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刘荭: 作品数：119 被引量：484H指数：14; 供职机构：深圳出入境检验检疫局更多>>; 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家高技术研究发展计划公益性行业科研专项更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>

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一种用于鲤春病毒血症病毒检测的核酸适配体及其应用: 本申请公开了一种用于鲤春病毒血症病毒检测的核酸适配体及其应用。本申请的用于鲤春病毒血症病毒检测的核酸适配体，包括式一所示通式的一种或两种DNA片段，式一：5’‑P1‑N‑P2‑...; 于力王津津郑晓聪贾鹏何俊强刘荭史秀杰兰文升杨锦舜

对虾白斑综合症病毒变性高效液相色谱检测方法的建立与应用: 2011年; 据对虾白斑综合症病毒(WSSV)的基因保守序列,使用Primer Explorer V3软件设计了2条引物,利用PCR的扩增产物,结合变性高效液相色谱(DHPLC)技术,建立了一种对虾白斑综合症病毒的DHPLC快速检测方法。该检测方法特异性好,与传染性皮下和造血器官坏死病毒、斑节对虾杆状病毒、肝胰腺细小病毒、对虾杆状病毒以及对虾基因组DNA无交叉反应;检测灵敏度较高,约为10-5ng/μL,高于常规PCR及荧光定量PCR的灵敏度。用建立的DHPLC方法对100尾对虾样品进行了临床检测,结果与荧光定量PCR检测结果一致。WSSV的DHPLC检测方法,特异性强、灵敏度高,是对WSSV进行有效检测的一种新方法。; 赵巍马亚赵玉然杨大伟梁成珠刘荭何俊强史秀杰岳志芹; 关键词：变性高效液相色谱对虾白斑综合症病毒

锦鲤疱疹病毒的检测与人工感染试验被引量：14: 2005年; 基于在美国和以色列普通鲤鱼和锦鲤中分离了一种新的疱疹病毒,命名为锦鲤疱疹病毒(KHV)或鲤鱼肾炎鳃坏死病毒(CNGV).本文根据GenBank登记的KHV序列设计了两对特异性引物,在我国患病的锦鲤样品中检测到该类病毒DNA.经对PCR产物进行克隆测序,结果表明与GenBank登记序列完全一致.用组织匀浆上清人工感染健康锦鲤,并从试验感染鱼组织中检测到KHV病毒DNA.该结果表明KHV或CNGV已经传播到我国,应引起重视.; 周永灿袁军法任武泽刘荭江育林石正丽; 关键词：PCR检测

四种主要水生动物病毒纳米荧光试纸条病原快速鉴定技术的研究和应用: 刘荭郑晓聪贾鹏何俊强兰文升史秀杰陈兵王津津于力; 该研究建立了快速检测四种主要水生动物病毒-鲤春病毒血症病毒(SVCV)、流行性造血器官坏死病毒(EHNV)、传染性造血器官坏死病毒(IHNV)和病毒性出血性败血症病毒(VHSV)的纳米荧光试纸条的制备方法.利用荧光纳米晶...; 关键词：

锦鲤疱疹病毒病的研究进展被引量：14: 2006年; 刘宗晓刘荭江育林; 关键词：疱疹病毒病锦鲤 DNA聚合酶基因膜蛋白基因衣壳蛋白基因 DNA病毒

鲤春病毒血症病毒单克隆抗体的制备及其特性鉴定被引量：4: 2011年; 为获得针对鲤春病毒血症病毒(SVCV)特异性的单克隆抗体(MAb),以纯化的SVCV为抗原,免疫BALB/c小鼠。将免疫鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,采用间接ELISA法筛选获得4个能稳定分泌抗SVCV MAb的杂交瘤细胞株;4个杂交瘤细胞制备腹水的MAb效价为1∶160000～1∶640000。亚型鉴定结果表明,这些MAb分属2个亚型(1F1、3E1,IgG2a;3F5、4F9,IgG1),轻链均为Κ链。Western blot分析显示,MAb1F1、3F5、4F9能特异性地识别SVCV的N蛋白(47ku),3E1能特异性地识别SVCV的G蛋白(69ku)。采用相加ELISA法对抗原表位分析结果显示,1F1、3F5、4F9可能识别相同的表位,3E1则识别不同的表位。间接免疫荧光试验结果显示4株MAb均能对染毒病灶产生特异性的荧光染色。这些MAb的制备为SVCV免疫学检测方法的建立奠定了基础。; 张朋刘荭陈孝煊吴志新余剑敏杜娟兰文升史秀杰郑晓聪何俊强贾鹏申斯思朱家增; 关键词：鲤春病毒血症病毒单克隆抗体 N蛋白

聚合酶链式反应和基因芯片技术的研究及在主要水生动物病毒检疫和监测中的应用: 传染性造血器官坏死毒(IHNV)、鲤春血症病毒(SVCV)、流行性造血器官坏死病毒(EHNV)、病毒性出血性败血症(VHSV)、传染性胰脏坏死(IPNV)、草鱼出血病病毒(GCHV)、真鲷虹彩病毒(RSIV)、病毒性神经...; 刘荭; 关键词：聚合酶链式反应逆转录聚合酶链式反应基因芯片检疫监测

狗鱼幼鱼弹状病毒RT-PCR检测方法和试剂盒: 本发明公开了狗鱼幼鱼弹状病毒(PFRV)的RT-PCR检测方法和试剂盒。本发明的检测方法和试剂盒使用特异性引物对PFRV进行检测，引物具有很好的引发特性，具有较宽的Mg2+浓度、引物浓度、dNTP浓...; 刘荭兰文升何俊强叶奕优陈红莲; 文献传递

云南锦鲤养殖场鲤浮肿病毒的鉴定及基因型分析被引量：14: 2017年; 锦鲤睡眠病(Koi sleepy disease,KSD)是一种由鲤浮肿病毒(Carp edema virus,CEV)引起鲤科鱼类死亡的病毒性传染病,已经对世界鲤科鱼类养殖业造成危害。2016年,中国云南某锦鲤养殖场养殖的锦鲤出现以体表出血、眼睛凹陷、沉于池底昏睡为主要临床症状的疾病,发病水温为11℃~20℃,累计死亡率30%~50%。从该养殖场不同池塘采集两个样品,使用nested PCR和real-time PCR方法进行实验室诊断。结果表明,两个样品CEV检测结果均为阳性,发病锦鲤鳃和肾脏CEV病毒载量为250.02~1 332.94拷贝/250ng,鳃中CEV病毒载量约为肾脏的6~7倍。在排除寄生虫、细菌、SVCV和KHV感染后,推测CEV可能是引起此次云南锦鲤场发生疫情的病原,但还需回归感染实验做进一步验证。基于CEV P4a基因的遗传进化分析结果表明,此次从云南发病锦鲤检出的两个CEV毒株均属于IIa基因型,且与英国(R083株)和日本CEV毒株(CyPP-3)的遗传进化关系最近。; 温智清刘莹唐绍林王飞王飞王津津于力郑晓聪于力兰文升郑晓聪刘荭; 关键词：基因型

鲤鱼TLR2过表达对下游干扰素相关免疫因子转录水平的影响被引量：2: 2015年; 目的探讨鲤鱼Toll样受体2(Cc TLR2)过表达对下游干扰素相关免疫因子转录水平的影响及其介导的抗病毒效应。方法构建过表达载体p EGFP-N1-Cc TLR2,并将p EGFP-N1-Cc TLR2和空载体p EGFP-N1同时转染鲤鱼上皮瘤(epithelioma papulosum cyprinid,EPC)细胞;采用real-time PCR检测转染后0、6、12、24、48和72 h细胞内干扰素调节因子3(interferon regulatory factor 3,IRF3)和IRF7以及干扰素刺激基因ISG15、Mx1、PKR和Viperin的m RNA转录水平;并通过鲤春病毒血症病毒(spring viraemia of carp virus,SVCV)感染实验验证TLR2的抗病毒效应。结果在EPC细胞中转染p EGFP-N1-Cc TLR2后IRF3、IRF7、ISG15、Mx1、PKR和Viperin的m RNA转录水平均出现明显上调,在转染后48 h,其转录水平分别相当于转染前的6.3倍、16.5倍、15.0倍、13.0倍、7.6倍和92.4倍,差异显著(P<0.01);与转染p EGFP-N1空载体相比,转染p EGFP-N1-Cc TLR2的EPC细胞IRF3、IRF7、ISG15、Mx1、PKR和Viperin的m RNA转录水平在转染后48 h和72 h分别上调2倍和2.2倍、1.5倍和2.4倍、3.9倍和4.7倍、3.4倍和6.7倍、5.4倍和3.7倍、6.6倍和15.6倍,差异显著(P<0.01);转染p EGFP-N1组在感染SVCV后6、12、24、48和72 h的病毒量分别是转染p EGFP-N1-Cc TLR2组的1.1倍、2.4倍、3.8倍、11.7倍、11.4倍,差异显著(P<0.01)。结论鲤鱼TLR2在EPC细胞中过表达可上调IRF3、IRF7、ISG15、Mx1、PKR和Viperin基因的m RNA转录水平,以及抑制SVCV的增殖;提示鱼类TLR2可通过激活IRF3或/和IRF7信号通路诱导I-IFN的产生,进而诱导ISG15、Mx1、PKR和Viperin等干扰素刺激基因表达抗病毒蛋白发挥抗病毒免疫效应。; 韦信贤贾鹏童桂香王津津郑晓聪何俊强杨先乐刘荭; 关键词：TOLL样受体2 过表达干扰素调节因子转录水平

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