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仔猪金黄色葡萄球菌性心内膜炎研究被引量：7: 2009年; 目的鉴定引起仔猪心内膜炎和内脏器官形成血栓的病原,并研究其引起内脏器官的组织学变化特征。方法应用生化鉴定、16S rDNA克隆测序和rDNA限制性酶切分析(ARDRA)等方法鉴定分离菌株,并进行致病性、药物敏感性和病理组织学试验。结果经鉴定病原为同源性较高的金黄色葡萄球菌(S.aureus);动物试验结果表明S201和S202毒力较强;药敏试验结果表明S201分离菌株对青霉素具有较强的耐药性;病理组织学检察发现内脏器官坏死、血栓和DIC变化。结论具有致病性的S.aureus能够引起仔猪心内膜炎等病理变化。; 周玉龙谢金鑫范春玲邵红夏成侯喜林朴范泽; 关键词：仔猪金黄色葡萄球菌心内膜炎病原学

仔猪金黄色葡萄球菌性心内膜炎研究: 2007年11月,在黑龙江省西北部发生了两起以仔猪心内膜炎和脏器血栓为特征的传染病.从病死猪心脏血栓及其它内脏器官分离出4株形态特征相似的细菌,分别命名为S201、S202、S203和S204,经生化鉴定、以及16S r...; 周玉龙谢金鑫范春玲邵红倪洪波夏成侯喜林朴范泽; 关键词：仔猪金黄色葡萄球菌心内膜炎病原学

Shotgun质谱筛选与猪瘟病毒囊膜蛋白E^rns相互作用的候选宿主蛋白: 2013年; 猪瘟病毒(CSFV)Erns蛋白是瘟病毒属成员特有的囊膜糖蛋白,在病毒吸附和侵入靶细胞过程中发挥重要作用。本研究利用Erns特异性抗体对CSFV石门强毒株感染的PK-15细胞进行免疫共沉淀(Co-IP),对获得的蛋白复合物进行Shotgun质谱鉴定。结果显示,与阴性对照相比,病毒感染细胞样品中含有199种差异蛋白,其中可能包含与Erns作用的宿主细胞蛋白。同时,实验还对Co-IP蛋白样品进行SDS-PAGE,切取差异条带进行质谱分析以进一步验证Shotgun技术的蛋白筛选结果。通过Co-IP和Shotgun质谱分析,本研究筛选出一些可能在CSFV生命周期中与Erns互作用的宿主蛋白,为进一步研究CSFV在宿主细胞中的感染和复制的分子机制奠定基础。; 尹凝蒋大良龚文杰郭焕成谢金鑫夏乐乐余兴龙涂长春; 关键词：猪瘟病毒蛋白质相互作用 SHOTGUN

猪瘟病毒亚基因复制子及其细胞系的构建被引量：3: 2016年; 为探索猪瘟病毒(CSFV)的复制机理,本实验在前期CSFV流行株GD53全基因组测序的基础上,利用新霉素抗性基因(Neor)替换病毒结构蛋白基因以构建CSFV GD53株的亚基因组复制子(GD53-SGR)。首先构建含有T7-5'UTR-N^(pro)-Neor-EMCV/IRES-NS2-NS3-NS4A-NS4B-NS5A-NS5B-3'UTR的重组质粒pc DNA-GD53-SGR,将其利用T7 RNA聚合酶经体外转录制备的RNA转录本转染猪睾丸细胞系(ST)后,利用G418筛选含有GD53-SGR的ST细胞,构建ST-GD53-SGR细胞系。酶切鉴定及测序结果表明,重组质粒pc DNA-GD53-SGR构建正确,利用T7 RNA聚合酶体外转录后获得了与预期大小一致的GD53-SGR RNA。经RT-PCR和间接免疫荧光鉴定结果表明,获得了含有GD53-SGR的ST细胞系。本研究构建的CSFV ST-GD53-SGR细胞系有助于进一步了解CSFV非结构蛋白的功能,同时为CSFV的复制机制研究及抗病毒药物的研发奠定基础。; 张莉谢金鑫蒋大良余兴龙贾俊杰郭焕成龚文杰涂长春; 关键词：猪瘟病毒 ST细胞

猪瘟病毒非结构蛋白NS5A切割的机制研究: 作为严格细胞内寄生的微生物,病毒完全利用宿主细胞的生命维持系统来实现自身的复制增殖。因此,病毒与宿主细胞相互斗争决定了病毒的感染与致病。病毒感染宿主细胞后,半胱氨酸天门冬氨酸酶(caspases)启动细胞程序化死亡(即凋...; 谢金鑫; 关键词：猪瘟病毒 NS5A 钙蛋白酶病毒复制; 文献传递

猪瘟病毒N^(pro)蛋白及细胞内环境改变对其IRES活性的影响: 2016年; 位于猪瘟病毒(CSFV)基因组5'端非翻译区(UTR)的内部核糖体进入位点(IRES)在调控CSFV基因组的翻译中发挥重要的作用,为探索CSFV自身蛋白以及细胞内环境改变对IRES活性的影响,本研究构建了包含CSFV IRES在内的荧光素酶报告基因质粒,采用编码CSFV非结构蛋白N^(pro)和NS5A蛋白表达重组质粒转染细胞,或通过葡萄糖剥夺、氨基酸剥夺、氧化应激、血清饥饿等条件分别处理细胞,结果显示N^(pro)蛋白比之前报道的NS5A蛋白具有更显著的IRES抑制效果,并且抑制程度呈浓度依赖性;氨基酸剥夺、氧化应激及血清饥饿时可以显著降低CSFV IRES的活性,而葡萄糖剥夺对其活性无显著影响。本研究明确了CSFV非结构蛋白N^(pro)以及细胞内环境的改变可以调控IRES的活性,为进一步阐明CSFV复制增殖的分子机制提供新的实验依据。; 罗庆华贾俊杰张必凯米士江张莉谢金鑫刘艳涂长春; 关键词：猪瘟病毒 IRES 细胞内环境

大庆地区牛轮状病毒的分离及其全序列分析: A群轮状病毒(Rotavirus, RV)是新生牛病毒性腹泻的主要病原之一。牛轮状病毒(Bovine Rotavirus, BRV)属于呼肠孤病毒科(Reoviridae),轮状病毒属(Rotavirus)。牛轮状病毒性...; 谢金鑫; 关键词：牛轮状病毒病原学调查全序列分析基因型; 文献传递

牛源空肠弯曲杆菌及其HSP43重组蛋白免疫原性研究: 2010年; 为评价牛源空肠弯曲杆菌(C.jejuni)及其HSP43重组蛋白(rHSP43)的免疫原性,本研究采用常规方法分别制备白油、铝胶佐剂和不加佐剂的全菌体免疫原和rHSP43免疫原,分别以不同剂量经皮下接种途径免疫6周龄小鼠,应用间接ELISA方法检测两种免疫原免疫小鼠后抗体消长情况,并通过攻毒实验评价其保护效果。结果显示,其产生的抗体水平白油佐剂组要高于铝胶佐剂组,两者明显高于未加佐剂组(p<0.05)。在全菌体免疫原组中,5×109cfu/mL组免疫保护率高于5×107cfu/mL组,前者与5×105cfu/mL组相比较差异极显著(p<0.01)。在小鼠免疫后21d以1×1010剂量的C.jejuni攻菌,全菌体免疫原能够提供完全保护,而以白油佐剂乳化的rHSP43仅能提供75%的保护。本研究结果为C.jejuni的疫苗研制提供了实验依据。; 张佩鑫侯喜林柳强谢金鑫孙留霞周玉龙; 关键词：空肠弯曲杆菌免疫原性

中国大庆奶牛中发现轮状病毒G10P[11]被引量：2: 2010年; Group A rotavirus are the most frequently detected viral agent associated with the acute diarrhea in calves.In order to investigate the situation of rotavirus strains circulating in diary farms,a total of 117 fecal specimens were collected from diarrhea calves under 4 weeks-age on Yinluo diary farm in Daqing region in China from 2008 to 2009.Ten specimens were detected to be positive by a Rotavirus Group A Diagnostic Kit,which confirmed that the rotavirus was important viral agent associated with diarrhea in this diary farm.Based on the new classification system,G10P[11] genotype was determined in rotavirus positive samples.Sequence and Phylogenetic analysis indicated DQ-75 strain was introduced into our country with imported bovine.; 谢金鑫段招军李丹地李博文兰蓓李永清孔翔宇章青李杰; 关键词：牛轮状病毒基因型

仔猪金黄色葡萄球菌性心内膜炎研究: 2007年11月,在黑龙江省西北部发生了两起以仔猪心内膜炎和脏器血栓为特征的传染病。从病死猪心脏血栓及其它内脏器官分离出4株形态特征相似的细菌,分别命名为S、S、S和S,经生化鉴定、以及16s rDNA克隆测序和扩增的r...; 周玉龙谢金鑫范春玲邵红倪洪波夏成侯喜林朴范泽; 关键词：仔猪金黄色葡萄球菌心内膜炎病原学; 文献传递

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谢金鑫

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