张晓文
- 作品数：30 被引量：47H指数：4
- 供职机构：山东出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家质检公益性行业科研专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程自动化与计算机技术更多>>
- 水样中甲型肝炎病毒和诺如病毒检测质控试剂盒和检测方法
- 本发明公开了一种水样中甲型肝炎病毒和诺如病毒检测质控试剂盒和检测方法，试剂盒包括：HAV？2×RT-PCR？mix、NV？GⅠ+GⅡ分型2×RT-PCR？mix、MS2？2×RT-PCR？mix、无RNase水、HAV阳...
- 房保海岳志芹孙涛张晓文孙明君梁成珠
- 文献传递
- 西尼罗病毒病诊断技术研究进展被引量：6
- 2014年
- 西尼罗病毒病(WND)是由西尼罗病毒(WNV)感染引起的一种人兽共患的急性传染病,应用各种诊断技术对该病进行准确、及时的诊断是预防和控制该病的前提。论文就近年来WND诊断技术研究进展情况进行综述,包括病原学诊断、血清学诊断和分子生物学诊断。在病原学诊断方面,主要包括病毒分离鉴定、抗原捕获ELISA及基于膜的电化学生物传感器技术等。在血清学诊断方面,主要包括ELISA方法、补体依赖性细胞毒性反应、基于微球的免疫测定方法及表面增强拉曼散射等。在分子生物学诊断方面,主要包括RT-PCR和RT-nPCR、real-time RT-PCR、实时快速反转录环介导恒温扩增及依赖核酸序列的扩增技术等,并对各种方法的前景和优缺点进行了阐述,为实际应用及新方法的建立提供参考。
- 郑小龙朱来华王群孙涛孙明君邓明俊张晓文
- 关键词：西尼罗病毒病病原学血清学分子生物学
- 隐孢子虫检测技术研究进展被引量：7
- 2013年
- 隐孢子虫是一种危害严重的人兽共感染寄生虫原虫,可致人和动物严重腹泻。由于其种类繁多,传播速度快,对公共卫生安全造成严重威胁。传统的隐孢子虫检测方法主要包括粪便样本的显微镜检查、水样的EPA1623检查,随着免疫学和现代分子生物学的不断发展,很多先进的检测技术如酶联免疫检测技术,免疫荧光技术,PCR,反转录PCR,实时荧光定量PCR,环介导等温扩增技术等不断涌现和应用于临床实践。论文就近年来隐孢子虫的危害及其检测技术最新进展情况进行综述。
- 邓明俊肖西志孙敏吴振兴孙涛张晓文徐彪
- 关键词：隐孢子虫病原学检测免疫学检测分子生物学检测
- RNA病毒检测质控物质—大肠杆菌噬菌体MS2标准样品的研制和应用被引量：2
- 2016年
- 目的研制大肠杆菌噬菌体MS2标准样品,以其作为RNA病毒检测质控物质,建立RNA病毒检测全过程的质量控制体系。方法利用液体培养法制备大肠杆菌噬菌体MS2标准样品;采用双层琼脂法对标准样品进行稳定性、均匀性测定并定值;将标准样品添加于贝类样品中,应用于贝类诺如病毒实时荧光检测全过程质量控制。结果该标准样品稳定性与均匀性良好,定值为(1.57±0.0288)×10^(11) pfu/m L;保质期为12个月;在4种不同贝类样品中,病毒提取效率在3.70%~7.84%之间,符合国际标准ISO 15216:2-2013的病毒提取效率大于1%的要求。结论该研究制备的大肠杆菌噬菌体MS2标准样品可以对RNA病毒检测全过程进行良好的质量控制,具有良好的应用前景。
- 房保海岳志芹梁成珠张倩赵玉然张晓文张瑾王宫璞
- 关键词：RNA病毒过程控制
- 鉴定或辅助鉴定牡蛎疱疹病毒的引物组合物
- 本发明公开了鉴定或辅助鉴定牡蛎疱疹病毒的引物组合物。本发明的牡蛎疱疹病毒1型(OsHV?1)的引物组合物检测牡蛎疱疹病毒1型(OsHV?1)的特异性好，采用4条引物共识别目的片段6个特异性的区域。用本发明的引物组合物检测...
- 尹伟力岳志芹张晓文房保海王崇明
- 东方马脑脊髓炎病毒PCR-DHPLC检测方法的建立与初步应用
- 2016年
- 为建立检测东方马脑脊髓炎病毒(EEEV)的方法,本研究利用PCR结合变性高效液相色谱技术(DHPLC),针对EEEV NS1基因,设计特异性引物,通过优化反应条件,对核酸扩增产物采用DHPLC进行检测分析,核酸扩增产物形成DHPLC特征峰图,建立了EEEV的PCR-DHPLC快速检测方法。结果显示该方法与其他6种常见马病病毒均无交叉反应,未检测到其他马病病毒的阳性吸收峰,具有较强的特异性;对梯度稀释的标准阳性模板的检测限可达到10拷贝/μL;利用本研究建立的方法与荧光定量RT-PCR对30份临床样品进行检测,两者符合率达100%。本研究建立的PCR-DHPLC法具有特异、敏感、快速、重复性好等优点,可以用于EEE的病原学诊断及流行病学调查。
- 郑小龙王群孙涛孙明君张晓文朱来华梁成珠
- 关键词：变性高效液相色谱RT-PCR荧光定量PCR
- 病毒性出血性败血症病毒N基因的病毒样颗粒制备及定值被引量：2
- 2018年
- 为制备含有病毒性出血性败血症病毒(VHSV)N基因的RNA病毒样颗粒标准样品,通过RT-RCR扩增VHSV的N基因,将其克隆至含有组氨酸标签的pNH-MS_2his载体中,构建重组原核表达载体pNHMS_2his-N;将重组质粒pNH-MS_2his-N转化至表达菌株BL21(DE3),用1 mmol/L IPTG诱导表达、纯化;对病毒样颗粒进行鉴定及稳定性试验,使用数字PCR对病毒样颗粒进行定值。结果显示,该病毒样颗粒含VHSV N基因序列,并且稳定性良好,定值结果为8×10~6 copies/m L。结果表明,构建的病毒样颗粒可以作为RNA病毒检测时的标准品和质控品使用。
- 王群姜帆岳志芹孙涛郑小龙张晓文房保海
- 关键词：病毒样颗粒N基因
- 一种东方马脑脊髓炎病毒PCR-DHPLC检测引物及其检测方法
- 本发明公开了一种东方马脑脊髓炎病毒PCR-DHPLC检测引物和方法，包括下列步骤：（1）样品中病毒RNA的提取及特异性片段的扩增；（2）PCR-DHPLC分析。本发明建立的EEEV的PCR-DHPLC方法在检测其他马病病...
- 郑小龙王群张晓文朱来华孙明君梁成珠
- 文献传递
- 含马动脉炎病毒N基因的病毒样颗粒的制备被引量：1
- 2014年
- 为了构建易于纯化且耐RNase酶的含有马动脉炎病毒N基因的病毒样颗粒,通过RT-RCR扩增马病毒性动脉炎病毒的N基因,将其克隆至含有组氨酸标签的pNH-MS2his载体中,构建重组原核表达载体pNH-MS2his-N。将重组质粒pNH-MS2his-N转化表达菌株大肠杆菌BL21(DE3),1 mmol/L IPTG诱导表达、纯化。对病毒样颗粒进行鉴定及稳定性实验。结果表明该病毒样颗粒含马病毒性动脉炎病毒N基因,并且稳定性良好,构建的病毒样颗粒可以作为RNA病毒检测时的标准品和质控品使用。
- 王宇张晓文王群梁成珠汪东风
- 关键词：马动脉炎病毒病毒样颗粒
- 基于焦磷酸测序的传染性造血器官坏死病毒检测试剂盒
- 本发明公开了基于焦磷酸测序的传染性造血器官坏死病毒检测试剂盒。本发明所提供的基于焦磷酸测序的传染性造血器官坏死病毒检测试剂盒，依赖于传染性造血器官坏死病毒指纹序列，所述传染性造血器官坏死病毒指纹序列为序列表中SEQ？ID...
- 尹伟力姜华张晓文鲁闽刘宁岳志芹
- 文献传递
