卜丹
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
- 供职机构：郑州大学生物工程系更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划公益性行业科研专项公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 猪FcγRⅠ真核表达载体的构建及稳定表达细胞系的建立
- 2010年
- 本研究旨在建立稳定表达猪FcγRⅠ的Marc-145细胞系。从猪肺泡巨噬细胞中提取总RNA,应用RT-PCR技术获得猪FcγRⅠ和γ链cDNA,并分别构建PIREShyg3-γ和pcDNA3.1-FcγRⅠ真核表达质粒;用脂质体共转染Marc-145细胞,经潮霉素B(300μg.mL-1)和G418(400μg.mL-1)共筛选获得稳定表达猪FcγRⅠ的细胞系;运用RT-PCR、玫瑰花环和流式细胞术对细胞系进行鉴定。结果表明成功构建了猪FcγRⅠ和γ链真核表达载体,建立了稳定表达猪FcγRⅠ的细胞系,且表达于转染细胞表面的poFcγRⅠ受体分子能与猪IgG特异结合。本研究为进一步研究奠定了基础。
- 史平玲邬成业乔松林张改平王爱萍肖治军祁艳华卜丹
- 关键词：共转染MARC-145细胞
- DT40细胞sIgMλ轻链基因敲除载体的构建
- 2009年
- 从鸡B淋巴DT40细胞系中克隆-βactin启动子,替换pCDNA3.1(+)载体中的SV40启动子,构建-βactin启动子驱动的Neomycin抗性基因表达框。将克隆的sIgMλ轻链基因两侧各约2 kb的序列插入到抗性表达框的两侧作为同源臂。PCR、酶切以及测序结果表明成功构建了靶向sIgMλ轻链基因的置换型打靶载体pCDNA-act-neo-HR。为建立sIgMλ轻链基因敲除的DT40细胞模型,探究sIgMλ轻链在IBDV感染DT40细胞过程中的作用奠定了基础。
- 游雷鸣罗俊王爱萍张改平卜丹郭亚男祈艳华
- 关键词：基因敲除同源重组
- 猪乙脑病毒河南分离株CSF.ZMD-3的分离鉴定及分子进化分析被引量：6
- 2010年
- 采集河南省规模化猪场流产母猪死胎脑脊液作为样本,通过细胞盲传培养分离乙型脑炎病毒流行毒株,对新分离的病毒进行分子生物学鉴定,获得1株分离株并命名为CSF.ZMD-3。DNA序列测定及比对分析该分离株与已报道毒株基因的序列同源性,确定该分离毒株为乙脑病毒。使用MEGA3.1软件对CSF.ZMD-3毒株主要结构蛋白E蛋白的基因序列进行分子进化分析,确定CSF.ZMD-3为基因Ⅲ型乙脑病毒。
- 卜丹罗俊樊剑鸣王爱萍滕蔓游雷鸣陈陆张改平
- 关键词：乙型脑炎病毒M基因E基因
- H5N1亚型禽流感病毒核衣壳蛋白原核表达条件的优化被引量：1
- 2010年
- 为了提高禽流感核衣壳蛋白(NP)在大肠杆菌中的表达量,试验研究了载体、培养基、温度、转速、诱导时间以及诱导剂IPTG浓度等不同条件对NP融合蛋白表达量的影响。结果:使用LB培养基于37℃培养3.5h后,采用终浓度为2mmol/L的IPTG在28℃、200r/min诱导培养5h,pET32a-NP融合蛋白表达量最大;SDS-PAGE检测结果表明pET32a-NP融合蛋白的分子质量与预计大小一致,约为70ku;Western-blot结果表明,pET32a-NP融合蛋白能与抗His标签的单克隆抗体发生特异性反应,说明NP蛋白得到正确表达。
- 邬成业史平玲张改平郝慧芳王爱萍祁艳华卜丹
- 关键词：禽流感核衣壳蛋白原核表达
- 河南省乙型脑炎病毒的分离鉴定及E基因进化分析
- 流行性乙型脑炎（Japanese Encephalitis，JE）是由嗜神经的乙型脑炎病毒(Japanese Encephalitis Virus，JEV)引起的人畜共患的中枢神经系统性传染病。猪被认为是流行性乙脑病毒在...
- 卜丹
- 关键词：乙脑病毒进化分析
