樊兴冬
- 作品数：10 被引量：20H指数：3
- 供职机构：黑龙江省兽医科学研究所更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 犬α-干扰素基因的克隆、原核表达及生物学活性鉴定
- 随着一些人畜共患病的发生，尤其是一些具有高致死性病毒性疾病的发生以及病原新毒株、变异株的不断出现，使得人们越来越重视家畜的疾病防治。 自1957年，Isaacs和Lindanmann发现干扰素（Interferon, I...
- 樊兴冬
- 关键词：基因克隆活性检测
- 文献传递
- 番鸭细小病毒非结构蛋白B细胞线性抗原表位的鉴定被引量：1
- 2016年
- 为了分析番鸭细小病毒(muscovy duck parvovirus,MDPV)YL08株NS1蛋白(氨基酸序列全长627 aa)抗原表位,本研究设计了一套覆盖整个NS1蛋白的短肽,短肽长为30个氨基酸左右,有10个氨基酸重叠。为了表达这些短肽,共设计合成了31对互补的寡核苷酸片段。每对寡核苷酸片段5'端磷酸化。上述寡核苷酸片段退火后,插入至原核表达载体p ET-32a(+)中,经IPTG诱导获得了相应重组蛋白的表达。利用切胶纯化的方法对表达蛋白进行了纯化。应用MDPV YL08株人工感染番鸭血清对表达的31个重组蛋白的抗原性进行了检测,Western blot结果表明,表达的7个融合蛋白NS(481-510)、NS(501-530)、NS(521-550)、NS(541-570)、NS(561-590)、NS(581-610)和NS(601-627)能被MDPV感染血清所识别,而其他融合蛋白不能被MDPV感染血清所识别。同时,上述7个表达的融合蛋白不与灭活MDPV免疫番鸭血清反应。综合上述试验结果,MDPV YL08株NS1蛋白的B细胞线性抗原表位区位于NS1蛋白的羧基末端481 aa^627 aa。Dot-ELISA试验表明,重组蛋白NS(501-530)的抗原性相对更强。本研究为建立基于抗原表位的MDPV自然感染和人工免疫番鸭的鉴别诊断方法提供了理论依据。
- 于天飞董慧莹黎明樊兴冬闫冰于志丹
- 关键词：番鸭细小病毒非结构蛋白抗原表位
- 德国牧羊犬α-干扰素基因扩增与分子进化分析
- 2013年
- 干扰素（IFN）是一类具有广泛生物学活性的蛋白质，具有调节机体免疫功能、抗病毒等作用，是机体防御系统的重要组成部分，是应用前景广阔的重要生物制剂之一。根据干扰素对酸和温度的敏感性以及来源的细胞类型，可以将动物干扰素分为两类，即耐酸的I型干扰素和对酸敏感的Ⅱ型干扰素。
- 樊兴冬李桂伟王丽坤高俊峰邵淑丽
- 关键词：Α-干扰素德国牧羊犬分子进化基因扩增机体免疫功能
- 番鸭细小病毒YL08分离株NS1基因的克隆及序列分析被引量：1
- 2017年
- 为了了解番鸭细小病毒(MDPV)非结构蛋白(NS1)基因的分子生物学特性,试验根据GenBank中发布的其他MDPV基因序列,设计并合成可扩增NS1基因的特异性引物,利用PCR方法从MDPV阳性病料中获得MDPV YL08株NS1基因,将其克隆至载体p ET-32a(+)中,构建重组质粒p ET-32a-NS1,并进行同源性分析和构建系统发育进化树。结果表明:MDPV YL08分离株NS1基因全长为1 884 bp,编码627个氨基酸;MDPV YL08分离株NS1基因与国内外已发表的MDPV分离株核苷酸序列同源性为98.5%~99.4%,该分离株与福建株亲缘关系最近。
- 于天飞黎明樊兴冬闫冰
- 关键词：番鸭细小病毒NS1基因非结构蛋白基因克隆
- 犬α-干扰素原核表达及其抗病毒活性检测
- 2012年
- 干扰素（interferon，IFN）是一类能诱导动物细胞产生多种广谱抗病毒蛋白的细胞因子，具有阻止病毒繁殖、调节机体免疫反应的生物学功能，是当今应用前景最为广阔的重要生物制剂之一。
- 李桂伟樊兴冬高俊峰王丽坤鹿凌岩
- 关键词：抗病毒蛋白Α-干扰素活性检测原核表达动物细胞免疫反应
- 番鸭细小病毒YL08株VP1基因的克隆及序列分析被引量：3
- 2016年
- 为明确番鸭细小病毒结构蛋白（VP1）基因的分子特征,本研究利用PCR方法从番鸭细小病毒（MDPV）黑龙江分离株YL08中扩增出VP1基因,并对其进行了克隆测序和分析。基因测序结果表明：MDPV YL08株VP1基因全长为2 199 bp,编码732个氨基酸;MDPV YL08株VP1基因与国内外其他已发表的MDPV分离株核苷酸序列的同源性为92.7%~95.8%;系统进化树分析表明：MDPV各分离株在遗传进化上存在较为明显的地域性。本研究中MDPV YL08株与其他MDPV中国大陆分离株处于不同的分支,提示其可能具有独特的遗传起源。
- 于天飞董慧莹黎明樊兴冬闫冰
- 关键词：番鸭细小病毒VP1克隆
- 不同方法提取卵黄抗体效果的比较被引量：9
- 2012年
- 为了优化卵黄抗体提取工艺以及产业化生产提供技术参考,从众多方法中初步筛选了较为适宜的水稀释法、辛酸法、乙酸-乙酸钠法、酚沉淀法和海藻酸钠法,并比较了5种方法的提取工艺、生产成本、卵黄抗体提取量及其效价。试验结果表明,辛酸法的提取液体回收率最高,达到171%;辛酸法提取蛋白的浓度最高,为6.6 mg/mL;辛酸法和海藻酸钠法提取卵黄抗体的凝集价最高,为1∶128。综合各种因素考虑,辛酸法是提取卵黄抗体较为理想的方法。
- 吴博王爽樊兴冬刘宇李丹史同瑞
- 关键词：卵黄抗体
- 病毒样颗粒及其原核表达制备的研究进展被引量：3
- 2016年
- 病毒样颗粒（virus—like particles，VLPs）的形态结构与天然病毒高度相似，且易于被免疫系统识别，能激发机体产生保护性免疫应答。VLPs不含有病毒基因，安全性高，很多抗原可以通过基因工程或化学耦连的方法在其表面展示，是一种理想的疫苗载体，可用于疫苗的研发。通过蛋白表达系统表达病毒衣壳蛋白是制备VLPs的主要手段。原核表达系统已经被广泛应用于基因工程药物的生产，具有安全性好、生产周期短、易于扩大生产等优点，可用于VLPs的制备。本文介绍了VLPs的结构及诱导免疫应答的方式，重点综述了利用原核表达系统制备VLPs的进展。
- 于天飞张喜文谢鹏宇黎明樊兴冬闫冰
- 关键词：原核表达病毒样颗粒疫苗
- 番鸭细小病毒病实验室诊断方法的研究进展被引量：1
- 2016年
- 番鸭细小病毒病由番鸭细小病毒（Muscovy duck parvovirus,MDPV）引起,以1~3周龄雏番鸭为易感的一种急性传染性、高死亡率的病毒病。番鸭细小病毒病一般可根据临床症状和剖检病理变化及其流行病学等情况作出初步诊断。然而在染病番鸭表现出非典型症状时很容易与番鸭的鹅细小病毒感染、雏鸭病毒性肝炎等疾病混淆,容易误诊。因此,对该病的确诊主要依靠血清学或病原学等实验室诊断方法。文章从血清学和分子生物学诊断方法两个方面综合阐述了番鸭细小病毒检测方法的研究进展。
- 黎明樊兴冬闫冰于天飞张喜文于志丹
- 关键词：血清学分子生物学
- 犬α-干扰素蛋白原核表达及条件优化被引量：2
- 2012年
- 根据GenBank发表的犬α-干扰素(IFN-α)基因核酸序列(EF990625),去掉信号肽后设计并合成1对引物,利用PCR技术从犬肝脏基因组DNA中扩增犬α-干扰素基因,并克隆至表达载体pBV220,经过PCR、酶切、测序鉴定后转化DH-5α、BL2、Rosetta原核表达系统,通过不同宿主菌及不同诱导时间等条件优化,确定蛋白在DH-5α宿主菌中诱导4h表达量最高,表达量约为32%。本试验的完成为蛋白的进一步纯化奠定了基础。
- 李桂伟周庆民樊兴冬冯万宇秦博高俊峰
- 关键词：克隆原核表达
