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磺胺氯吡嗪钠中药复方对小鼠体内抗弓形虫疗效的观察被引量：7: 2013年; 为探索治疗动物弓形虫病的有效药物组方,本研究以磺胺嘧啶钠作为对照首先通过药物体外试验观察磺胺氯吡嗪钠、甘草和黄芩抑制弓形虫增殖的效果,然后分别用磺胺氯吡嗪钠、甘草和黄芩以及3种药物的复方制剂,对人工感染弓形虫RH株的KM小鼠进行体内治疗试验。体外试验表明磺胺氯吡嗪钠、磺胺嘧啶钠、黄芩和甘草对弓形虫速殖子均有一定的抑制效果,磺胺氯吡嗪钠抑制效果最好。小鼠体内试验表明单独使用磺胺嘧啶钠、甘草和黄芩均可不同程度地延长小鼠存活时间,但均不能避免小鼠死亡,而单独使用磺胺氯吡嗪钠可使小鼠的存活率达到40%,在同等剂量下,磺胺氯吡嗪钠与黄芩和甘草配伍后,疗效得到明显提高,可显著延长小鼠存活时间,并使小鼠存活率高达50%。本研究的结果提示磺胺氯吡嗪钠具有显著体内抗弓形虫的作用,与甘草和黄芩配伍后的中西药复方制剂,能在保持疗效的基础上显著减少磺胺氯吡嗪钠的用量,因此磺胺氯吡嗪钠、甘草和黄芩复方制剂是未来治疗动物弓形虫病的优良方案之一。; 蒋蔚陈永军张花景刘迎春荆振宇薛俊欣王权; 关键词：弓形虫病磺胺氯吡嗪钠黄芩小鼠

呋喃妥因代谢物AHD单抗的制备及鉴定被引量：1: 2014年; 将呋喃妥因代谢物1-氨基-乙内酰胺脲(AHD)的衍生物1-氨基乙内酰脲-4-羧苯基肟(CPAHD)分别与牛血清蛋白(BSA)和Jeffamine修饰的卵清蛋白(OVA)偶联,经紫外光谱扫描鉴定,成功合成了免疫抗原CPAHD-BSA和包被抗原CPAHD-Jeffamine-OVA。应用杂交瘤技术将免疫鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,获得了稳定分泌抗4-NPAHD单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为B10E7。使用本细胞株制备的McAb对4-NPAHD的半数抑制质量浓度(IC50)为3.65 ng/mL,与同类抗生素及其代谢物未发现交叉反应,显示高度的灵敏性和特异性。本抗体的研制为建立间接竞争酶联免疫方法奠定了基础。; 石金磊陈永军刘迎春蒋蔚张花景李欣彤乔元彪王权; 关键词：单克隆抗体

弓形虫SAG1单抗的研制及其初步应用: 为开展弓形虫免疫诊断及抗弓形虫感染的相关研究,本实验利用可溶性表达的弓形虫表面抗原SAG1截断型重组蛋白(trSAG1)研制单克隆抗体,筛选出能够稳定分泌高滴度抗体的杂交瘤细胞株,所分泌的单抗不仅适用于在虫体定位该蛋白,...; 蒋蔚刘迎春陈永军安立刚张花景王权; 关键词：单克隆抗体免疫荧光检测免疫保护

呋喃妥因代谢物AHD单抗的制备及鉴定: 本研究将呋喃妥因代谢物1-氨基-乙内酰胺脲(AHD)的衍生物1-氨基乙内酰脲-4-羧苯基肟(CPAHD)分别与牛血清蛋白(BSA)和Jeffamine修饰的卵清蛋白(OVA)偶联,经紫外光谱扫描鉴定,成功合成了免疫抗原C...; 王权石金磊陈永军刘迎春蒋蔚张花景李欣彤乔元彪

弓形虫SAG1单抗的研制及其初步应用被引量：3: 2013年; 为开展弓形虫免疫诊断及抗弓形虫感染的相关研究,利用可溶性表达的弓形虫表面抗原SAG1截短型重组蛋白(trSAG1)研制单克隆抗体,筛选出能够稳定分泌高滴度抗体的杂交瘤细胞株,所分泌的单抗不仅适用于在虫体定位该蛋白,而且具有一定的小鼠体内保护作用。共筛选出4株(6H1、6G12、7B4和7A12)特异性好的单抗分泌株,经亚型测定,4株单抗重链均为IgG1,轻链均为κ链。抗体经纯化后测定效价为1∶8 000～1∶25 600;Western blot结果显示4株单抗能够同时识别重组表达及天然弓形虫SAG1抗原。筛选得到的2株抗SAG1单抗(6H1和7B4)可用于间接免疫荧光检测SAG1蛋白在虫体中的表达定位和分布。小鼠被动免疫保护试验表明,6H1和7B4两株单抗分别或联合使用可稍微延长被弓形虫感染的小鼠的存活时间。本试验研制的弓形虫SAG1单克隆抗体对将来研究弓形虫蛋白定位、弓形虫感染的诊断及防治具有一定的应用价值。; 蒋蔚刘迎春陈永军安立刚张花景王权; 关键词：弓形虫 SAG1 单克隆抗体免疫荧光检测免疫保护

磺胺氯吡嗪钠单克隆抗体的制备及鉴定被引量：3: 2015年; 应用重氮化方法制备了磺胺氯吡嗪钠(sulfachloropyrazine sodium,SPZ)完全抗原SPZ-OVA,将成功偶联的人工全抗原(SPZ-OVA)免疫BALB/c小鼠,免疫4次后,经间接ELISA检测,1号小鼠血清抗体效价达到1:6.4×104。取该小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合。利用ELISA方法对融合后的杂交瘤细胞上清进行检测,筛选出能够稳定分泌抗体的细胞株:D9。将细胞株D9扩大培养后,经腹腔注射小鼠使其产生腹水。腹水单抗经纯化后,通过间接竞争ELISA对该单克隆抗体的效价、半数抑制浓度以及特异性进行检测。结果表明,所制备的单克隆抗体效价为1:4×105,半数抑制浓度为326 ng/m L,特异性良好。; 张梦刘迎春蒋蔚陈永军张花景薛俊欣宫枫举曾鹏王民燕王权; 关键词：磺胺氯吡嗪钠单克隆抗体间接竞争ELISA

磺胺氯丙嗪钠中药复方在小鼠体内抗弓形虫疗效观察: 为探索治疗动物弓形虫病的有效药物组方，本研究首先通过药物体外试验观察磺胺氯丙嗪钠、磺胺嘧啶钠、甘草和黄芪抑制弓形虫增殖的效果，然后分别用磺胺氯丙嗪钠、甘草和黄芪以及三种药物的复方制剂，对人工感染弓形虫RH株的KM小鼠进行...; 蒋蔚陈永军张花景刘迎春荆振宇薛俊欣王权; 关键词：弓形虫病中药复方

弓形虫烯醇化酶2基因的原核表达与鉴定被引量：2: 2014年; 为深入研究弓形虫烯醇化酶的生物学功能,根据已发表的eno2基因序列设计引物,通过RTPCR方法扩增弓形虫RH株的eno2基因。将eno2克隆到载体pET-28a(+)中后,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达并优化表达条件,SDS-PAGE分析表达情况,并通过Western-blot和间接免疫荧光试验(IFA)鉴定其免疫活性。结果显示,eno2基因全长1 353bp,编码444个氨基酸,与GenBank中登录的弓形虫烯醇化酶基因的核苷酸序列及其推导的氨基酸序列的同源性均高达99.8%,与其他物种的烯醇化酶的同源性较低。在pH7.5、28℃和IPTG终浓度0.1mmol/L条件下,重组蛋白ENO2得到高效可溶性表达,分子质量约为55ku。Western-blot结果显示,重组蛋白能被感染弓形虫的犬阳性血清识别,说明ENO2具有较好的反应原性,可以作为血清学诊断抗原。IFA表明,NO2在弓形虫的细胞质和细胞核中均有分布。结果表明,本研究成功获得了可溶性、具有良好免疫活性的弓形虫重组蛋白ENO2,为深入研究其生物学功能奠定了基础。; 张花景蒋蔚刘迎春陈永军李欣彤石金磊乔元彪薛俊欣张梦王权; 关键词：弓形虫原核表达反应原性

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张花景