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新型血清型1型重组腺相关病毒载体携带血管内皮生长因子基因促血管生成的实验研究被引量：3: 2007年; 目的探讨采用腺相关病毒血清型1型的衣壳蛋白构建的"假毒粒"型重组腺相关病毒(rAAV)1载体介导血管内皮生长因子(VEGF)促血管新生的可行性、有效性。方法以每个细胞10~5vg rAAV1-绿色荧光蛋白(GFP)及 rAAV1-VEGF 载体量感染 C2C12细胞(小鼠成肌细胞)分化的肌管,荧光显微镜下观察 rAAV1-GFP 的转染效率。ELISA 法检测 rAAV1-VEGF 转染后细胞上清中VEGF 表达量。构建小鼠后肢缺血模型,术后10天每只小鼠股部缺血骨骼肌内注射3×10^(11)vg 的rAAV1-VEGF 载体,载体转染后1个月 ELISA 法检测小鼠缺血骨骼肌中 VEGF 蛋白表达量。载体转染后6周免疫组化检测小鼠缺血骨骼肌中毛细血管及小动脉新生情况。结果 rAAV1-GFP 感染后120 h 60%～80%的肌管可表达GFP。rAAV1-VEGF 载体感染后第3天细胞上清中分泌的 VEGF 表达量达到高峰,VEGF 浓度为(567.7±16.8)pg/ml。小鼠缺血骨骼肌中 rAAV1-LacZ 载体转染后1个月转染效率可达100%。rAAV1-VEGF 载体转染后1个月平均 VEGF 浓度为(205.4±36.1)pg/mg总蛋白,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01,n=5)。rAAV1-VEGF 载体转染有效促进了血管新生(P<0.001,n=6),载体转染6周缺血骨骼肌中毛细血管计数与小动脉计数分别为(147.0±13.3)/mm^2,(17.0±1.2)/mm^2。结论新型"假毒粒"型 rAAV1-VEGF 载体可能是治疗缺血性心血管疾病更为优越的基因治疗载体。; 鄢华吴小兵郭艳红张鹏陈莉董小岩王贵松高炜; 关键词：血管内皮生长因子腺相关病毒

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张鹏

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