杨康
- 作品数：11 被引量：12H指数：3
- 供职机构：新疆农业大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 马流产沙门菌鞭毛重组蛋白FliC的原核表达及对小鼠的免疫保护试验被引量：3
- 2017年
- 为研究马流产沙门菌新疆分离株鞭毛蛋白FliC(flagellin C)的免疫生物学特性及保护特性。本研究利用PCR技术扩增获得该菌的Fli C基因,并将其连接到原核表达载体p ET-28a(+)上,构建重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞后,用IPTG诱导表达重组蛋白,SDS-PAGE和Western-blot检测与分析表达蛋白,并将纯化的重组蛋白免疫小鼠。结果显示,成功诱导表达了52 ku的重组蛋白,该蛋白第2次免疫小鼠第14天时血清中的特异性Ig G抗体效价可达1∶72 900,且抗体亚型以Ig G1为主,免疫小鼠的攻击保护率可达73%。结果表明,Fli C重组蛋白具有良好的免疫原性和免疫保护效果。为进一步开展马流产沙门菌亚单位疫苗的研究奠定了基础。
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- 关键词：免疫保护效果
- 马流产沙门氏菌新疆分离株FliC基因的克隆及分子特征分析被引量：3
- 2014年
- 为了解马流产沙门氏菌新疆分离株的分子特征及其鞭毛蛋白FliC基因的结构与功能,本试验运用PCR技术扩增了分离鉴定的2株马流产沙门氏菌新疆株FliC基因,克隆测序并对其进行了生物信息学分析。分析结果显示,成功获得了626bp的FliC基因（GenBank登录号：KJ486797、KJ486798）。对分离的2株马流产沙门氏菌FliC基因的核苷酸序列同源性分析结果显示,FliC基因新疆分离株与GenBank登录的其他沙门氏菌分离株的核苷酸序列同源性为49.6%～100.0%。该结果表明马流产沙门氏菌的FliC基因在该菌进化和流行的过程中是保守的,本研究将为分析该病的分子流行和进一步利用FliC基因防制该菌引起的感染提供试验基础。
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- 关键词：马流产沙门氏菌克隆分子特征分析
- ELISA和微量凝集法检测马流产沙门菌血清抗体的比较被引量：6
- 2015年
- 为比较微量凝集(MSAT)和间接ELISA方法检测马流产沙门菌血清抗体的检出率和符合率,本试验分别用全菌包被间接ELISA、MSAT法对采集的191份马血清及标准阴阳性血清进行马流产沙门菌抗体的检测,并对两种方法进行比较分析。MSAT法和间接ELISA法的阳性检出率分别为45.03%和47.12%,MSAT法与间接ELISA法的符合率为89%。MSAT法不需要精密的仪器,便于操作,操作周期短,但存在观察时的人为误差;间接ELISA具有较高的敏感性、特异性和准确性。在实践中可以将两种方法相结合使用。
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- 关键词：血清抗体间接酶联免疫吸附试验
- 一种马流产沙门氏菌鞭毛蛋白FliC的制备方法和应用
- 本发明公开了马流产沙门氏菌来源的鞭毛蛋白FliC的制备方法和其在马流产沙门氏菌病免疫中的可能应用。通过将马流产沙门氏菌来源的鞭毛蛋白FliC基因克隆并连接到原核表达载体pGEX‑4T‑2中，获得该蛋白的原核重组体,转化至...
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- 文献传递
- 一种马流产沙门菌PCR检测试剂盒及其检测方法
- 本发明涉及一种可用于检测马流产沙门氏菌的PCR检测试剂盒，包括引物、dNTP、缓冲液和DNA聚合酶，其中的上游引物是5’ATTAGTGCCGGTTTTATCCT3’下游引物是5’TTACCACTCGCATCAAATC3’...
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- 文献传递
- 一株马流产沙门氏菌菌株SMXJ-97及其在马流产沙门氏菌疫苗中的应用
- 本发明涉及一株马流产沙门氏菌（<I>Salmonella abortus equi</I>）SMXJ‑97 CGMCC No.9047，具有序列表1中的16S rRNA基因序列；该菌株分离自新疆地区流产病马,细菌呈直杆状...
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- 马流产沙门菌鞭毛蛋白FliC对马腺疫链球菌SeM蛋白免疫效应分析被引量：3
- 2018年
- 为研究马流产沙门菌(Salmonella abortus equi)鞭毛蛋白FliC对马腺疫链球菌(Streptococcus equi subsp.equi)SeM蛋白免疫效果的增强效应,为马腺疫新型高效疫苗的研发奠定基础。本研究构建并诱导表达了FliC,经亲和层析纯化目的蛋白,Western blot检测其免疫原性。将该纯化后FliC与SeM蛋白联合免疫C57BL/6小鼠,免疫后对小鼠进行抗体水平、抗体类型和攻毒保护力的检测。结果表明,成功表达、纯化了FliC重组蛋白,SDSPAGE电泳检测显示该蛋白质为52ku。抗体分型检测结果显示产生的抗体主要以IgG1为主;免疫30d后FliC+SeM免疫组的攻毒保护率为87%,高于SeM免疫组的保护率67%。马流产沙门菌来源的鞭毛蛋白FliC能够增强SeM蛋白的免疫保护效果,该结果为进一步更好地利用SeM蛋白奠定了基础。
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- 关键词：FLICSEM免疫效应免疫保护力
- 马流产沙门氏菌新疆分离株鉴定免疫及其FliC蛋白增强SeM蛋白及gD蛋白抗体应答的研究
- 马流产沙门氏菌可引起妊娠母马流产，幼驹败血症，下痢，公马睾丸炎，髯甲脓肿。该病可给马养殖业造成严重经济损失。本研究首先对新疆地区养马较为集中的昭苏县、富蕴县、特克斯县、和静县、吉木乃县的养殖场（户）的2768份马血清样品...
- 杨康
- 关键词：马流产沙门氏菌分离纯化技术联合免疫
- 文献传递
- 一株马流产沙门氏菌菌株SMXJ-97及其在马流产沙门氏菌疫苗中的应用
- 本发明涉及一株马流产沙门氏菌（<I>Salmonella abortus equi</I>）SMXJ‑97 CGMCC No.9047，具有序列表1中的16S rRNA基因序列；该菌株分离自新疆地区流产病马,细菌呈直杆状...
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- 文献传递
- 一种马流产沙门氏菌鞭毛蛋白FliC的制备方法和应用
- 本发明公开了马流产沙门氏菌来源的鞭毛蛋白FliC的制备方法和其在马流产沙门氏菌病免疫中的可能应用。通过将马流产沙门氏菌来源的鞭毛蛋白FliC基因克隆并连接到原核表达载体pGEX‑4T‑2中，获得该蛋白的原核重组体,转化至...
- 苏艳杨康苏玲玲
