潘敏慧
- 作品数：153 被引量：272H指数：8
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- 一种家蚕类浓核病毒的组织病理学特征(英文)
- 2009年
- 本文从家蚕病蚕中分离到一种家蚕类浓核病毒(BmDNV-Like),对它的组织病理学研究表明:该病毒首先寄生家蚕中肠柱状细胞,继而引起其细胞核的膨大和破裂;组织原位杂交结果表明该病毒既能在家蚕中肠柱状细胞中增殖,也能在中肠的杯形细胞中增殖,甚至在感染后期能在家蚕幼虫的大部分组织细胞中感染和增殖。
- 潘敏慧肖仕全李娜鲁成向仲怀
- 关键词：浓核病毒家蚕组织病理学特征
- 柞蚕核多角体病毒lef-12基因序列及转录分析(英文)
- 2008年
- 为加强柞蚕核多角体病毒(Anthraea pernyinucleopolyhedrovirus,ApNPV)的分子基础研究,对ApNPVlef-12基因进行序列及转录分析。ApNPVlef-12基因长516个核苷酸,编码171个氨基酸,预测分子质量19.0 kD。Ap-NPVlef-12基因5′端非编码区含有杆状病毒晚期基因启动子模序(ATAAG),但终止密码子(TAG)下游没有典型的多聚腺苷酸信号(AATAAA)。PSI-BLAST表明18种鳞翅目NPV编码ApNPV LEF-12同源蛋白;ApNPV LEF-12蛋白与类群ⅠNPVLEF-12的氨基酸一致性高于其与类群ⅡNPVLEF-12的氨基酸一致性。ApNPVLEF-12蛋白及与其关系较近的同源蛋白的有效密码子数较低。转录分析表明,ApNPVlef-12基因属晚期表达基因。
- 石生林潘敏慧王强鲁成
- 关键词：柞蚕核多角体病毒转录分析
- 家蚕原代细胞有丝分裂观察被引量：3
- 2004年
- 在28℃,pH值6.4-6.8的条件下,用Grace培养基辅以20%的标准胎牛血清培养半消化法接种的家蚕晚期胚。原代培养细胞能够长期存活,观察到了家蚕原代培养过程中分化细胞的有丝分裂过程,发现了原代细胞分裂过程中赤道板的异常和染色体分离的异常现象;培养6个月和10个月的原代细胞分裂百分比分别为0.02±0.01和0.35±0.10,原代细胞异常的有丝分裂细胞百分比逐渐减少,分别为8.0±1.6和3.2±1.0。
- 丁裕斌潘敏慧肖仕全陈敏洪锡钧鲁成
- 关键词：家蚕原代细胞有丝分裂体外培养
- 家蚕热休克蛋白HSP90相互作用蛋白的筛选与鉴定
- 2022年
- 【目的】HSP90 是热休克蛋白家族的成员之一,在昆虫的抗逆性和变态发育中发挥重要作用,已有研究表明 HSP90能够促进家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)的增殖,但作用机制尚不清楚。本研究通过鉴定 BmHSP90 的相互作用蛋白,为其促进 BmNPV 增殖的作用机制解析提供参考。【方法】构建连接在 pIZ/V5-His 的BmHSP90;真核过表达载体,在家蚕 BmN-SWU1 细胞中转染 48 h 后,感染 BmNPV 继续培养 48 h 后收集蛋白,保留总蛋白后将这些蛋白均分两管,进行免疫共沉淀,分别用抗 HA 抗体和 IgG 抗体钓取相互作用蛋白,对蛋白胶进行硝酸银染色后,获取差异条带并做质谱分析,将质谱结果与信息分析结合进行候选互作蛋白筛选,并克隆鉴定互作蛋白。通过免疫荧光验证 HSP90 与互作蛋白的共定位情况,并进一步采用免疫共沉淀试验确定其是否存在相互作用关系。【结果】硝酸银染色结果显示,试验组与对照组在 90、70 和 60 kD 附近处存在差异条带,并验证了 90 kD 处的差异条带为诱饵蛋白;将另外两条差异带进行质谱分析,共鉴定到 7 个候选相互作用蛋白,通过分析选择其中两个候选蛋白作后续研究,分别为Tubulin-specific chaperone E(Tbce)和 Golgin subfamily A member 5(Golga5)。BmTbce 的最大开放阅读框长度为 1 728bp,编码 576 个氨基酸,BmGolga5 的最大开放阅读框长度为 1 854 bp,编码 618 个氨基酸;同源比对和系统进化树显示 BmTbce的微管结合结构域(cytoskeleton-associated protein-glycine-rich,CAP-Gly)位于 N 端且在不同物种之间保守性较高,BmGolga5 的跨膜区(transmembrane domain,TMD)位于 C 端,也较为保守;荧光共定位显示 BmHSP90 与 BmTbce 和 BmGolga5在细胞质中发生共定位,并进一步通过免疫共沉淀证明 BmHSP90;和 BmTbce;、BmHSP90;和 BmGolga5;具有相互作用关系。【结论】经过筛选与鉴定,在 BmNPV 感染家蚕细胞的过程中,与家�
- 龙艳碧吴云飞张倩陈鹏潘敏慧
- 关键词：家蚕家蚕核型多角体病毒HSP90
- 家蚕谷光甘肽-S-转移酶GSTe3基因的鉴定及其真核表达被引量：5
- 2010年
- 【目的】谷胱甘肽-S-转移酶(Glutathiones S-tansferases,GSTs)是一类由多基因编码的多功能同工酶超家族,在解毒内源和外源性有毒物质中起着重要作用,家蚕GSTs的研究,可为解析家蚕解毒机制奠定基础。【方法】利用生物信息学和分子生物学方法克隆和分析家蚕GSTe3(BmGSTe3),利用RT-PCR分析该基因在家蚕体内的表达情况,利用重组杆状病毒真核表达系统在sf9细胞中真核表达BmGSTe3。【结果】在家蚕中克隆了家蚕的GSTe3,该基因由5个外显子与4个内含子组成,外显子总长度为512bp,属于昆虫特异的Epsilon家族。BmGSTe3包含N-末端和C-末端2个结构域,N-末端由β-α-β-α-β-β-α共7个结构基序组成,而C-末端则由5个α螺旋构成,在启动子上游2500bp区域内共发现了15个可能的转录调控元件。BmGSTe3的表达具有较高的组织特异性,它只在家蚕血液和头部表达。BmGSTe3在sf9细胞中表达的BmGSTe3蛋白具有较好的GSTs酶活性。【结论】BmGSTe3属于昆虫特异的Epsilon家族,其蛋白具有较好的GSTs酶活性。
- 潘敏慧许湲余泉友刘佳刘迪赵丹红鲁成
- 关键词：家蚕真核表达
- 昆虫Notch信号通路研究进展
- Notch信号通路由中心受体、配体以及下游转录因子与修饰分子构成,在动物组织的发育和器官的细胞命运决定中起着基础性的作用。从1917年在果蝇中发现以来,基于昆虫Notch信号通路的研究一直十分活跃,证实了其在昆虫中主要行...
- 杨曦陈鹏蒋霞潘敏慧鲁成
- 关键词：昆虫NOTCH信号通路发育调控分子机制
- 家蚕微孢子虫milRNAs及其应用
- 本发明公开了家蚕微孢子虫milRNAs及其应用，研究发现milRNA‑4、milRNA‑8、milRNA‑10和milRNA‑12对微孢子虫的增殖有促进作用，milRNA‑1、milRNA‑3和milRNA‑11对微孢子...
- 董战旗潘敏慧郑宁胡丛武鲁成陈鹏
- 文献传递
- 家蚕核型多角体病毒诱导型39K启动子及其重组载体和应用
- 本发明涉及家蚕核型多角体病毒诱导型39K启动子及其重组载体和应用，该启动子是以BmNPV延迟早期基因39K的启动子最优序列作为“母体”启动子，逐步截短分析降低启动子长度，构建重组启动子，仍具有很强的BmNPV诱导启动活性...
- 潘敏慧董战旗鲁成陈鹏曹明亚李海清蒋亚明胡志刚
- 文献传递
- 高效编辑家蚕基因组的Cas9系统及其应用
- 本发明公开了一种高效编辑家蚕基因组的Cas9系统及其应用，该系统包括含有表达Cas9基因的家蚕转基因表达载体和家蚕核型多角体病毒包装含U6启动子调控sgRNA表达的表达框U6‑sgRNA的病毒粒子。以家蚕核型多角体病毒(...
- 潘敏慧董战旗胡志刚陈鹏鲁成
- 文献传递
- BmDPAGT1基因抑制剂在制备抗BmNPV药物中的应用
- 本发明公开了BmDPAGT1基因抑制剂在制备抗BmNPV药物中的应用，我们通过在BmN细胞中敲除和过量表达BmDpagt1基因，证明BmDpagt1基因是BmNPV增殖所必需的；同时，通过构建BmDpagt1基因敲除的细...
- 董战旗潘敏慧李柯洁
