闫博
- 作品数：12 被引量：10H指数：2
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 生理低氧对人晶状体上皮细胞系基因表达谱的影响被引量：2
- 2015年
- 目的探讨生理低氧条件下与常规氧环境下培养的人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cell,HLEC)在抗氧化能力及基因表达谱上的差异。方法 HLEC传代培养24 h后,分别置于体积分数21%常氧培养箱、体积分数1%低氧培养箱孵育24 h,消化、超速离心后收集细胞上清分别检测SOD、CAT活性以及GSH含量,Trizol提取细胞总RNA进氉行基因表达谱检测,生物信息学软件DAVID分析差异基因的功能聚类,qRT-PCR验证差异基因。结果低氧组细胞的SOD、CAT酶活性及GSH含量均低于常氧组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。表达谱芯片结果显示:符合差异表达标准的基因中,在低氧组细胞上调的基因有319个,下调的基因有83个。Gene Ontology分析显示:319个上调基因聚类于148个功能分类中,富集值最高的功能分类为低氧反应。选取5个上调基因进行qRT-PCR验证显示:DDIT4、VEGFA、EDN1、VLDLR、EGLN1在低氧组中的表达量均高于常氧组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论生理低氧状态下HLEC的抗氧化能力弱于常氧组,两种氧环境下细胞的基因表达谱不同,提示相应的抗氧化损伤机制可能存在差异。
- 王嵩梅林闫博杨安钢赵晶严宏
- 关键词：人晶状体上皮细胞基因表达谱
- 雌激素诱导的caspase-8/ER融合蛋白抗肿瘤作用研究
- 目的：将以caspase-8为主导的细胞凋亡的分子机制导入肿瘤细胞,并以一种可被小分子诱导的方式启动该机制,可以选择性地杀伤肿瘤细胞。意义：为激素依赖性肿瘤的治疗开辟一种新思路。方法：用RT-PCR方法获得人caspas...
- 赵智凝贾林涛闫博白久旭李轶杨安钢
- 关键词：雌激素诱导凋亡
- 人源化抗HER2单链抗体基因的构建、表达及亲和活性鉴定
- 研究背景:单克隆抗体人源化(Monoclonal humanization)是指利用抗体工程技术将动物来源的单克隆抗体的抗原结合区与人源抗体进行不同程度的拼接,以降低这些单抗的免疫原性。本课题组构建的靶向HER2分子的免...
- 欧阳清闫博赵晶杨安钢
- 关键词：免疫原性
- 文献传递
- 曲古抑菌素A通过上调KLF4表达诱导人子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡被引量：1
- 2012年
- 目的:观察组蛋白乙酰基转移酶(histone deacetylase,HDAC)抑制剂曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)对子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡的影响,并研究其与Krupell样因子4(Krupell-like factor 4,KLF4)的关系。方法:0、50、100、200、300、500ng/ml TSA作用于Ishikawa细胞24 h,或100 ng/ml TSA作用于Ishikawa细胞0、4、8、12、24、48 h,流式细胞术检测Ishikawa细胞凋亡情况,qRT-PCR检测Ishikawa细胞中KLF4 mRNA的表达情况;将KLF4真核表达载体pcDNA3-KLF4转染Ishikawa细胞,流式细胞术检测Ishikawa细胞凋亡情况。结果:100 ng/ml TSA作用于Ishikawa细胞24 h后,Ishikawa细胞的凋亡率显著高于对照组[(30.6±4.5)%vs(7.53±0.93)%,P<0.05];不同质量浓度TSA处理Ishikawa细胞24 h后或100 ng/ml TSA作用Ishikawa细胞不同时间后,KLF4 mRNA表达水平以剂量依赖和时间依赖方式明显增高(P<0.05);pcDNA3-KLF4转染后Ishikawa细胞凋亡率显著增加[(27.3±2.7)%vs(4.53±1.75)%,P<0.05]。结论:TSA能通过诱导子宫内膜癌Ishikawa细胞中KLF4的表达,促进Ishikawa细胞发生凋亡。
- 赵智凝周强白久旭闫博秦炜炜王涛贾林涛杨安钢
- 关键词：曲古抑菌素A子宫内膜癌ISHIKAWA细胞
- 氧化损伤诱导的人晶状体上皮细胞系基因表达谱的差异和表型改变
- 2016年
- 目的:探讨人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLEC)氧化刺激后基因表达谱的差异以及相应的表型改变。方法:培养人晶状体上皮细胞系HLE-B3并给予H_2O_2刺激。24h后,提取细胞总RNA进行基因表达谱芯片检测,并采用生物信息学数据库DAVID对氧化刺激组相比对照组显著上调的基因进行Gene Ontology(GO)功能富集分析。RT-q PCR对上调的基因进行验证。通过MTT和流式细胞仪检测细胞凋亡水平。结果:表达谱芯片结果显示,氧化刺激造成HLEC中367个基因上调,GO分析表明这些基因富集于310个功能类别中,主要包括p53信号通路、细胞凋亡通路、细胞程序性死亡通路等。RT-q PCR结果证实,6个主要参与促凋亡或抗凋亡调节的基因,包括BCL2A1、TP53I3、FAS、ZMAT3、DDB2和BCL2L1,在氧化刺激后表达水平明显上升。MTT实验和流式细胞仪检测结果显示,H_2O_2刺激后HLEC凋亡逐渐上升,是细胞氧化损伤的主要表现。结论:氧化刺激可同时诱导HLEC中促凋亡基因和抗凋亡基因表达水平上调,但最终仍然导致了细胞凋亡。
- 梅林王嵩闫博杨安钢赵晶严宏
- 关键词：人晶状体上皮细胞表达谱芯片细胞凋亡
- 雌激素诱导的caspase-8/ER融合蛋白抗肿瘤作用研究
- 将以caspase-8为主导的细胞凋亡的分子机制导入肿瘤细胞,并以一种可被小分子诱导的方式启动该机制,可以选择性地杀伤肿瘤细胞。通过RT-PCR方法获得人caspase-8和ER基因,以适当方式连接构建融合蛋白基因,并克...
- 赵智凝贾林涛李轶闫博杨安钢
- 文献传递
- TSA通过上调KLF4基因表达诱导人子宫内膜癌细胞Ishikawa发生调亡
- Trichostatin A简称TSA,是一种常用的HDAC抑制剂,可以通透细胞,选择性抑制HDAC.
TSA抑制HDAC后可以导致组蛋白乙酰化水平升高,引起一些基因的转录水平提高;也可以升高其它一些蛋白的乙酰...
- 赵智凝周强白久旭闫博王涛贾林涛杨安钢
- 关键词：人子宫内膜癌
- 免疫促凋亡分子scFv15-Fdt-HA2-tBid的基因构建、表达及对HBsAg阳性肝细胞癌的杀伤作用
- 肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是最常见的恶性肿瘤之一，手术治疗复发率高，传统放、化疗对正常组织毒害大，本组建立的免疫促凋亡策略已经在HER2肿瘤模型中证实具有明确的抗肿瘤作用，该策略...
- 闫博
- 关键词：HBSAGTBID
- 文献传递
- 免疫促凋亡分子scFv-Fdt-HA2-tBid的基因构建、表达及对HBsAg阳性肝细胞癌的杀伤作用
- 目的:将靶向HBsAg的单链抗体(scFv)、可被Furin蛋白酶切割的Fdt序列、具有转位功能的HA2序列和人体自身促凋亡分子tBid融合表达,构建新型的免疫促凋亡分子scFv-Fdt-HA2-tBid,为HBV相关的...
- 闫博贾小飞赵晶杨安钢
- 文献传递
- 单链抗体e23sFv的人源化抗体制备及其在HER2靶向肿瘤杀伤中的功能鉴定
- 研究背景及目的：抗体偶联药物是肿瘤靶向治疗的重要策略之一，但其鼠源单链抗体组分对人体具有潜在的免疫原性。本研究拟对鼠源单链抗体e23sFv进行人源化改造，并评价其应用于本组所建立靶向促凋亡策略的有效性。
- 欧阳清闫博赵晶杨安钢
- 关键词：人源化肿瘤靶向治疗
