张丽芳
- 作品数：5 被引量：6H指数：2
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- 1.白黎芦醇对大鼠早期卵泡发育及卵母细胞凋亡的影响 2.阴道毛滴虫RRas基因的cDNA克隆和原核表达
- 第一部分:白藜芦醇对大鼠早期卵泡发育及卵母细胞凋亡的影响 研究目的:研究白藜芦醇对大鼠早期卵泡发育及卵母细胞凋亡的影响。 材料与方法:成年Sprague-Dawley(SD)大鼠合笼,新生鼠随机分三组:对照组、母鼠灌...
- 张丽芳
- 关键词：白藜芦醇卵泡发育阴道毛滴虫CDNA克隆
- 文献传递
- 1.白藜芦醇对大鼠早期卵泡发育及卵母细胞凋亡的影响 2.阴道毛滴虫RRas基因的cDNA克隆和原核表达
- 研究目的研究白藜芦醇对大鼠早期卵泡发育及卵母细胞凋亡的影响。 材料与方法成年Sprague-Dawley（SD）大鼠合笼，新生鼠随机分三组：对照组、母鼠灌胃组、腹腔注射组。对照组为正常出生1d、2d和4d...
- 张丽芳
- 关键词：白藜芦醇卵泡发育TUNEL阴道毛滴虫克隆原核表达
- 文献传递
- 大鼠卵巢组织中早期卵泡发育及卵母细胞凋亡与白藜芦醇的影响被引量：4
- 2007年
- 目的:观察白藜芦醇对大鼠卵巢组织中早期卵泡发育及凋亡的影响。方法:实验于2006-07/12在汕头大学医学院细胞衰老实验室完成。成年SD大鼠合笼,所生的新生雌鼠分为3组:①对照组:正常出生者,不干预。②腹腔注射组:正常出生后12h内开始腹腔注射白藜芦醇25mg/(kg·d),1次/d。③母鼠灌胃组:正常怀孕的母鼠在孕12d(以发现阴道栓为怀孕0.5d)开始进行白藜芦醇25mg/(kg·d)灌胃,1次/d,直至分娩后生下的雌鼠。各组大鼠分别在出生2,4d处死取卵巢,应用苏木精-伊红染色观察大鼠早期卵泡发育情况(计算卵母细胞巢中卵母细胞及原始卵泡和发育卵泡的比率),应用TUNEL染色观察卵母细胞凋亡的情况。结果:①腹腔注射组和母鼠灌胃组大鼠卵母细胞巢内卵母细胞比例高于对照组[2d龄:(39.78±9.22)%,(53.20±5.08)%,(15.76±6.68)%;4d龄:(9.39±1.82)%,(5.39±2.12)%,(2.62±1.18)%;P均<0.05];2d龄母鼠灌胃组和腹腔注射组大鼠原始卵泡和发育卵泡比例低于对照组[原始卵泡:(57.64±7.23)%,(46.40±5.20)%,(74.57±9.36)%;发育卵泡:(2.58±2.41)%,(4.51±4.60)%,(9.67±4.70)%;P均<0.05]。②生后第2天是大鼠卵母细胞凋亡的高峰期,母鼠灌胃组和腹腔注射组卵泡凋亡率高于对照组,但差异不显著[(9.88±3.30)%,(12.95±3.34)%,(8.50±4.13)%,P>0.05]。结论:白藜芦醇可以延缓大鼠卵巢组织中卵母细胞巢破裂,抑制原始卵泡的发育启动;但是对于卵母细胞的凋亡没有明显影响。
- 张丽芳罗丽莉傅玉才张仁利钱元恕许锦阶
- 关键词：白藜芦醇卵泡发育凋亡TUNEL
- 阴道毛滴虫RRas基因的cDNA克隆和原核表达被引量：2
- 2006年
- 目的克隆和表达阴道毛滴虫RRas(TvRRas)基因,以便进一步探讨其组织定位及功能。方法应用PCR方法从构建的阴道毛滴虫cDNA表达文库中扩增TvRRas基因片段,克隆至pGEM-T载体,经PCR、酶切和测序鉴定后亚克隆至原核表达载体pET-41a,转化大肠埃希菌(E.coli)BL21,经异丙基硫代--βD-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,镍-硝基三乙酸(Ni-NTA)柱纯化表达产物后用SDS-聚丙稀酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行分析鉴定。结果从阴道毛滴虫cDNA表达文库中扩增的TvRRas基因片段长522bp,酶切及DNA测序证实pET-41a/TvRRas重组质粒构建正确,表达融合蛋白分子量约为45000u。结论成功构建重组原核表达质粒pET-41a/TvRRas,并能在大肠埃希菌内表达,所表达的融合蛋白分子量大小与预期一致。
- 张丽芳傅玉才许铭炎许锦阶
- 关键词：阴道毛滴虫克隆原核表达
- 阴道毛滴虫肌动蛋白cDNA克隆与表达
- 2006年
- 目的克隆阴道毛滴虫肌动蛋白基因片段,表达及纯化肌动蛋白重组蛋白,免疫豚鼠获得抗血清,为进一步研究肌动蛋白在阴道毛滴虫体内定位及其在细胞衰老过程中的作用奠定基础。方法应用PCR方法获得阴道毛滴虫肌动蛋白基因部分片段,并克隆入表达载体pET-41a,转化大肠埃希菌(E.coli)BL21,IPTG诱导重组质粒表达,亲和层析纯化表达产物,Brandford法测定重组蛋白含量并免疫豚鼠,用SDS-PAGE和Western-blot进行分析鉴定。结果肌动蛋白基因的PCR产物片段大小500bp;构建了阴道毛滴虫肌动蛋白基因重组表达质粒;表达了肌动蛋白重组蛋白;SDS-PAGE显示分离纯化的肌动蛋白重组蛋白为47000u;Western-blot结果表明所获得抗血清可与肌动蛋白重组蛋白在47000u及阴道毛滴虫总蛋白在41000u处特异性反应。结论重组肌动蛋白获得高效表达,其免疫豚鼠获得的抗血清可与阴道毛滴虫肌动蛋白重组蛋白反应,也可识别阴道毛滴虫虫体肌动蛋白,该抗血清可用于进一步的研究。
- 刘居理傅玉才许铭炎张丽芳许锦阶
- 关键词：阴道毛滴虫肌动蛋白重组蛋白表达抗血清
