陈春芳
- 作品数：5 被引量：2H指数：1
- 供职机构：南华大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省科技厅项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 小鼠PDZ9的克隆及亚细胞定位分析
- 目的：克隆小鼠基因PDZ9并构建pEGFP-C1载体进行亚细胞定位分析。方法：利用RT-PCR技术扩增小鼠基因PDZ9开放阅读框序列。将目的基因片段插入pGEM-T载体中,经双酶切和测序鉴定后,定向克隆至荧光表达载体pE...
- 姚峰刘鑫王宗保吴端生陈春芳贺震余坚谭翔文
- 关键词：基因克隆亚细胞定位动物模型
- 文献传递
- 四碘荧光素钠-邻啡啰啉荧光光谱法测定水中镉
- 2014年
- 目的建立一种荧光光谱测定水中镉的新方法。方法在pH=6.0的乙酸-乙酸钠(HAc-NaAc)缓冲介质中,镉(Cd2+)与四碘荧光素钠、邻啡啰啉反应形成络合物,体系的最大激发波长为525nm,发射波长为531 nm,在一定范围内,其荧光强度与Cd2+的浓度成线性关系。结果 Cd2+浓度在3.92×10-6mol/L^2.00×10-5mol/L范围内,荧光强度变化值(ΔF)与镉离子浓度(cCd2+)有良好的线性关系,线性方程为ΔF=58.9c(×10-5mol/L)+4.8,相关系数r=0.999 2,检出限为1.91×10-6mol/L,样品加标回收率为86.6%~101.5%。结论本方法可直接用于水中镉的测定,选择性好,准确可靠,结果满意。
- 陈春芳程健琳李程张涛何爱桃
- 关键词：镉荧光光谱法
- 人hole基因的克隆和序列分析
- 2009年
- 目的克隆人的hole基因,并进行生物信息学分析。方法以胚胎心脏cDNA文库为模板,进行PCR扩增得到hole基因的ORF。并进行亚克隆入PMD18-T载体,转化大肠杆菌DH5α,用Xho1进行酶切和测序鉴定阳性克隆。利用Internet和GeneBank数据库对测序结果正确的hole基因进行生物信息学分析。结果克隆了hole基因,测序结果正确;生物信息学分析表明,hole基因开放读码为960 bp,编码319个氨基酸;同源性分析表明,人的hole与鼠、鸡hole蛋白具有高度同源性。多种组织的半定量RT-PCR研究表明,该基因在心脏、肝脏、肺、脑、肾脏、脾脏、胰脏均有表达,其心脏表达最高。结论成功克隆hole基因,对其功能进行了初步预测,为进一步的功能研究打下基础。
- 姚峰周军媚王佐陈春芳吴端生刘鑫余坚
- 关键词：PCR克隆
- 一个新的睾丸特异表达小鼠基因电子克隆与序列分析被引量：1
- 2010年
- 目的电子克隆小鼠睾丸组织特异表达新的基因。方法运用"数据库消减杂交"筛选出一个在小鼠睾丸中特异表达的新基因(GI:223462116)。结果序列分析显示该cDNA长1 428 bp,有一个801 bp的开放阅读框,编码266个氨基酸,该蛋白质明显的含有4个亲水性区域,2个疏水性区域。结论所克隆的cDNA序列为小鼠的一个新基因。
- 姚峰周军媚陈春芳贺震刘鑫
- 关键词：电子克隆
- 小鼠睾丸基因PDZD9的克隆及亚细胞定位分析被引量：1
- 2012年
- 目的克隆小鼠睾丸基因PDZD9并构建pEGFP-C1-PDZD9重组载体进行亚细胞定位分析。方法提取小鼠睾丸RNA,利用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)技术从小鼠睾丸cDNA中分离PDZD9基因。将PDZD9基因定向克隆至带有绿色荧光报告基因的真核表达载体pEGFP-C1。利用阳离子聚合物方法转染COS7细胞,荧光显微镜下观察其亚细胞定位。结果小鼠睾丸基因PDZD9克隆成功,成功构建真核表达载体pEGFP-C1-PDZD9,亚细胞分析表明该蛋白定位于细胞核和细胞质中,主要分布在细胞核中。结论成功克隆了小鼠睾丸基因PDZD9,并初步分析了其在细胞中的定位情况,为下一步对PDZD9的功能研究奠定了基础。
- 周军媚姚峰刘鑫王宗保吴端生陈春芳贺震余坚
- 关键词：克隆转染亚细胞定位
