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牛结核分支杆菌外膜蛋白OMP37、OMP12基因的克隆表达及免疫活性检测: 牛结核病是由结核分枝杆菌引起的一种人兽共患传染病。人畜结核病的交叉传播是造成结核病广泛流行的重要原因之一。由于牛与人类关系密切,致使人类结核病的10/%以上是由牛分枝杆菌引起的,所以,牛结核的存在严重威胁着人类的健康。本...; 臧大鹏; 关键词：结核分枝杆菌外膜蛋白免疫原性; 文献传递

犬附红细胞体病PCR检测方法的建立及应用被引量：3: 2009年; 根据Genbank中已经发表的犬附红细胞体16sRNA基因序列设计合成一对特异性引物,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增出一条与目的片段大小一致,约630 bp的基因片段,建立了PCR快速检测方法.以建立的PCR检测方法及瑞氏、姬姆萨、吖啶橙染色法为基础对20例犬附红细胞体病例进行检测,比较四种方法的检出率.结果表明:建立的PCR检测方法的检出率略高于吖啶橙染色,明显高于瑞氏、姬姆萨染色,进而证明建立的PCR检测方法可用于犬附红细胞体的快速诊断和流行病学调查.; 张伟刁有祥臧大鹏杜爱庆张瑞平马艳芳; 关键词：犬附红细胞体瑞氏染色吖啶橙染色

鸡传染性支气管炎病毒793/B TA03株S1基因的克隆与原核表达: 本研究根据鸡传染性支气管炎病毒(IBV)793/B S1基因序列,设计和合成两对引物,以TA03株IBV病毒RNA为模板,通过RT-PCR扩增出S1蛋白基因的两个部分重叠片段,分别将其插入表达性载体pGEX-6P-1中,...; 于申业刁有祥臧大鹏刘方娜王辉孟凡磊王妮; 关键词：鸡传染性支气管炎病毒 S1基因基因克隆原核表达; 文献传递

猪胸膜肺炎放线杆菌蛋白酶的分离纯化及特性分析被引量：2: 2008年; 将血清7型猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)山东分离株接种含0.2%NAD的LB液体培养基,37℃培养48 h后,经硫酸铵盐析、DEAE-纤维素离子交换层析、葡聚糖凝胶分子筛层析,从其培养上清液中分离纯化了1种蛋白酶。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示,APP蛋白酶含有相对分子质量约为45 000的亚单位。以酪蛋白为底物测得该酶的最适pH值为7.5,最适温度为45℃;该酶对热有一定的稳定性,80℃加热30 min仍保留部分活性;乙二胺四乙酸(EDTA)可抑制其活性,而苯甲基磺酰氟(PMSF)对其无影响。; 张瑞平刁有祥张伟杜爱庆刘方娜臧大鹏; 关键词：胸膜肺炎放线杆菌蛋白酶分离纯化特性分析

鹅副黏病毒核酸探针检测方法的建立与应用被引量：1: 2008年; 根据GenBank中已发表的鹅副黏病毒F基因序列,设计合成1对引物,利用RT-PCR扩增出1条与目的片段大小一致,约856bp的基因片段,回收并纯化此PCR产物。用随机引物法合成cDNA,地高辛标记,建立了地高辛标记探针检测鹅副黏病毒的方法。该探针能与鹅副黏病毒核酸发生特异性杂交,最低检出限量为3ng/L;而与H9N2亚型禽流感病毒、鹅细小病毒、大肠杆菌等核酸杂交均为阴性。对疑似鹅副黏病毒感染病变组织检测结果表明,气管、肺脏、脾脏、肝脏均可检测出鹅副黏病毒,以气管的检出率为最高。该研究为鹅副黏病毒的诊断和流行病学调查提供了一种可靠的方法。; 张伟刁有祥杜爱庆高晓伟张瑞平刘方娜臧大鹏刘霞; 关键词：鹅副黏病毒地高辛标记探针 RT-PCR

猪胸膜肺炎放线杆菌溶血毒素的克隆表达及其对小鼠免疫保护作用被引量：10: 2008年; 将猪胸膜肺炎放线杆菌血清3型分离株的ApxⅡA、ApxⅢA、ApxⅣA基因和血清5型分离株的ApxⅠA基因分别克隆到原核表达载体pGEX-5X-3,并在大肠杆菌BL21中进行表达。SDS-PAGE结果表明重组菌表达的最佳条件为诱导时间2小时和IPTG终浓度1mmol/L。通过硫酸铵盐析和SephadexG-200凝胶过滤层析纯化表达产物。Westernblot检测结果显示表达产物具有免疫活性。按照不同组合将表达产物与弗氏佐剂等比例混合,制备3种亚单位疫苗。并在30日龄和45日龄免疫小白鼠,在60日龄分别用血清1、3、5、7和10型胸膜肺炎放线杆菌攻毒。血清1、5和7型胸膜肺炎放线杆菌攻毒后,3种亚单位疫苗分别提供58.4%、66.6%和91.7%的保护率。试验结果表明重组蛋白具有免疫保护作用,且含有四种融合蛋白的亚单位疫苗免疫保护效果最佳。; 杜爱庆刁有祥张伟张瑞平臧大鹏刘芳娜; 关键词：胸膜肺炎放线杆菌溶血毒素免疫保护

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臧大鹏