杜爱庆
- 作品数：11 被引量：28H指数：3
- 供职机构：山东农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：山东省科技攻关计划重大科技专项山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪胸膜肺炎放线杆菌蛋白酶的分离纯化及特性分析被引量：2
- 2008年
- 将血清7型猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)山东分离株接种含0.2%NAD的LB液体培养基,37℃培养48 h后,经硫酸铵盐析、DEAE-纤维素离子交换层析、葡聚糖凝胶分子筛层析,从其培养上清液中分离纯化了1种蛋白酶。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示,APP蛋白酶含有相对分子质量约为45 000的亚单位。以酪蛋白为底物测得该酶的最适pH值为7.5,最适温度为45℃;该酶对热有一定的稳定性,80℃加热30 min仍保留部分活性;乙二胺四乙酸(EDTA)可抑制其活性,而苯甲基磺酰氟(PMSF)对其无影响。
- 张瑞平刁有祥张伟杜爱庆刘方娜臧大鹏
- 关键词：胸膜肺炎放线杆菌蛋白酶分离纯化特性分析
- 猪胸膜肺炎放线杆菌溶血毒素的克隆表达及表达产物对小白鼠的免疫保护性研究
- 猪传染性胸膜肺炎是由猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacilluspleuropneumoniae，APP)引起的一种传染性呼吸道疾病。该病在各年龄阶段的猪均有发生。临床症状以病猪呼吸困难为特征，病理变化主要是肺部不同...
- 杜爱庆
- 关键词：胸膜肺炎放线杆菌溶血毒素免疫保护
- 文献传递
- 犬附红细胞体PCR检测方法的建立与应用被引量：2
- 2007年
- 根据Genbank中已经发表的犬附红细胞体基因序列设计合成一对特异性引物,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增出一条与目的片段大小一致,约630bp的基因片段,建立了犬附红细胞体PCR快速检测方法。研究结果表明该方法只能从犬附红细胞体中扩增出约630bp的基因片段。敏感性试验表明该方法最低可检测到10pg的DNA。利用该方法对临床上12例疑似犬附红细胞体血样进行检测,检出率75%,而直接镜检的阳性检出率仅为66.7%。
- 车京波张伟战玉萍杜爱庆曲德福
- 关键词：酶切鉴定
- 淄博地区猪胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定及药敏试验被引量：2
- 2007年
- 此次分离的细菌为猪胸膜肺炎放线杆菌,有血清5型和血清7型两个血清型,其中血清5型13株(65%)血清7型7株(35%),血清5型为相对优势的血清型;小白鼠致病性实验结果发现,同一血清型的猪胸膜肺炎放线杆菌接种小鼠后的发病情况和剖检变化基本相同。药敏试验表明所分离的胸膜肺炎放线杆菌对头孢三嗪、丁胺卡那霉素、庆大霉素等高度敏感,而对氟哌酸、氨苄青霉素、呋喃妥因有抗性。
- 陈凯杜爱庆张伟曲德福战玉萍
- 关键词：胸膜肺炎放线杆菌药敏试验
- 犬附红细胞体病PCR检测方法的建立及应用被引量：3
- 2009年
- 根据Genbank中已经发表的犬附红细胞体16sRNA基因序列设计合成一对特异性引物,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增出一条与目的片段大小一致,约630 bp的基因片段,建立了PCR快速检测方法.以建立的PCR检测方法及瑞氏、姬姆萨、吖啶橙染色法为基础对20例犬附红细胞体病例进行检测,比较四种方法的检出率.结果表明:建立的PCR检测方法的检出率略高于吖啶橙染色,明显高于瑞氏、姬姆萨染色,进而证明建立的PCR检测方法可用于犬附红细胞体的快速诊断和流行病学调查.
- 张伟刁有祥臧大鹏杜爱庆张瑞平马艳芳
- 关键词：犬附红细胞体瑞氏染色吖啶橙染色
- 鹅副黏病毒核酸探针检测方法的建立与应用被引量：1
- 2008年
- 根据GenBank中已发表的鹅副黏病毒F基因序列,设计合成1对引物,利用RT-PCR扩增出1条与目的片段大小一致,约856bp的基因片段,回收并纯化此PCR产物。用随机引物法合成cDNA,地高辛标记,建立了地高辛标记探针检测鹅副黏病毒的方法。该探针能与鹅副黏病毒核酸发生特异性杂交,最低检出限量为3ng/L;而与H9N2亚型禽流感病毒、鹅细小病毒、大肠杆菌等核酸杂交均为阴性。对疑似鹅副黏病毒感染病变组织检测结果表明,气管、肺脏、脾脏、肝脏均可检测出鹅副黏病毒,以气管的检出率为最高。该研究为鹅副黏病毒的诊断和流行病学调查提供了一种可靠的方法。
- 张伟刁有祥杜爱庆高晓伟张瑞平刘方娜臧大鹏刘霞
- 关键词：鹅副黏病毒地高辛标记探针RT-PCR
- 种鸡维生素D_3缺乏症的诊疗被引量：1
- 2007年
- 张瑞平张伟杜爱庆臧大鹏张磊
- 关键词：维生素D3缺乏症蛋种鸡诊疗骨骼畸形种鸡场
- 鼻气管鸟杆菌病的研究现状被引量：4
- 2008年
- 鼻气管鸟杆菌病是近年来新发现的一种感染家禽和野鸟的呼吸道细菌病,主要表现为鸡和火鸡生长迟缓,产蛋率下降、高死亡率、单侧或双侧纤维素性化脓性肺炎、胸膜炎、气囊炎。也常合并、继发新城疫病毒、大肠埃希菌和副鸡嗜血杆菌感染,从而引起急性死亡,危害很大,给养禽业造成严重的经济损失,是一种值得重视的新病。文章对该病的病原、流行病学、症状与病变、诊断方法及预防措施等进行了综述。
- 王明亮刁有祥纪巍张瑞平杜爱庆马艳芳
- 关键词：鼻气管鸟杆菌流行病学预防措施
- 当前新城疫的流行情况及防控措施
- 2006年
- 刘金明杨玉华张伟刘方娜杜爱庆李体峰
- 关键词：新城疫鸡病防控措施
- 猪胸膜肺炎放线杆菌溶血毒素的克隆表达及其对小鼠免疫保护作用被引量：10
- 2008年
- 将猪胸膜肺炎放线杆菌血清3型分离株的ApxⅡA、ApxⅢA、ApxⅣA基因和血清5型分离株的ApxⅠA基因分别克隆到原核表达载体pGEX-5X-3,并在大肠杆菌BL21中进行表达。SDS-PAGE结果表明重组菌表达的最佳条件为诱导时间2小时和IPTG终浓度1mmol/L。通过硫酸铵盐析和SephadexG-200凝胶过滤层析纯化表达产物。Westernblot检测结果显示表达产物具有免疫活性。按照不同组合将表达产物与弗氏佐剂等比例混合,制备3种亚单位疫苗。并在30日龄和45日龄免疫小白鼠,在60日龄分别用血清1、3、5、7和10型胸膜肺炎放线杆菌攻毒。血清1、5和7型胸膜肺炎放线杆菌攻毒后,3种亚单位疫苗分别提供58.4%、66.6%和91.7%的保护率。试验结果表明重组蛋白具有免疫保护作用,且含有四种融合蛋白的亚单位疫苗免疫保护效果最佳。
- 杜爱庆刁有祥张伟张瑞平臧大鹏刘芳娜
- 关键词：胸膜肺炎放线杆菌溶血毒素免疫保护
