孔君
- 作品数：13 被引量：31H指数：3
- 供职机构：中国检验检疫科学研究院更多>>
- 发文基金：质检公益性行业科研专项项目国家科技支撑计划中国检验检疫科学研究院基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 微悬臂生物传感器在病原微生物检测中的应用
- 2018年
- 微悬臂生物传感器具有快速、实时、灵敏度高和无需分子标记的优点,正成为当前传感器领域检测分子、细菌、病毒和蛋白质等的研究新热点。本文着重综述了微悬臂生物传感器的工作原理和工作模式及其在细菌、真菌和病毒检测上的应用,并对微悬臂生物传感器的发展前景提出展望。
- 雷荣孔君陈乃中
- 关键词：微悬臂生物传感器病原微生物
- 番茄细菌性叶斑病菌RPA检测技术被引量：15
- 2016年
- 番茄细菌性叶斑病菌(Pseudomonas syringae pv.tomato,Pst)是我国进境植物检疫性有害生物,可随种子进行远距离传播。快速简便的检测对于防止该病害的扩散传播具有重要意义。依据番茄细菌性叶斑病菌的hrpZPst基因序列,设计并筛选出特异性扩增引物,建立了番茄细菌性叶斑病菌的重组酶聚合酶等温扩增(RPA)检测方法。该方法可从10种不同的植物病原细菌中特异性地检测到3个参试番茄细菌性叶斑病菌株。对病菌DNA的检测灵敏度为75fg/μL,与PCR凝胶电泳相当。该方法扩增核酸时间短、效率高、对设备的要求低,适合于基层简易实验室的快速检测。本文为该病原菌的检测提供了新方法。
- 魏梅生田茜赵文军李桂芬孔君
- 关键词：RPA
- 种子健康检测的抽样、方法选择和结果解读
- 2014年
- 种子是传带各种病原最有效的载体之一,病种子是病害进入新区域的初侵染来源。种传病害的危害性,不仅仅限于染病种子本身所带来的减产,还在于病害可以随子代进一步传播,对植物群体造成危害。种子健康检测是控制种传病害的重要手段,本文关注种子健康检测中的抽样、方法选择和结果判断等问题,以期对种子的健康状况作出恰如其分的评估。
- 魏梅生李桂芬朱水芳马洁张永江孔君
- 关键词：种子种传病害植物检疫
- 马铃薯Ⅴ病毒抗体及TAS-ELISA试剂盒的研制
- 2016年
- 用纯化的马铃薯Ⅴ病毒(Potato virus Ⅴ)免疫家兔获得多克隆抗体;免疫BALB/c小鼠,用杂交瘤细胞技术获得2株分泌马铃薯Ⅴ病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株并制备腹水抗体。以多克隆抗体为包被抗体,单克隆抗体为检测抗体研制了TAS-ELISA检测试剂盒。
- 李桂芬马洁孔君张永江魏梅生
- 关键词：多克隆抗体单克隆抗体
- 两种抗原制备黄瓜花叶病毒多克隆抗体的比较研究被引量：3
- 2013年
- 以提纯的黄瓜花叶病毒M株系(CMV-M)病毒粒子以及体外原核表达的外壳蛋白(CMV-CP)为抗原免疫健康家兔,制备了CMV-M多克隆抗体。采用间接酶联免疫吸附试验检测其效价,并结合Western-blot比较了两种多克隆抗体的灵敏度。结果表明:制备的两种CMV-M多克隆抗血清效价均达到1:25600;检测病汁液的灵敏度方面,以病毒粒子为抗原的多克隆抗血清达到1:3200,明显优于以原核表达蛋白作为抗原的抗血清1:800,蛋白印迹着色前者在样品量倍比稀释后免疫条带清晰,后者条带模糊甚至消失。
- 杜智欣李桂芬马洁孔君鲁洁朱水芳
- 关键词：黄瓜花叶病毒多克隆抗体ELISAWESTERN-BLOT效价
- 烟草环斑病毒磁免疫层析试纸条的研制被引量：3
- 2014年
- 烟草环斑病毒是我国检疫性有害生物,为防止该病毒传入国内,需建立快速的诊断和检测方法。将烟草环斑病毒的多克隆抗体吸附到磁性纳米颗粒上,研制出磁免疫层析检测试纸条。该试纸条可特异性检测烟草环斑病毒,检测部分提纯病毒的灵敏度为1μg/mL,检测烟草病汁液可稀释1000倍(重量/体积)。该试纸条和线虫传多面体病毒属的番茄环斑病毒、番茄黑环病毒、南芥菜花叶病毒和葡萄扇叶病毒未出现交叉反应,可用于烟草环斑病毒的现场检测。
- 魏梅生李桂芬马洁鲁洁张永江孔君
- 关键词：烟草环斑病毒试纸条
- 一种番茄细菌性叶斑病菌的单克隆抗体及其应用
- 本发明公开了一种番茄细菌性叶斑病菌的单克隆抗体及其应用。本发明提供了产生番茄细菌性叶斑病菌的单克隆抗体杂交瘤细胞株Pst10号，其保藏号为CGMCC No.10119。还提供了由上述的杂交瘤细胞株10号分泌产生的单克隆抗...
- 魏梅生田茜李桂芬赵文军孔君马洁
- 文献传递
- 青岛浒苔完整叶绿体分离及其蛋白质提取方法的初步建立被引量：1
- 2013年
- 初步建立青岛海域漂浮浒苔完整叶绿体的分离纯化及其叶绿体蛋白质提取方法,为进一步研究浒苔叶绿体蛋白质组学奠定基础。本研究应用组织研磨结合Percoll密度梯度离心的方法分离出浒苔的完整叶绿体,随后以两种蛋白裂解液配方分别提取叶绿体总蛋白,并通过蛋白定量和两种聚丙烯酰胺凝胶电泳进行比较分析。结果表明:Percoll密度梯度离心的方法能够获得完整且较纯的浒苔细胞叶绿体;含有尿素以及CHAPS的蛋白裂解液抽提的叶绿体蛋白质数量比SDS裂解液更多;相较于普通Tris-SDS-PAGE,采用Tricine-SDS-PAGE电泳系统可以有效分离40kDa以下的小分子叶绿体蛋白质。
- 杜智欣邱艳红鲁洁段维军孔君朱水芳
- 关键词：浒苔叶绿体蛋白质密度梯度离心
- 一种番茄细菌性叶斑病菌的单克隆抗体及其应用
- 本发明公开了一种番茄细菌性叶斑病菌的单克隆抗体及其应用。本发明提供了产生番茄细菌性叶斑病菌的单克隆抗体杂交瘤细胞株Pst10号，其保藏号为CGMCC No.10119。还提供了由上述的杂交瘤细胞株10号分泌产生的单克隆抗...
- 魏梅生田茜李桂芬赵文军孔君马洁
- 文献传递
- 应用纳米磁珠实时荧光PCR检测非洲木薯花叶病毒被引量：8
- 2013年
- 建立非洲木薯花叶病毒(African cassava mosaic virus,ACMV)灵敏快速的纳米磁珠实时荧光PCR检测技术,防止其传入中国。采用TaqMan探针结合纳米磁珠(magnetic nanoparticles,MNPs)技术,以外壳蛋白基因为目标基因,通过特异性及灵敏度试验建立MNP荧光PCR检测方法。成功建立了非洲木薯花叶病毒(ACMV)的MNP荧光PCR检测方法;该方法检测阈值约为13pg DNA,比普通PCR及ELISA方法灵敏度高25倍;该方法具有良好的特异性,能够有效区分双生病毒属的ACMV、棉花曲叶病毒(CLCuV)、番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)及番茄严重曲叶病毒(ToSLCV)。MNP荧光PCR方法能够快速灵敏的检测茎叶样品中的ACMV,无需任何PCR后处理,交叉污染风险小,适于口岸检验检疫。
- 张永江马洁李桂芬鲁洁辛言言孔君李明福邓丛良朱水芳
- 关键词：实时荧光PCR
