文辉强
- 作品数：16 被引量：26H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生航空宇航科学技术更多>>
- 鸭圆环病毒FJ/2011株全基因组的克隆与序列分析
- 鸭圆环病毒可感染鸭的免疫系统，造成病鸭的免疫抑制，对养鸭业造成危害.利用PCR方法从福建地区某鸭场疑似鸭圆环病毒(DuCV)感染的病料中，经过全基因组扩增、克隆和测序，获得一株鸭圆环病毒，命名为DuCV/FJ/2011.
- 文辉强武永淑廉传江陈洪岩韩凌霞
- 关键词：鸭圆环病毒全基因组序列
- B19单倍型鸡BNK蛋白单克隆抗体的制备被引量：1
- 2015年
- 目的体外构建稳定表达鸡自然杀伤细胞(Natural killer,NK)BNK蛋白的细胞系,制备BNK蛋白的单克隆抗体,为鸡BNK蛋白及NK细胞的研究提供便利。方法利用BNK19原核表达产物免疫BALB/c小鼠,体外稳定表达疫病敏感性B19单倍型鸡BNK蛋白(BNK19)的真核细胞系筛选单克隆抗体。结果用稳定表达BNK蛋白的真核细胞系筛选到2株BNK19特异性单克隆抗体。结论获得的单克隆抗体经鉴定具有免疫学活性,为鸡BNK蛋白及NK细胞的作用机制研究提供了条件。
- 吴少莲彭蔚宇王兴童文辉强廉传江陈洪岩韩凌霞
- 关键词：单克隆抗体
- 鸭圆环病毒双拷贝串联基因组感染性克隆的构建
- 以鸭圆环病毒(Duck circovirus,DuCV)FJ/2011分离株基因组为模板,构建带遗传标记的双拷贝串联基因组感染性克隆(pEGFP-2DuCV).应用分子生物学技术,以GenBank数据库中本实验室测得的D...
- 文辉强武永淑张晓娜廉传江赵丽丽韩凌霞陈洪岩
- 关键词：鸭圆环病毒感染性克隆
- 文献传递
- B19和B21单倍型鸡NK细胞受体B-NK19和B-NK21的多克隆抗体制备及鉴定被引量：2
- 2014年
- 目的利用大肠杆菌系统表达对多种禽病存在敏感性差异的B19和B21单倍型鸡NK细胞抑制性受体B-NK基因,并制备其多克隆抗体。方法分别提取B19和B21鸡外周血淋巴细胞总RNA,采用反转录PCR法扩增B-NK基因(分别命名为B-NK19和B-NK21),克隆至pET-30a原核表达载体中,经酶切和PCR鉴定构建重组质粒。转入到大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,SDS-PAGE分析外源蛋白的表达。将含有与组氨酸(His)标签融合表达的外源蛋白胶条切下,多点皮下免疫新西兰兔,分别制备B-NK19和B-NK21特异性多克隆抗体。利用Western blot法鉴定其组织相容性复合体(MHC)单倍型特异性。结果成功构建了原核表达重组质粒pET-B-NK19和pET-B-NK21,利用IPTG在37℃诱导4 h后目的蛋白获得表达,免疫5次后收获兔多克隆抗体,Western blot表明B-NK19和B-NK21蛋白存在免疫学交叉反应和部分特异性。结论对多种禽病具有敏感性差异的MHC单倍体型B19和B21鸡的NK细胞抑制性受体B-NK蛋白存在抗原反应交叉性,其多克隆抗体具有部分特异性。
- 杨超张晓娜许峰铭文辉强廉传江陈洪岩韩凌霞
- 关键词：多克隆抗体
- 不同MHC-B单倍型SPF鸡对禽白血病的抗性研究被引量：3
- 2014年
- 目的探索不同MHC-B单倍型SPF鸡对禽白血病(Avian leukosis,AL)的抗性差异,为建立AL抗性和易感鸡系提供实验依据。方法选择纯合G1、G5、G6鸡系及杂合G8鸡系雏鸡进行人工感染白血病病毒A亚群(Avian leukosis virus,ALV-A)RAV-1毒株实验,G8系雏鸡(6羽)作为对照。攻毒后对各鸡系的死亡率、病变率、血液中抗体水平以及外周血淋巴细胞的病毒载量等与抗性相关指标进行动态评估与统计学分析,最终确定抗性较强和较弱的鸡系。结果 G5系病变率和死亡率均明显高于其它攻毒鸡系,G1系最低,G6和G8系居中;G1系在攻毒后第5周开始,抗体效价一直高于其它鸡系,而G5系则最低,并且在攻毒后第8周至11周和第15周至18周,G1系的抗体效价显著高于G5系(P<0.05);G1系的病毒载量在攻毒后第7周至15周,低于其它鸡系,而G5系自攻毒后第9周至13周,极显著高于G1系(P<0.01)。结论 G1系在感染ALV后,死亡率较低,病变轻微,抗体保护力较强,且病毒的增殖较慢,因而其对AL具有较强的抗性,而G5系则相反较为易感。本研究不仅为建立AL抗性较强和较易感的鸡系提供了实验依据,而且对进一步阐明鸡主要组织相容性复合体(Major histocompatablity complex,MHC)多态性与AL抗病性的关系有重要作用。
- 廉传江周刚司昌德文辉强陈洪岩韩凌霞
- 关键词：SPF鸡禽白血病抗性
- 鸡BLec基因重组蛋白的原核表达及兔多抗制备
- 为了制备鸡BLec蛋白的多克隆抗体,本实验采用RT-PCR技术从2月龄B15单倍型鸡的胸腺组织扩增了ChBLec基因,并以pET-30a(+)为原核表达载体成功构建重组质粒pET-30a-ChBLec,并在大肠杆菌BL2...
- 廉传江张园华张晓娜吴少莲文辉强陈洪岩韩凌霞
- 关键词：重组蛋白原核表达
- 文献传递
- 禽流感病毒NS1蛋白在杆状病毒表达系统中的表达被引量：3
- 2012年
- 为获得纯化的禽流感病毒(AIV)的NS1蛋白,将A/chicken/Guangxi/10/99(H9N2)(CK/GX/10/99)NS1全长核苷酸克隆至杆状病毒转移载体pFastBacHTA中,构建了重组转移载体pFastBacHTA-NS1,然后转化入DH10Bac感受态细胞中制备重组杆粒,在脂质体介导下转染sf9昆虫细胞,获得表达NS1基因的重组杆状病毒。用重组杆状病毒转染昆虫细胞sf9进行NS1蛋白的表达,通过SDS-PAGE电泳、Western blot、间接免疫荧光(IFA)对表达的目标蛋白进行分析。结果表明,构建了含NS1基因的重组杆状病毒,分子质量约30ku的重组蛋白得到了表达,为NS1的相关功能研究奠定了基础。
- 李东卫郭莹莹刘在斯王世达沈楠文辉强焦同路王靖飞
- 关键词：蛋白纯化
- MHC单倍型SPF鸭的培育及其TAP基因组序列分析
- 引言鸭主要组织相容性复合体（MHC）是一组紧密连锁高度多态的基因簇,其单倍型与宿主的抗病性和免疫应答水平密切相关[1,2],其中抗原提呈相关转运蛋白（TAP）基因毗邻MHCⅠ基因[3,4]。HBK鸭排除了10种特定病原体...
- 张晓娜武永淑吴少莲廉传江文辉强陈洪岩韩凌霞
- 不同周龄雌雄SJ5-SPF鸡生理常数及血液生化指标的测定与分析被引量：5
- 2018年
- 目的为探讨年龄和性别因素对SJ5-SPF鸡生理生化指标的影响。方法采用全自动血液分析仪对不同周龄SJ5-SPF鸡血液生化指标进行测定,包括谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、谷氨酰转移酶(GGT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、总蛋白(TP)、球蛋白(GLB)、白蛋白(ALB)、总胆红素(TB)、直接胆红素(DB)、间接胆红素(IBIL)、葡萄糖(GLU)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TCH)、尿素氮(BUN)、肌酐(CRE)、钾(K)、钠(Na)、钙(Ca),共19项。同时还用RM6240C多道生理信号采集处理系统对不同周龄SJ5-SPF鸡的体温(T)、呼吸频率(R)、心率(HR)、舒张压(DBP)和收缩压(SBP)进行测定。结果 (1)生理常数所测定体温、呼吸频率、心率、舒张压和收缩压五项指标中,组间相比,4周龄与20、25、40周龄比较均有显著性差异(P<0.05),同一周龄雌雄间只有体温没有差异;舒张压只在40周龄存在极显著性差异(P<0.01);心率在4周龄、20周龄和25周龄雌、雄间存在极显著性差异(P<0.01);而呼吸频率和收缩压雌、雄间在4个周龄均有显著性差异(P<0.05)。(2)血液生化指标测定19项显示,组间相比,雌性各周龄之间只有谷丙转氨酶差异无显著性(P>0.05),雄性仅有谷丙转氨酶和葡萄糖差异无显著性(P>0.05),其余生化指标均存在一定的差异;同一周龄雌雄间相比,谷氨酰转移酶、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素、直接胆红素、间接胆红素、葡萄糖、尿素氮和钠只有1个周龄差异有显著性(P<0.05),乳酸脱氢酶、总蛋白、球蛋白、白蛋白和肌酐在2个周龄差异有显著性(P<0.05),碱性磷酸酶、甘油三酯和钙在3个周龄差异有显著性(P<0.05),而胆固醇和钾在4个周龄差异有显著性(P<0.05)。结论本研究测定的结果可为SJ5-SPF鸡的疾病诊断、动物检疫和相关的研究提供科学依据。
- 赵丽丽文辉强韩凌霞赵丽彭一良李淑兰
- 关键词：生化指标
- HBK鸭人工感染鸭疫里默氏杆菌和Ⅰ型鸭肝炎病毒试验
- 目的 分析HBK鸭的TAP基因型对病原微生物感染的敏感性差异。方法 本研究分别利用A1、A2、A4和A2/A4基因型鸭感染鸭疫里默氏杆菌(RA)和Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-Ⅰ),每日观察动物精神状况,计算死亡率,观察组织脏...
- 韩凌霞武永淑张伟廉传江文辉强赵丽丽陈洪岩
- 关键词：鸭疫里默氏杆菌
