方兵
- 作品数：6 被引量：52H指数：4
- 供职机构：安徽农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：安徽省自然科学基金安徽省科技厅重点资助项目安徽省教育厅资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 28株水产动物致病菌的编码鉴定被引量：14
- 2004年
- 采用国产革兰氏阴性杆菌编码鉴定系列培养基对 2 8株细菌进行鉴定。结果显示 :除 2株细菌未能得到鉴定外 ,其余 2 6株细菌均鉴定到属或种水平 ,可鉴定率为 92 .86 % ,但各菌株的鉴定概率和模式频率有所不同。 2 6株可鉴定菌分布于气单胞菌属 (Aeromonas)、假单胞菌属 (Pseudomonas)、不动杆菌属 (Acine tobacter)、摩根氏菌属 (Morganella)、弧菌属 (Vibrio)、变形杆菌属 (Proteus)、黄单胞菌属 (Xanthomonas)、邻单胞菌属 (Plesiomonas)和埃希氏菌属 (Escherichia) 9个菌属 ,其中 13株为气单胞菌 (Aeromonas) ;3株为恶臭假单胞菌 (P .putide) ;2株为摩氏摩根氏菌 (M .morganella) ;2株为不动杆菌 (Acinetobacter) ;2株为类志贺邻单胞菌 (P .shigelloides) ;拟态弧菌 (V .mimicus)、普通变形杆菌 (P .vulgaris)、嗜麦芽黄单胞菌 (X .maltophilia)和大肠埃希氏菌 (E .coli)各 1株。基本上摸清了安徽省水产养殖动物常见病原菌的种类。
- 李槿年江定丰李琳方兵祖国掌
- 关键词：水产动物致病菌革兰氏阴性杆菌
- 中华绒螯蟹腹水病病原分析被引量：15
- 2005年
- 从六安地区患腹水病的中华绒螯蟹(Eriochersinensis)体内分离到一株病原菌(HX4菌株),经API/ATB半自动化鉴定和分子遗传学鉴定,确定为拟态弧菌(V mimicus)。应用PCR技术、电镜技术、组织细胞模型和动物实验对该菌的毒素共调菌毛(ToxinCoregulatedPilus,TCP)、外毒素和内毒素等毒力因子研究的结果表明,HX4菌株为TCP+株,在pH6 7定居因子培养基中,30℃需氧培养条件下可较好表达TCP;TCP+菌对肠管的黏附率为(32 19±0 14)%、对HEp 2细胞的黏附菌数为16 03±4 66、对中华绒螯蟹的毒力(LD50)为2 08×106CFU·mL-1,均显著高于TCP-菌,其相应值分别为(0 52±0 06)%、6 8±2 06和2 09×107CFU·mL-1;外毒素具有很强的细胞毒性(TCID500 25μg)、肠毒性(皮肤蓝斑直径15mm)和中华绒螯蟹致死性(LD501 40μg),而内毒素对中华绒螯蟹基本无致病性。由此可见,TCP和外毒素是拟态弧菌HX4菌株的2种重要毒力因子,在细菌致病过程中起重要作用。
- 李槿年李玉英胡守奎李琳方兵余为一张晓华
- 关键词：中华绒螯蟹腹水病拟态弧菌
- 气单胞菌安徽分离株的鉴定、毒力基因检测及其序列分析
- 气单胞菌是危害水产动物的重要病原菌,不仅可引起水产养殖动物严重的败血性疾病,而且可以通过水产动物和水产品感染人畜,导致人畜腹泻和食物中毒,危害人类健康。安徽是水产养殖大省,养殖产量逐年递增,但是随着水产养殖业的迅速发展,...
- 方兵
- 关键词：致病性气单胞菌
- 文献传递
- 6株水产动物源气单胞菌安徽分离株的毒力基因的克隆与序列测定
- 粘附素(aha1)、气溶素(aerA)和细胞兴奋性肠毒素(alt)是气单胞菌的主要毒力因子.根据aha1、aerA和alt基因序列设计三对引物建立了可同时检测三种毒力基因的多重PCR方法(MPCR).该方法扩增出气单胞菌...
- 方兵李槿年汪天杰祖国掌余为一
- 关键词：安徽分离株毒力基因克隆测序
- 文献传递
- 6株水产动物源气单胞菌安徽分离株的毒力基因的克隆与序列分析被引量：7
- 2006年
- 根据气单胞菌主要黏附素基因（ahal）、溶血素基因（hly）和细胞兴奋性肠毒素基因（alt）完整开放阅读框（0RF）设计3对特异性引物，对6株气单胞菌安徽分离株进行ahal、hly和alt基因的PCR扩增、克隆和测序。测序结果显示，安徽分离株aim、hly和alt基因的ORF大小分别为1056--1068bp、1482bp和1104N1107bp，各编码351-355、493和367-368个氨基酸。序列分析显示：（1）属于alt^＋aim^＋hly^＋毒力基因型的3个安徽分离株间aha1核苷酸序列和推测的氨基酸序列同源性均很高，分别为98.8％-99．3％和97％-97．6％，且与国内参考株mh／Trionyx sinensis／Guangzhou（Guangdong）／AF276639的同源性高达98．5％-99％和96.8％-97．6％。而alt^＋ahal^＋hly^-HA6安徽分离株与国外参考株Ah／Fish／Barcelona（Spain）／AF183931间的核苷酸序列和氨基酸序列同源性较高，分别为95.8％和97．2％。（2）不同表型种气单胞菌安徽分离株之间及其与国内外其他分离株之间的hly核苷酸序列和推测的氨基酸序列同源性均较高，分别介于88．4％-100％之间和90.8％-98．7％之间。（3）5个安徽分离株（RA16、CA1、HA6、HA7和GA1）之间及其与惟一参考株之间的alt核苷酸序列和推测的氨基酸序列同源性分别高达93．5％-99．9％和80．2％-98．3％，但与BA17分离株间的核苷酸序列同源性（81．6％-81．7％）和推测的氨基酸序列同源性（77．5％-84．9％）均较低。这些结果表明，气单胞菌ahal和alt基因在不同毒力基因型间存在一定差异性，hly基因在不同表型种间存在较高保守性，该基因可作为研制气单胞菌基因工程亚单位疫苗的候选成分。
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- 关键词：气单胞菌安徽分离株毒力基因
- 应用多重PCR检测水生动物源气单胞菌安徽分离株的毒力基因型分布被引量：14
- 2005年
- 粘附素(aha1)、气溶素(aerA)和细胞兴奋性肠毒素(alt)是气单胞菌的主要毒力因子。根据aha1、aerA和alt基因序列设计三对引物建立了可同时检测三种毒力基因的多重PCR方法(MPCR)。该方法扩增出气单胞菌的aha1大小为1087bp,aerA为721bp,alt为480bp,其敏感度为102CFU·mL-1。而对金黄色葡萄球菌、恶臭假单胞菌、拟态弧菌以及非致病性气单胞菌均未扩增出任何条带。用限制性内切酶EcoRⅤ、BamHⅠ和FbaⅠ分别酶切PCR扩增产物,均获得与预期一致的酶切图谱。用建立的MPCR对15株水生动物源气单胞菌安徽分离株进行毒力基因检测,结果显示在13株致病性气单胞菌中10株细菌的毒力基因型为alt+aha1+aerA+,2株为alt+aha1-aerA-,1株为alt+aha1+aerA-;alt、aha1和aerA基因在气单胞菌中的携带率分别为100%、84.62%和76.92%。表明气单胞菌安徽分离株的主要毒力基因型是alt+aha1+aerA+的高毒力表型,alt毒力基因普遍存在于不同表型种气单胞菌中。
- 方兵李槿年祖国掌余为一
- 关键词：多重PCR安徽分离株
