死活菌混合菌液样本进行检测,计算活菌比例与实际活菌比例之间差异无统计学意义(P>0.05),基于FDA染色方法的流式细胞术可用于MTB死活菌混合菌液样本中活菌比例的检测。结论通过基于FDA染色的流式细胞术具有准确检测MTB混合菌液样本中活菌比例的潜力,该方法在MTB异质性耐药检测中将具有广阔的应用前景。
- 竺澎波王伟亮谢贝李华孟繁荣王楠杨瑜刘志辉张言斌
- 关键词:流式细胞术
- 血清可溶性晚期糖基化终末产物受体表达水平与肺癌的相关性被引量:3
- 2013年
- 目的:初步探讨血清可溶性晚期糖基化终末产物受体(sRAGE)表达水平与肺癌的相关性。方法 :应用双抗体夹心ELISA法检测血清sRAGE水平,并比较分析其在40例肺癌患者与40例健康对照者、20例肺腺癌患者与20例其他病理类型肺癌患者、18例TNM分期M0肺癌患者与22例M1肺癌患者间的水平差异。结果:肺癌患者与健康对照者的血清sRAGE水平分别为(226±220)和(160±136)ng/L;肺腺癌患者与其他病理类型肺癌患者的血清sRAGE水平分别为(125±87)和(194±166)ng/L;TNM分期M0肺癌患者与M1肺癌患者的血清sRAGE水平分别为(198±174)和(128±85)ng/L。经总体方差不等的均数比较近似t检验,结果显示3组人群的血清sRAGE水平差异均无显著性。结论:血清sRAGE表达水平个体差异大,其表达水平与肺癌是否相关尚须大样本量进一步证实。
- 刘健雄刘志辉马志明谢贝薛宗锡高健齐游佩涛邵峥
- 关键词:肺肿瘤酶联免疫吸附试验
- 广东地区MPT64阴性结核分枝杆菌基因序列特征分析被引量:1
- 2019年
- 目的 了解广东地区MPT64阴性结核分枝杆菌临床分离株的mpt64基因序列特征。方法对保存于本院“广州地区分枝杆菌菌种保藏库”中的17株MPT64阴性和186株MPT64阳性结核分枝杆菌临床分离株培养增殖后进行mpt64基因序列测定与分析比对。结果 17例MPT64阴性株中有16例存在基因突变,其中14例在196-258位置存在63bp碱基缺失;1例存在196-258位碱基缺失与173位碱基G→C置换突变;1例存在196-258位碱基缺失与353位碱基A插入突变。186例MPT64阳性株中4例分别存在323位碱基C→G、127位碱基G→A、477位C→A、654位C→T碱基置换突变。结论 mpt64基因196-258位碱基缺失可能是广东地区结核分枝杆菌不表达分泌MPT64分子机制。
- 谢贝雷杰王楠刘志辉杨瑜邓丽牛群孟繁荣
- 关键词:肺结核结核分枝杆菌MPT64基因突变
- 结核性胸膜炎患者结核分枝杆菌培养滤液、胸腔积液和血清蛋白质组分析被引量:15
- 2014年
- 目的:寻找结核性胸膜炎特异性体液蛋白质标志物,以开发新型结核性胸膜炎实验诊断方法。方法:应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测5例结核性胸膜炎患者结核分枝杆菌分离株Middlebrook 7H9液体培养早中期(7 d与14 d)培养滤液及其血清、胸腔积液蛋白质组,并进行描述性比较分析,寻找其共有蛋白质组分。结果:培养滤液蛋白质组蛋白质种类数量远多于胸腔积液和血清蛋白质组,4例患者胸腔积液蛋白质组蛋白质种类数量多于血清蛋白质组;5例患者3类样本蛋白质组中,存在种类数量各不相同的培养滤液-胸腔积液、培养滤液-血清、血清-胸腔积液和培养滤液-胸腔积液-血清共有蛋白质,但在所有患者培养滤液、胸腔积液、血清中均存在相对分子质量为2 660的蛋白质。结论:相对分子质量为2 660的蛋白质具备结核性胸膜炎特异性体液蛋白质标志物的表征,但尚需进一步大样本量研究予以证实。
- 刘志辉彭德虎孟繁荣谢贝牛群雷杰高俊文张言斌谭守勇
- 关键词:结核分枝杆菌蛋白质组表面增强激光解析电离飞行时间质谱
- 结核性脑膜炎患者外周血CD4^+、CD8^+T淋巴细胞数与脑脊液生化指标的相关性分析
- 2012年
- 目的探讨结核性脑膜炎患者外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞的变化及与脑脊液常规生化指标的相关性。方法利用流式细胞仪检测结核性脑膜炎组(46例)、对照组(18人)外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞数值,并与脑膜炎患者的脑脊液常规生化指标进行相关性分析。结果结核性脑膜炎患者外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞值与对照组比较明显下降。结核性脑膜炎患者外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞与脑脊液常规生化指标无相关性。抗结核治疗8周后,结核性脑膜炎好转组的患者外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞值与恶化组比较差异无统计学意义。结论结核性脑膜炎患者的细胞免疫功能低于健康对照组;不能单一通过外周血T淋巴细胞的数值去判断结核性脑膜炎的严重程度以及预测其治疗效果。
- 徐建辉陈永浩林庆裕刘志辉谢贝马志明
- 关键词:结核性脑膜炎脑脊液T淋巴细胞
- 术后营养支持对结核病患者外周血中细胞因子IFN-?水平的影响
- 目的:了解结核病患者手术后外周血细胞因子IFN-?浓度的变化,探讨术后应用肠外营养支持对IFN-?水平的影响。方法:63例结核病大中手术后的患者随机分成对照组31例、研究组32例,研究组在术后连续7天予肠外营养支持,提供...
- 江涛刘家杰卢春丽谢贝游佩涛赵秉航张强李志强
- 关键词:营养支持结核病
- 文献传递
- 结核病传播链分子流行病学研究的病例选择方法初探
- 2017年
- 目的对以患者居住地为基础的结核病传播链分子流行病学研究的病例选择方法进行理论性评估。方法在本院建立的广州地区分枝杆菌菌株库中提取9234株结核分枝杆菌相应的患者信息资料,以患者居住地假定其间传播关系的有无,分析每条传播链中患者发病时间间隔及年龄组合情况。结果以县-乡镇-村-组等农村区划、市-区-社区-街道等城市区划为路线,发现387条假定结核病传播链,以2-5病例传播链为主,分别为210、100、35、23条,其它则包括6、7、8、11、12病例传播链,分别为6、7、4、1、1条。从传播链中患者居住地看,农村地区以同村为主,占农村区划传播链的89.39%(59/66),城市地区以同街道为主,占城市区划传播链的89.10%(286/321);传播链中患者发病时间间隔在半年、1年、1年半、2年、2年半、3年内及大于3年的传播条数分另为131、81、59、59、50、6和1;按少年(〈15岁)、青年(15-44岁)、中年(45-64岁)、老年(≥65岁)4个年龄段划分,不同性别跨1年龄段、同性别同年龄段、不同性别跨2年龄段、不同性别同年龄段、同性别跨1年龄段、同性别跨2年龄段、不同性别跨3年龄段的传播链条数分别为94、69、69、67、59、28、1条。结论以患者居住地为基础的传播链分析所获得的结核病传播链分子流行病学研究的病例比较符合现行结核病传播理论,在结核病传播链分子流行病学研究中切实可行。
- 吴玲王楠雷杰竺澎波孟繁荣谢贝杨瑜牛群谭守勇邝浩斌刘志辉
- 关键词:结核病传播链分子流行病学
- 治愈的肺结核患者治疗前后血清蛋白双向电泳初步比较分析被引量:1
- 2017年
- 选取2013年于广州市胸科医院治疗的初治肺结核,并经1个常规抗结核治疗疗程(6个月)治愈的42例患者作为研究对象,采用双向凝胶电泳技术(two dimension electrophoresis,2-DE)对研究对象治疗前、后的混合血清全组蛋白进行电泳分离,以PDQuest 8.0软件根据蛋白质点数、等电点(isoelectric point,PI)、相对分子质量(relative molecular mass,Mr)等进行差异蛋白描述性分析.结果显示,研究对象治疗前、后差异蛋白点共有15个,治疗后血清相对应差异蛋白有12个下调,3个上调,Mr为16 200~76 800,PI为5.0~6.8.由此可见,治愈的肺结核患者治疗前后血清中存在特异性的差异蛋白,差异蛋白可能作为结核病的重要诊断标志物或者治疗靶点.
- 杨瑜谢贝吴玲孟繁荣王楠雷杰张言斌彭德虎谭守勇刘志辉
- 关键词:血清蛋白质组学
- 应用MPT64检测建立结核分枝杆菌药敏新方法的初步探索被引量:4
- 2011年
- 目的初步探索应用MPT64检测建立一种结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)药敏新方法的可行性,确定药敏方法的实验条件和实验程序。方法通过检测MTB标准株和临床株的MPT64分泌,验证MPT64检测用于药敏结果指示的有效性;对不同方式制备的菌悬液进行MPT64检测,确定药敏方法的接种程序。结果指示有效性试验中,MTB标准株和60株MTB临床株的菌悬液MPT64检测均阳性;药敏接种程序确定试验中,直接挑取菌落方式配制的各种浓度MTB菌悬液(分别为1、0.1、0.01和0.001 mg/ml)MPT64检测均阳性,而生理盐水洗涤方式配制的各种浓度MTB菌悬液(分别为1、0.1、0.01和0.001mg/ml)MPT64检测均阴性。结论 MPT64检测能有效指示MTB的生长;洗涤方式制备菌悬液可避免MTB原代菌株产生的MPT64被带入培养基中,从而能够更真实地反映无药和含药培养基中MTB的生长情况。
- 尹小毛谢贝罗春明黄丽晶蔡杏珊李昕洁刘志辉
- 关键词:结核分枝杆菌药物敏感性试验MPT64