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猫细小病毒非结构蛋白基因克隆及抗原表位预测: 2014年; 为了对猫细小病毒非结构蛋白基因进行克隆，试验根据猫细小病毒（CU-4）基因序列设计了1对引物，采用PCR方法对NS基因进行了扩增，将扩增产物纯化后克隆入pMD18-T载体，并应用DNAStar软件预测NS蛋白抗原表位。结果表明：NS基因的序列长度为2007bp，编码．668个氨基酸，厥段121～126aa？243～247aa、256—260aa、388—393aa、467～477aa、498～505aa、559—563aa、589—593aa和624—628aa等区域可能是线性表位优势区域。; 黎明闫冰李胜于天飞; 关键词：猫细小病毒非结构蛋白基因克隆表位预测

猪传染性胃肠炎病毒S基因B和C抗原位点片段在巴斯德毕赤酵母KM71中的表达: 2011年; 猪传染性胃肠炎（TGE）是猪的一种急性、高度接触性传染病，各种年龄及品种的猪对本病均易感，其中2周龄以下仔猪的死亡率可达100％。该病病原为猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）。; 于天飞黎明闫冰张建孙天国朱红标吕建伟; 关键词：猪传染性胃肠炎病毒巴斯德毕赤酵母抗原位点 S基因周龄

番鸭细小病毒YL08分离株NS1基因的克隆及序列分析被引量：1: 2017年; 为了了解番鸭细小病毒(MDPV)非结构蛋白(NS1)基因的分子生物学特性,试验根据GenBank中发布的其他MDPV基因序列,设计并合成可扩增NS1基因的特异性引物,利用PCR方法从MDPV阳性病料中获得MDPV YL08株NS1基因,将其克隆至载体p ET-32a(+)中,构建重组质粒p ET-32a-NS1,并进行同源性分析和构建系统发育进化树。结果表明:MDPV YL08分离株NS1基因全长为1 884 bp,编码627个氨基酸;MDPV YL08分离株NS1基因与国内外已发表的MDPV分离株核苷酸序列同源性为98.5%~99.4%,该分离株与福建株亲缘关系最近。; 于天飞黎明樊兴冬闫冰; 关键词：番鸭细小病毒 NS1基因非结构蛋白基因克隆

TGEV截短S基因片段在多酵母表达系统中的表达被引量：5: 2011年; 在多酵母表达系统中表达了含有猪传染性胃肠炎病毒S基因B和C抗原位点片段.经检测表明,不同类型酵母表达系统蛋白表达量和抗原性差异不大,研究中获得的重组蛋白为建立TGE血清学检测方法提供了必要的物质基础.; 于天飞黎明吕建伟闫冰张建孙天国朱红标孙一瑞; 关键词：猪传染性胃肠炎病毒 S基因

番鸭细小病毒YL08株VP1基因的克隆及序列分析被引量：3: 2016年; 为明确番鸭细小病毒结构蛋白（VP1）基因的分子特征,本研究利用PCR方法从番鸭细小病毒（MDPV）黑龙江分离株YL08中扩增出VP1基因,并对其进行了克隆测序和分析。基因测序结果表明：MDPV YL08株VP1基因全长为2 199 bp,编码732个氨基酸;MDPV YL08株VP1基因与国内外其他已发表的MDPV分离株核苷酸序列的同源性为92.7%~95.8%;系统进化树分析表明：MDPV各分离株在遗传进化上存在较为明显的地域性。本研究中MDPV YL08株与其他MDPV中国大陆分离株处于不同的分支,提示其可能具有独特的遗传起源。; 于天飞董慧莹黎明樊兴冬闫冰; 关键词：番鸭细小病毒 VP1 克隆

番鸭细小病毒非结构蛋白B细胞线性抗原表位的鉴定被引量：1: 2016年; 为了分析番鸭细小病毒(muscovy duck parvovirus,MDPV)YL08株NS1蛋白(氨基酸序列全长627 aa)抗原表位,本研究设计了一套覆盖整个NS1蛋白的短肽,短肽长为30个氨基酸左右,有10个氨基酸重叠。为了表达这些短肽,共设计合成了31对互补的寡核苷酸片段。每对寡核苷酸片段5'端磷酸化。上述寡核苷酸片段退火后,插入至原核表达载体p ET-32a(+)中,经IPTG诱导获得了相应重组蛋白的表达。利用切胶纯化的方法对表达蛋白进行了纯化。应用MDPV YL08株人工感染番鸭血清对表达的31个重组蛋白的抗原性进行了检测,Western blot结果表明,表达的7个融合蛋白NS(481-510)、NS(501-530)、NS(521-550)、NS(541-570)、NS(561-590)、NS(581-610)和NS(601-627)能被MDPV感染血清所识别,而其他融合蛋白不能被MDPV感染血清所识别。同时,上述7个表达的融合蛋白不与灭活MDPV免疫番鸭血清反应。综合上述试验结果,MDPV YL08株NS1蛋白的B细胞线性抗原表位区位于NS1蛋白的羧基末端481 aa^627 aa。Dot-ELISA试验表明,重组蛋白NS(501-530)的抗原性相对更强。本研究为建立基于抗原表位的MDPV自然感染和人工免疫番鸭的鉴别诊断方法提供了理论依据。; 于天飞董慧莹黎明樊兴冬闫冰于志丹; 关键词：番鸭细小病毒非结构蛋白抗原表位

病毒样颗粒及其原核表达制备的研究进展被引量：3: 2016年; 病毒样颗粒（virus—like particles，VLPs）的形态结构与天然病毒高度相似，且易于被免疫系统识别，能激发机体产生保护性免疫应答。VLPs不含有病毒基因，安全性高，很多抗原可以通过基因工程或化学耦连的方法在其表面展示，是一种理想的疫苗载体，可用于疫苗的研发。通过蛋白表达系统表达病毒衣壳蛋白是制备VLPs的主要手段。原核表达系统已经被广泛应用于基因工程药物的生产，具有安全性好、生产周期短、易于扩大生产等优点，可用于VLPs的制备。本文介绍了VLPs的结构及诱导免疫应答的方式，重点综述了利用原核表达系统制备VLPs的进展。; 于天飞张喜文谢鹏宇黎明樊兴冬闫冰; 关键词：原核表达病毒样颗粒疫苗

番鸭细小病毒病实验室诊断方法的研究进展被引量：1: 2016年; 番鸭细小病毒病由番鸭细小病毒（Muscovy duck parvovirus,MDPV）引起,以1~3周龄雏番鸭为易感的一种急性传染性、高死亡率的病毒病。番鸭细小病毒病一般可根据临床症状和剖检病理变化及其流行病学等情况作出初步诊断。然而在染病番鸭表现出非典型症状时很容易与番鸭的鹅细小病毒感染、雏鸭病毒性肝炎等疾病混淆,容易误诊。因此,对该病的确诊主要依靠血清学或病原学等实验室诊断方法。文章从血清学和分子生物学诊断方法两个方面综合阐述了番鸭细小病毒检测方法的研究进展。; 黎明樊兴冬闫冰于天飞张喜文于志丹; 关键词：血清学分子生物学

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闫冰