张大伟
- 作品数：5 被引量：30H指数：4
- 供职机构：中山大学孙逸仙纪念医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小干扰RNA沉默MDRl基因对SMMC-7721肝癌细胞株多药耐药性的影响被引量：12
- 2011年
- 目的将表达特异性的小干扰RNA（siRNA）导入肝癌耐药细胞，干扰多药耐药（MDRl）基因后，观察其对肝癌耐药细胞化疗敏感性的影响。方法使用浓度梯度法制作sMMC-7721耐阿霉素细胞株（SMMC-7721／ADM），阿霉素浓度从0．1～2．0ms／L；转染siRNA（浓度25、50、75nmo/L）沉默此耐药株MDRl基因；转染后24、48、72h用定量逆转录．聚合酶链反应（qRT．PCR）检测各组细胞MDRl的mRNA表达水平；siRNA（浓度50nmoVL）转染后48h，行噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞对化疗药物的敏感性，计算各药物的半数抑制浓度（IC50）和耐药系数（RI）；流式细胞仪（FCM）检测细胞对阿霉素（浓度0．2mg／L）的凋亡。Westernblot检测蛋白表达含量。结果SMMC-7721／ADM对阿霉素、5．氟尿嘧啶（5．Fu）、长春新碱、奥沙利铂的RI为25．43、68．32、39．17、18．31。siRNA转染沉默MDRl基因后，发现其对上述药物的RI为5．01、17．04、4．96、1．62；qRT．PCR发现其MDRlmRNA表达量显著降低（P〈0．05）；Westernblot显示其MDRl表达产物P—gp蛋白显著降低（P〈0．05）；FCM发现加入阿霉素后，其细胞凋亡指数显著大于沉默前（P〈0．05）。结论用siRNA沉默SMMC-7721／ADM的MDRl基因后，SMMC-7721／ADM对化疗药的敏感性显著增加。MDRl基因与SMMC-7721肝癌细胞的多药耐药性显著相关，可通过沉默其MDRl基因来提高耐药肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。
- 汪洋褚忠华刘建平张大伟韦金星陕基德
- 关键词：多药耐药SIRNA
- 不同处理方法对腹部术后腹胀的疗效观察被引量：5
- 2011年
- 目的比较不同处理方法对腹部外科术后腹胀的疗效。方法选取腹部术后腹胀或术后3～4天不能排气的患者,采取随机分为三组。①行气通便贴组84例,采用行气通便贴外敷脐部。②灌肠组68例,采用14#一次性肛管,0.9%生理盐水500ml插管入肛门15～20cm。③对照组60例,采用常规护理方法。观察三组患者的疗效。结果三种处理方法对患者在肠鸣音恢复时间、肛门排气时间、排便时间有显著性差异。对解除腹部术后腹胀程度效果不一,行气通便贴组的效果接近灌肠组,两组均优于对照组。结论行气通便贴用于预防及治疗腹部术后腹胀,具有促进胃肠功能恢复,使用方便、安全和缩短患者住院时间等优点,值得推荐在临床使用。
- 陈冬梅李结媛张大伟叶义标
- 关键词：行气通便贴腹部术后腹胀护理
- 小干扰RNA沉默多药耐药相关蛋白基因2对人肝癌细胞HepG2多药耐药的逆转作用被引量：8
- 2012年
- 目的检测小干扰RNA（siRNA）对肝癌耐药细胞株HepG2／阿霉素（ADM）多药耐药相关蛋白基因2（MRP2）及其蛋白产物的抑制作用，观察对多药耐药性的影响。方法使用浓度梯度法制作HepG2耐ADM细胞株（HepG2／ADM），ADM浓度从0．1～2．0mg／L；设计合成针对MRP2的siRNA小片段，转染HepG2／ADM耐药细胞，24h后通过实时荧光定量逆转录一聚合酶链反应（RT—qPCR）和Westernblot检测siRNA对MRP2基因mRNA和蛋白的抑制效果；噻唑蓝（MTT）比色法观察抑制MRP2基因表达后，HepG2／ADM细胞对化疗药物的敏感性变化，并计算各药物的半数抑制浓度（IC50）。结果HepG2／ADM对ADM、5-氟尿嘧啶（5-Fu）、长春新碱和奥沙利铂的IC50值分别为0．3204、3．8002、0．2014和0．1221；siRNA明显抑制了HepG2／ADM细胞MRP2基因mRNA和蛋白的表达（P〈0．05）；转染MRP2-siRNA后，HepG2／ADM细胞对ADM、5-Fu、长春新碱和奥沙利铂的IC50值明显减小，分别为0．1023、1．4417、0．0452和0．0268。结论用siRNA沉默MRP2基因能够逆转HepG2／ADM细胞对化疗药物的耐药性，MRP2基因与HepG2／ADM肝癌细胞的多药耐药性相关，可通过沉默MRP2基因提高耐药细胞对化疗药物的敏感性。
- 褚忠华张大伟刘建平韦金星苏正陕基德
- 关键词：多药耐药性
- Hedgehog信号通路在人肝癌细胞株中的表达及意义被引量：1
- 2011年
- 目的探讨Hedgehog信号通路在人肝细胞癌细胞系中的表达及意义。方法采用半定量RT-PCR法检测PLC/PRF/5、HepG2及SMMC-7721肝癌细胞株中Shh、Ptch1、Smo、Gli1、Gli2mRNA的表达;Western blot法检测PLC/PRF/5、HepG2及SMMC-7721肝癌细胞株中Gli2蛋白的表达。结果除Shh外,Ptch1、Smo、Gli1、Gli2mRNA在PLC/PRF/5、HepG2及SMMC-7721细胞中均有不同程度表达。其中,Ptch1、Smo、Gli1、Gli2mRNA在PLC/PRF/5及SMMC-7721细胞中的表达强度显著高于成人正常肝细胞,而Gli1mRNA在HepG2细胞中的表达量与正常肝细胞无明显差异;Gli2蛋白在成人正常肝细胞中几乎没有表达,在HepG2细胞中的表达也与正常肝细胞无明显差别,而在PLC/PRF/5及SMMC-7721细胞中,尤其是SMMC-7721细胞,Gli2的表达量异常增高。结论 Hedgehog信号通路的异常激活参与了肝细胞癌的发生发展过程,Gli2可能成为肝细胞癌重要生物学标志和生物治疗靶点。
- 刘建平张大伟陈涛叶义标陈捷韦金星陕基德
- 关键词：肝癌HEDGEHOG信号通路肝癌细胞株GLI2
- 肝细胞癌根治性切除术后FOLFOX4辅助化疗的效果研究被引量：6
- 2011年
- 目的研究肝细胞癌实施根治性切除术后应用辅助化疗能否降低复发率或改善总体生存率。方法回顾性分析本院2003年1月至2008年8月间115例肝癌(直径>5cm)病例。27例患者行肝癌根治性切除术后应用FOLFOX4化疗(实验组);88例患者仅行肝癌根治性切除术(对照组)。应用Kaplan-Meier方法分析生存曲线,Cox回归模型评估影响总体生存率的预后因素。结果 2组的临床病理资料无明显差异。实验组的27例患者接受中位数为6周期(4-12周期)的FOLFOX4辅助化疗:奥沙利铂(85mg/m2),亚叶酸钙(400mg/m2),5-氟尿嘧啶(2000mg/m2)。肿瘤复发时间(TTR)中位数:对照组11.9月,实验组14.9月(P=0.026)。1、2、3和5年总体生存率:对照组86%、60%、24%,9%;实验组为100%、78%、51%、17%(P=0.004)。结论对于直径大于5厘米的肝细胞癌患者,根治性切除术后予FOLFOX4辅助化疗能推迟肿瘤复发并改善总体生存率。
- 陈捷陈涛刘建平罗兴喜叶义标张大伟廖聪区庆嘉
- 关键词：肝细胞癌根治性切除术辅助化疗FOLFOX4
