安乃莉
- 作品数：15 被引量：76H指数：4
- 供职机构：中国预防医学科学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人血管内皮细胞生长因子在大肠杆菌中的表达及纯化
- 2000年
- 目的 为了获得大量重组人血管内皮细胞生长因子（ Ｈｕｍａｎ Ｖａｓｃｕｌａｒ ＥｎｄｏｔｈｅｌｉａｌＧｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒ， ｈＶＥＧＦ），以研究其在心血管和药学领域具有的潜在药用价值。方法 用ＰＣＲ方法扩增目的基因ｈＶＥＧＦ１６５，连接到 ｐＥＴ－３ａ载体上，并转化到大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中，建立可高效表达的ｐＥＴ－３ａ／ｈＥＶＧＦ１６５重组质粒，经ＩＰＴＧ诱导表达， Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测表达产物的抗原性，通过 Ｍｏｎｏ Ｑ阴离子层析和ＦＰＬＧ Ｓｕｐｅｒｏｓｅ１２分子筛柱层析，进行初步纯化，用 ＭＴＴ法检测其生物学活性。结果 ｐＥＴ－３ａ／ｈＥＶＧＦ表达产物经纯化后，其纯度可达到９０％以上，表达的ｒｈＥＶＧＦ１６５能 呈剂量依赖性地促进人静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）的增殖。结论组建了天然形式ｈＥＶＧＦ１６５的大肠杆菌菌株，并摸索 出一套纯化工艺，为大规模生产重组ｈＥＶＧＦ１６５奠定了基础。
- 周小明曾革非钭理强安乃莉姚立红陈爱君张智清
- 关键词：血管内皮细胞因子纯化大肠杆菌
- 甲状旁腺素相关蛋白cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：2
- 1999年
- 采用ＲＴＰＣＲ方法从中国人肾癌细胞株中克隆到甲状旁腺素相关蛋白（Ｐａｒａｔｈｙｒｏｉｄｈｏｒｍｎｏｅｒｅｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ，ＰＴＨｒＰ）ｃＤＮＡ，其核苷酸序列与国外发表资料相比，有６个核苷酸不同，其中仅９２位密码子的不同导致氨基酸变异，即由脯氨酸变为丝氨酸。将克隆的ＰＴＨｒＰｃＤＮＡ插到原核表达载体ｐＥＴ３ａ的Ｔ７噬菌体启动子下游，转化大肠杆菌后得到高效表达，并经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和生物学活性检测对表达产物作了鉴定。
- 刘红兵熊卫东安乃莉姚立红钭理强张智清
- 关键词：甲状旁腺素相关蛋白克隆
- 应用硫氧还蛋白促进外源蛋白在大肠杆菌的可溶性表达被引量：22
- 1999年
- 为了观察硫氧还蛋白（ＴｒｘＡ）促进外源蛋白在大肠杆菌中可溶性表达的作用，我们从质粒ｐＥＴ－３２ａ（＋）上克隆了ｔｒｘＡ基因，构建了ＴｒｘＡ表达质粒ｐＴ－ＴｒｘＡ。将该质粒与其它蛋白基因的表达质粒共同转化Ｅｃｏｌｉ并同时获得表达。结果表明，共表达ＴｒｘＡ可以明显促进外源蛋白，如甲状旁腺激素相关蛋白（ＰＴＨｒＰ）、ＰＴＨｒＰ受体（ＰＴＨｒＰ－Ｒ）和血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）的可溶性表达。说明共表达ＴｒｘＡ有助于外源蛋白的正确折叠，防止包涵体的形成。
- 安乃莉张智清王嵩刘红兵曾革非姚立红陈爱君
- 关键词：硫氧还蛋白共表达外源蛋白大肠杆菌
- TNF受体(P55)和IgGFc的融合蛋白在哺乳动物细胞中的表达被引量：1
- 2001年
- 目的 在真核细胞表达具有生物活性的可溶性肿瘤坏死因子 (TNF)受体蛋白 ,用于中和TNF的毒性。方法 将TNFR(P5 5 )的胞外区基因和人IgGFc段基因通过 18个碱基的凝血酶切点连接 ,克隆入真核表达载体pcDNA3 1(+ ) ,在COS7和BHK细胞分别得到目的蛋白的表达。结果 在真核表达系统表达了TNFR(P5 5 )胞外区与人IgGFc段的融合蛋白 ,免疫学实验及L92 9细胞体外实验均表明该蛋白具有TNFR(P5 5 )特异的抗原性、与TNF结合的活性以及抑制TNF的活性。结论 真核表达的融合蛋白产物具有可溶性TNF受体 (P5 5 )的生物学活性。
- 安乃莉徐春晓姚立红陈爱君曾革非张立国张智清
- 关键词：肿瘤坏死因子真核表达系统
- 流感病毒相变的发现及其意义被引量：17
- 1996年
- 近来,我们在流感监测中,发现了甲型流感病毒发生了相变异。据我们所知,H3N2亚型毒株发生相变为首次发现。"O"相毒株的出现,宣告了鸡胚已不是流感病毒最敏感的宿主,鸡红细胞已不是流感病毒红细胞测定中最理想的细胞。同时指出了,虽然狗肾传代细胞(MDCK Cells)对当前人群中所流行的流感病毒敏感性较高,但它是传代细胞有致癌性,由它分离出的病毒不能用于疫苗生产。故寻找一种对流感病毒敏感又不具有致癌性的细胞已刻不容缓。
- 郭元吉赵惠芬王敏刘玉华$北京友谊医院董捷龚明敏安乃莉李琼郭俊峰莫永凯
- 关键词：流感病毒相变红细胞
- 流感疫苗的研究进展
- 1998年
- 流感病毒引发急性呼吸道传染病，不仅可以影响人们的正常生活，还容易引发严重的并发症。对于老人和婴幼儿，流感是引起死亡率上升的重要原因。１９９７－１９９８年间香港人群中鸡流感病毒造成的发病及死亡引起全球的恐慌。为了控制流感的发生，特别是暴发流行，研究有效...
- 安乃莉
- 关键词：流感疫苗灭活疫苗减毒活疫苗
- 中药咳宁冲剂抗流感病毒作用的研究被引量：15
- 1997年
- 观察了中药咳宁冲剂体内外抗流感病毒作用。体内实验表明咳宁冲剂高（３ｇ／ｋｇ）、低（１．５ｇ／ｋｇ）剂量均能减低滴鼻感染２０ＬＤ５０流感甲型病毒引起的小鼠死亡率、病毒性肺炎小鼠的肺指数和肺组织病毒血凝滴度。与对照组比较，大剂量组差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。体外实验表明０．２５％咳宁（无细胞毒浓度）对细胞病变（ＣＰＦ）、血凝滴度（ＨＡ）和红细胞吸附滴度（ＨＤ）无明显影响。
- 谢鸣郭元吉安乃莉
- 关键词：中药品咳宁冲剂药理学流感病毒
- 流行性感冒病毒核酸疫苗研究进展被引量：1
- 1999年
- 安乃莉张智清
- 关键词：流行性感冒病毒核酸疫苗
- 中草药福青在狗肾传代细胞中抗流感病毒的活性被引量：8
- 1996年
- 用单味草药福青先处理细胞后攻击病毒,或病毒先感染细胞后加福青或福青与病毒同时加入细胞。均能降低流感病毒感染滴度10～10 000倍。但福青必须在细胞培养液中存在,才具有抗流感病毒的活性,同时福青不能直接抑制流感病毒凝集红细胞的能力和神经氨酸酶活性。
- 王敏安乃莉李琼郭俊峰郭元吉
- 关键词：流感病毒中草药
- TNF受体(P55)胞外区基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：2
- 2001年
- TNF与多种疾病密切相关。为了获得大量具有生物学活性的可溶性TNF受体用以拮抗TNF的毒性作用 ,在原核表达系统中表达了TNFR(P5 5 )的胞外区与TrxA的融合蛋白。将TNFR(P5 5 )胞外区去信号肽的前三个结构域基因克隆入融合蛋白表达载体 pET 32a ,在大肠杆菌BL2 1(DE3)中高效表达了TrxA TNFR融合蛋白。表达产物以包涵体形式存在 ,经过变性和复性 ,并经镍金属鳌和柱亲和层析纯化 ,得到了纯度较高的可溶性受体蛋白的初纯品。免疫学实验及L92 9细胞体外实验均表明 :该蛋白具有TNFR(P5 5 )特异的抗原性、与TNF结合的活性以及良好的抑制TNF的生物学活性。
- 安乃莉徐春晓姚立红陈爱君曾革非张立国张智清
- 关键词：基因克隆融合蛋白大肠杆菌
