张庆丽
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 供职机构：南华大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- EGFRvⅢ特异性单链抗体的制备及其靶向性能被引量：2
- 2011年
- 目的:应用噬菌体展示技术筛选出能与EGFRvⅢ特异性结合的单链抗体(single-chain Fv,scFv),并研究其靶向性能。方法:构建EGFRvⅢ特异性scFv噬菌体库,ELISA筛选阳性克隆,阳性EGFRvⅢ-scFv质粒重新克隆入pCANTAB-Throm-bin-His载体,转化E.coli HB2151,IPTG诱导可溶性EGFRvⅢ-scFv表达。间接免疫荧光及裸鼠活体成像技术鉴定EGFRvⅢ-scFv与EGFRvⅢ的特异性结合。结果:成功构建了EGFRvⅢ-scFv噬菌体库,ELISA筛选得到16个EGFRvⅢ-scFv克隆,取一克隆命名为EGFRvⅢ-scFv-2A1。EGFRvⅢ-scFv-2A1质粒重新克隆入pCANTAB-Thrombin-His载体,成功表达可溶性EGFRvⅢ-scFv-2A1。EGFRvⅢ-scFv-2A1在体外可特异性结合HuH7-EGFRvⅢ肝癌细胞,但不结合HuH7-EGFR和HuH7肝癌细胞;荧光标记的EGFRvⅢ-scFv-2A1裸鼠体内可特异性结合U87MG-EGFRvⅢ胶质瘤细胞移植瘤,而不结合U87MG细胞移植瘤。结论:成功制备的EGFRvⅢ-scFv-2A1可特异性靶向结合EGFRvⅢ,在肿瘤的诊断和靶向治疗中具有潜在应用价值。
- 张庆丽石必枝蒋华周敏王海孔娟谢海龙
- 关键词：SCFV脑胶质瘤移植瘤靶向治疗活体成像
- 抗EGFRvⅢ特异性单链抗体的构建及其靶向性研究
- 目的:应用噬菌体展示技术筛选出能与 EGFRvⅢ特异性结合的单链抗体(single-chain Fv,scFv),并研究其生物学活性。 方法:利用抗原 PEP3-KLH免疫 BALB/c小鼠,扩增 VH、VL片段后拼接...
- 张庆丽
- 关键词：单链抗体靶向治疗活体成像
- siRNA抑制cortactin基因表达对Hep-2细胞增殖和侵袭的影响被引量：4
- 2010年
- 背景与目的:皮层肌动蛋白(cortactin)是一种微丝肌动蛋白结合蛋白,其主要参与细胞骨架系统的调控,细胞外信号转导以及细胞黏附等过程,研究表明cortactin与肿瘤的侵袭和转移有关。因此,本研究旨在探讨siRNA(small interfering RNA)抑制cortactin基因表达对喉癌Hep-2细胞增殖和侵袭的影响。方法:构建含有cortactin基因的siRNA表达载体,转染Hep-2细胞,同时以转染空载体和空白细胞组作为对照(3组细胞分别命名为pSilencer3.1-cortactin-siRNA/Hep-2、pSilencer3.1/Hep-2和Hep-2),G418筛选稳定转染的细胞;Western blot检测siRNA对cortactin蛋白表达的影响;MTT和平皿克隆形成实验检测细胞增殖能力;Transwell法检测细胞迁移侵袭能力。结果:成功构建获得cortactin缺陷型稳定转染细胞系pSilencer3.1-cortactin-siRNA/Hep-2;与Hep-2细胞比较,pSilencer3.1-cortactin-siRNA/Hep-2组细胞中cortactin含量为11.22%(P<0.01),增殖被抑制,克隆形成率降低为21.47%(P<0.01),迁移、侵袭能力显著降低(P<0.01)。结论:cortactin表达下调能抑制喉癌Hep-2细胞的增殖和侵袭。
- 谭桂煌曾龙武侯素平张庆丽谢海龙
- 关键词：HEP-2细胞SIRNACORTACTIN增殖
