刘春风
- 作品数：4 被引量：18H指数：3
- 供职机构：江南大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：长江学者和创新团队发展计划国家高技术研究发展计划“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学更多>>
- 低蛋白酶A酵母菌株的选育及其基因层面初探被引量：2
- 2011年
- 以啤酒酵母M4Ⅰ为出发菌株,紫外诱变后通过96微孔板法初筛、Bradford法复筛,采用荧光底物法确定酵母蛋白酶A分泌量,最终得到4株低产蛋白酶A的突变株M4Ⅰ-4、M4Ⅰ-27、M4Ⅰ-39、M4Ⅰ-45。与出发菌株相比,4株突变株发酵后的蛋白酶A活力分别降低了83.6%、29.8%、80.5%、79.7%,双乙酰还原能力相近,各种风味物质含量除M4Ⅰ-27略有降低。经氨基酸序列比对分析发现,4株突变株共有7个氨基酸发生突变、1个同义突变。
- 李刚李崎李永仙郑飞云刘春风
- 关键词：紫外诱变蛋白酶A
- 响应曲面法优化麦芽中β-淀粉酶提取工艺的研究被引量：4
- 2008年
- 通过实验比较大麦发芽前后β-淀粉酶活力的变化及影响麦芽β-淀粉酶提取的主要因素。在单因素实验基础上,采用Box-Behnken设计中的五因素三水平的响应曲面分析法,建立了麦芽中β-淀粉酶提取的二次多项数学模型,考察了各因素对β-淀粉酶提取的影响。结果表明,大麦发芽第3dβ-淀粉酶活力最大;β-淀粉酶提取优化工艺条件为:料液比1∶17、温度44℃、缓冲液pH6.4、提取时间2.3h,还原剂用量1.64g/L;在此工艺条件下,每克绝干麦芽提取得到的β-淀粉酶酶活为1230.22U。
- 靳纪培黄军刘春风李永仙李崎顾国贤
- 关键词：Β-淀粉酶响应曲面法
- 陶瓷微滤膜及其在食品与发酵行业中的应用被引量：7
- 2008年
- 介绍了陶瓷微滤膜分高技术的发展过程及其工作原理,综述了其在食品与发酵工业中的应用概况,包括酒类、发酵产品、乳制品、果汁和茶饮料、粮油加工、水处理、精细化工、生物柴油等领域。
- 郭善辉刘春风蒋蕴珍姚专诸葛健
- 关键词：陶瓷膜食品发酵
- 通过体外分子进化技术提高淀粉液化芽胞杆菌BS5582 β-1,3-1,4-葡聚糖酶热稳定性被引量：5
- 2010年
- 应用基于易错PCR随机突变的体外分子进化技术,来提高淀粉液化芽胞杆菌β-1,3-1,4-葡聚糖酶的热稳定性。利用建立的基于96微孔板高通量筛选模型,经过两轮定向进化与高通量筛选,共筛选得到3株热稳定性明显提高的突变体2-JF-01、2-JF-02和2-JF-03。将野生型β-葡聚糖酶基因和热稳定性提高的突变基因的高效表达产物经镍亲和层析柱纯化后,酶学性质测定表明突变酶2-JF-01、2-JF-02和2-JF-03的T50值分别比野生酶(53℃)提高2.2℃、5.5℃和3.5℃。突变酶2-JF-01、2-JF-02和2-JF-03在60℃下的半衰期t1/2,60℃(min)分别比野生酶(18min)提高4min、13min和17min。突变酶2-JF-01、2-JF-02和2-JF-03的Vmax值为286μmol/(mg·min)、304μmol/(mg·min)和279μmol/(mg·min),分别比野生型下降8.3%、2.6%和10.6%。突变酶2-JF-01、2-JF-02和2-JF-03的Km值分别为6.76mg/mL、6.19μmg/mL和6.84mg/mL,与野生型(6.29mg/mL)基本相同。序列分析表明,3个突变体共发生7个氨基酸替代:2-JF-01(N36S,G213R)、2-JF-02(C86R,S115I,N150G)和2-JF-03(E156V,K105R)。同源建模表明,7个氨基酸替代中5个位于蛋白质表面或表面洞穴中,42.8%的替代氨基酸是精氨酸,也表明精氨酸在提高β-1,3-1,4-葡聚糖酶热稳定性中起重要的作用。
- 秦久福高威威李崎李永仙郑飞云刘春风顾国贤
- 关键词：Β-1,3-1,4-葡聚糖酶体外分子进化易错PCR热稳定性
