江育林
- 作品数：77 被引量：535H指数：15
- 供职机构：中国检验检疫科学研究院更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 用酶联免疫吸附试验快速检测虹鳟的传染性胰脏坏死病病毒被引量：15
- 1990年
- 我国于1987年从进口的虹鳟中分离了传染性胰脏坏死病病毒(Infectious pancreatic necrosis virus简称IPNV),并进行了血清学鉴定。由于病鱼没有特有的临床症状,所以迅速查找鱼体内特异性的病毒是十分必要的。本文报道了用酶联免疫吸附试验(ELISA)
- 江育林于平李正秋
- 关键词：虹鳟鱼ELISA鱼病
- 流行性造血器官坏死病病毒抗原捕获ELISA建立被引量：1
- 2017年
- 使用差速离心浓缩的病毒免疫山羊,获得高免血清并提取IgG,即为抗流行性造血器官坏死病病毒(EHNV)多克隆抗体。利用纯化的EHNV免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合,经有限稀释法亚克隆,获得杂交瘤细胞株。将杂交瘤接种小鼠诱生腹水获得单抗3A4。以抗EHNV多克隆抗体为捕获抗体,单抗3A4为检测抗体,使用HRP标记的羊抗鼠IgG作为酶标二抗,建立了EHNV的抗原捕获ELISA方法。该方法可检出103TCID_(50)的病毒液上清和0.0056!g的MCP重组蛋白。对纯化的GCRV、IHNV、IPNV、VHSV及SVCV病毒液进行检测,结果均为阴性,未发现交叉反应。本研究建立的EHNV抗原捕获ELISA方法,具有敏感、特异和重复性好的特点。通过应用于人工感染样品和临床样品的检测进一步证实了本检测方法的实用性。
- 刘宁高志强谷强张旻景宏丽江育林张利峰刘金华
- 三种蛙虹彩病毒Nest-PCR检测方法的建立
- 根据中华鳖虹彩病毒(soft-shelled turtle iridovirus,STIV)核衣壳蛋白(MCP)基因的保守区,设计了内引物和外引物个一对,建立了Nest-PCR检测体系。该体系可以特异性检测流行性造血器官...
- 张旻林祥梅刘荭江育林
- 关键词：检测限
- 养殖锦鲤鲤鱼浮肿病的检测与鉴定被引量：15
- 2017年
- 北京房山某锦鲤养殖场锦鲤发生大量死亡,患病锦鲤呈烂鳃、肾脏糜烂、身体浮肿;症状类似锦鲤疱疹病毒(koi herpes virus,KHV)感染,但经PCR检测排除了KHV感染。为进一步确定病原,对发病鱼进行了临床症状观察、病毒分离、细菌分离培养、病鱼组织超薄切片电镜观察和PCR扩增等检测。通过病鱼组织超薄切片电镜观察,在肾脏内可见200nm×400nm的痘病毒样颗粒。抽提病毒核酸后,用已知的鲤鱼浮肿病毒(carp edema virus,CEV)的保守序列设计2对引物进行PCR扩增,扩增出548和180bp片段,测序结果和GenBank公布的CEV H504株序列完全一致。根据发病鱼临床症状和实验室检测结果,最终确定该病为CEV引起的鲤鱼浮肿病。这是在中国首次发现的鲤鱼浮肿病。
- 徐立蒲王小亮张文潘勇景宏丽王静波王姝曹欢王澎那立海江育林
- 关键词：锦鲤疱疹病毒锦鲤
- 斑点叉尾鮰病毒焦磷酸测序检测方法的建立被引量：2
- 2018年
- 旨在建立一种基于PCR的焦磷酸测序检测方法,用于斑点叉尾鮰病毒病的快速检测和确诊。针对斑点叉尾鮰病毒（CCV）蛋白激酶（PK）基因的保守区域设计扩增引物与测序引物,经PCR扩增后对PCR产物进行焦磷酸测序,借助测序结果比对确定是否为CCV核酸序列。通过对反应条件与体系的优化,成功建立了CCV PK基因焦磷酸测序检测方法。结果表明：建立的斑点叉尾鮰病毒焦磷酸测序检测方法扩增基因片段长度为144 bp,能够特异性检测出目的病毒,最低核酸检测限为5×10-6ng/μL,重复测序3次均能准确测出45 bp核酸序列。本研究建立的斑点叉尾鮰病毒焦磷酸测序检测方法特异性强、灵敏度高、重复性好,适合高通量检测且耗时短仅需4 h,为CCV的快速检测提供了一种可行方法。
- 王娜张旻景宏丽江育林吴绍强
- 关键词：焦磷酸测序PCR蛋白激酶基因
- 草鱼免疫应答的初步研究被引量：24
- 1991年
- 研究了草鱼在不同水温条件下受抗原刺激后其中和抗体的变化。15℃培养条件下中和抗体上升缓慢,9周内滴度低于1:8;20℃时,3周后抗体可上升到1:256,最高达1:5270,而在25℃时,1周中和抗体即达到1:570,最高可达1:20000以上。并探索了从草鱼血清中提纯抗体的条件,研究其抗体的特性。草鱼血清中的抗体为大分子蛋白,容易解离为抗原性相同,分子量近似于人IgG的较小分子,含有较多的二硫键,具有类似IgM的某些特性。
- 江育林李燕于平
- 关键词：草鱼免疫应答抗体
- 金鱼吻端细胞系及其应用
- 本发明公开了一种金鱼吻端细胞系及其应用。该金鱼吻端细胞系已于2013年12月4日保存在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），并证明存活，其保藏登记编号为CGMCC No.8558。本发明所述的金鱼吻端...
- 景宏丽高隆英张旻张利峰王娜林祥梅吴绍强江育林
- 文献传递
- 传染性脾肾坏死病毒Nest-PCR的检测方法及其试剂盒
- 本发明涉及一种传染性脾肾坏死病毒Nest-PCR的检测方法，该方法以染病的宿主脾肾或细胞病变效应完全的敏感细胞系总DNA为模板，以标准品为阳性对照，用外引物P1：TTACAGGATAGGGAAGCC和P2ATGTCTGC...
- 张旻江育林
- 鲤春病毒血症病毒糖蛋白基因的克隆及其在毕赤酵母中的初步表达被引量：14
- 2007年
- 根据SVCV糖蛋白基因序列设计引物,在5’引物和3’引物中分别引入酶切位点。以病毒核酸为模板用RT-PCR方法扩增该段糖蛋白基因,将所得的基因片段(517和521)克隆至穿梭载体pGAPZαA/B之GAP启动子下游位点,构建含α信号肽的重组表达载体。获得的重组质粒pGAPZαA-517和pGAPZαB-521经线性化后,电击法转化毕赤酵母SMD1168菌株,构建分泌型表达SVCV糖蛋白的重组酵母菌株。酵母菌落PCR法检测表明,已成功构建分泌表达SVCV糖蛋白的酵母基因工程菌株,斑点印迹法进一步分析表明有目的蛋白的成功表达。
- 付峰刘荭范万红江育林黄倢
- 关键词：鲤春病毒血症病毒糖蛋白毕赤酵母分泌表达
- 用于蛙虹彩病毒检测的标准阳性参考物质
- 本发明首先设计了一对可特异性扩增甲鱼虹彩病毒核衣壳蛋白全基因的引物，其具有如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。用其扩增出的甲鱼虹彩病毒核衣壳蛋白全基因，具有如SEQID NO.3所示的核苷酸...
- 张旻江育林
- 文献传递
