刘雄昊
- 作品数：21 被引量：24H指数：3
- 供职机构：中南大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 利用核糖体基因区打靶载体靶向表达改造型人凝血因子Ⅷ被引量：4
- 2005年
- 构建了携带改造型hFⅧ(hFⅧ-BDDAK39)的核糖体基因区靶向表达载体pHrneo-BDDAK39,并将其转入人纤维肉瘤细胞(HT1080),检测其定点整合的能力及hFⅧ-BDDAK39的表达情况.结果显示,pHrneo-BDDAK39能够成功地将hFⅧ-BDDAK39靶入到HT1080细胞的核糖体基因区,定点整合效率达到2.0×10^(-5),并且靶入的hFⅧ-BDDAK39能有效表达,表达量为(32±5)ng·10~6细胞^-1·24h^(-1).这为利用此靶向表达载体进行血友病A的基因治疗提供了重要的实验依据.
- 刘雄昊刘慕君佘华文路薛志刚梁德生蔡芳潘乾龙志高邬玲阡戴和平夏昆夏家辉
- 关键词：靶向表达核糖体基因改造型打靶载体纤维肉瘤
- 核糖体基因区定点修饰hiPSCs来源的MSCs的抗肿瘤研究
- 目的间充质干细胞(MSCs)具有免疫原性低、肿瘤组织趋化性的特点,可用于携带肿瘤抑制因子介导抗肿瘤治疗。但是,通过组织分离来源的MSCs数量有限,并且该方法对患者具有创伤性,从而影响MSCs的临床应用。随着诱导多潜能干细...
- 刘博谌飞吴涌王晓琳冯劢李卓周妙金王延迟邬玲仟刘雄昊梁德生
- 文献传递
- 一种衍生MSCs来源外泌体制备方法及制备的外泌体和应用
- 本发明公开了一种衍生MSCs来源外泌体制备方法及制备的外泌体和应用，涉及细胞外泌体制备技术领域，本发明通过构建携带ARRDC1‑TRAIL融合基因的rDNA区打靶载体mini‑pHrn‑ARRDC1‑TRAIL，将融合基...
- 刘雄昊刘慕君
- 核糖体基因区打靶载体电转染肝细胞的孵育条件的优化
- 2010年
- 目的:提高核糖体基因区打靶载体的转染效率,优化其电转染肝细胞的孵育条件。方法:在其它电转染参数一致的前提下,设计了6组不同的孵育条件,通过分析转染后细胞活率以及48h后目的基因GFP的表达效率,来比较多组不同的孵育条件对电转染效率的影响。结果:6组条件中,转染前21℃,1min,转染后21℃,1min孵育,得到的转染效率最优,比其它的条件得到的转染效率高50%。结论:孵育条件的优化能提高为核糖体基因区靶向表达载体在体外电转染肝细胞的转染效率。
- 曹善仁刘慕君刘雄昊伍汇慧邬玲仟梁德生
- 关键词：电转染
- 利用携带人凝血因子Ⅷ的核糖体基因区打靶载体进行血友病A基因治疗的研究
- 血友病A是一种X-连锁隐性遗传病，在男性中的发病率约为1-2／10000。血友病A的临床症状主要为自发性关节、软组织或其他组织的出血、血肿，常可致残，甚至危及生命。其致病机制是由于编码凝血因子Ⅷ(简称FⅧ)的基因先天性异...
- 刘雄昊
- 关键词：血友病A
- 文献传递
- 硅纳米颗粒的生物毒理学研究被引量：8
- 2006年
- 目的:研究硅颗粒制成纳米颗粒后的长期毒性及生殖毒性。方法:将硅纳米颗粒经尾静脉注入小白鼠体内,收集尿液离心后,电镜下观察是否有纳米颗粒的存在,并将小白鼠雌雄合笼交配产生后代,观察其产仔率,同时在电镜下观察纳米颗粒在亲代鼠各脏器中的分布。结果:硅纳米颗粒进入小鼠体内后,分布于小鼠各脏器,并能经肾脏排泄,同时注入纳米颗粒的小鼠能正常的繁殖后代。结论:硅纳米颗粒没有毒性并能在体内使用。
- 薛志刚朱晒红潘乾梁德生李玉梅刘雄昊夏昆夏家辉
- 关键词：小鼠
- 真核细胞中多重表达框mRNA的选择性翻译起始(英文)被引量：1
- 2015年
- 扫描模型和遗漏扫描模型是真核生物m RNA翻译起始的两种主要机制,但其仍存在某些例外情况,如对具有多顺反子结构的m RNA,选择性翻译起始的发生机制目前仍不清楚.本研究基于GFP蛋白开放表达框(ORF)构建了一系列重组表达载体,用以转录在移码翻译顺序及同一翻译顺序下,AUG起始密码子处于不同序列背景,以及间隔不同距离的多顺反子结构m RNA.通过转染人Bel-7402细胞系,研究了这些多顺反子结构m RNA的翻译起始模式.结果表明,在移码翻译顺序下,多顺反子m RNA可翻译出对应的不同蛋白质,而在同一翻译顺序下,GFP蛋白表达框中的多个AUG密码子,仅有首位起始密码子可发挥作用,提示核糖体在从首位起始密码子开始翻译的同时,可能会有部分核糖体继续向下扫描并识别下游的起始密码子,而这种选择性的翻译起始效率,主要取决于密码子所处的序列背景及间隔距离等因素.
- 薛金锋刘雄昊李卓胡友金薛志刚谭杨高庭吴奔邬玲仟梁德生
- 关键词：翻译起始核糖体
- 以人皮肤成纤维细胞作为饲养层细胞培养人胚胎干细胞被引量：2
- 2009年
- 目的:比较人皮肤成纤维细胞(human dermal fibroblasts,HDFs)与小鼠胚胎成纤维细胞(Mouse embryonic fibroblasts,MEFs)的增殖能力及研究人皮肤成纤维细胞作为饲养层支持人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)未分化生长的能力。方法:利用组织贴壁法从人皮肤中分离出HDFs,通过细胞形态的观察和生长曲线的绘制比较HDFs与MEFs的体外增殖能力。将HDFs作为饲养层细胞与hESCs共培养,传代12代后,检测hESCs碱性磷酸酶(AKP)、表面特异性标志及胚胎干细胞特异性转录因子。结果:HDFs可连续传代培养15代以上,10代以下的HDFs增殖迅速,而MEFs自第4代起,增殖能力就明显下降;hESCs在HDFs饲养层上可传代培养12代以上,克隆边界清晰,细胞排列紧密,碱性磷酸酶、表面标志物检测均呈阳性,表达了hESCs特异性转录因子。结论:HDFs比MEFs具有更强的增殖能力;HDFs可作为培养hESCs的饲养层细胞。
- 杨俊林刘雄昊喻姣玲冯劢谭杨李卓吴奔高庭潘盛邬玲仟梁德生夏家辉
- 关键词：人胚胎干细胞人皮肤成纤维细胞饲养层细胞
- 血友病A的基因治疗被引量：1
- 2010年
- 血友病A是一种X-连锁隐性遗传病,在男性中的发病率约为(1～2)/10000。血友病A的临床症状主要是自发性关节、软组织或其他组织的出血、血肿,常可致残,甚至危及生命。其致病机制是由于编码凝血因子Ⅷ的基因先天性异常而导致的凝血因子Ⅷ缺乏或功能缺陷。血友病A是基因治疗的首选疾病之一。本文就血友病A基因治疗中所采用的载体和靶细胞作一综述。
- 刘慕君刘艳平刘雄昊
- 关键词：血友病A基因治疗
- 核糖体基因区定点修饰hiPSCs来源的MSCs的抗肿瘤研究
- 刘博谌飞吴涌王晓琳冯劢李卓周妙金王延迟邬玲仟刘雄昊梁德生
