王荣
- 作品数：12 被引量：156H指数：6
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 乙肝病毒表面抗原基因植物表达载体的构建被引量：5
- 1999年
- 报道了将乙型肝炎病毒（ａｄｗ 亚型）表面抗原（ Ｈ Ｂｓ Ａｇ）基因和 Ｈ Ｂ Ａｇ 及其前导序列（ Ｈ Ｂｓ Ａｇ＋ｐｒｅ Ｓ１＋ ｐｒｅ Ｓ２）基因分别插入植物表达载体 ｐ Ｒｏ Ｋ Ｉ Ｉ的 Ｃａ Ｍ Ｖ３５ Ｓ启动子下游，构建为重组质粒ｐ Ｒ Ｈ Ｂ和ｐ Ｒ Ｐ，并将其分别导入农杆菌 Ｌ Ｂ Ａ４４０４
- 赵春晖冯斌王关林王荣田波
- 关键词：植物表达载体
- 协同凝集试验快速诊断葡萄扇叶病毒被引量：9
- 1992年
- 本文描述一个新的试验方法,即协同凝集试验,用于检测葡萄扇叶病毒(GFV)。检出OFV 的最低浓度为4ng/ml,其灵敏度与 ELISA 检测病毒水平相当,而且更简便、快速。
- 蔡文启刘宏迪黄德来王荣莽克强
- 关键词：葡萄扇叶病毒协同凝集试验
- 通过表达ACC脱氨酶基因控制番茄果实的成熟被引量：36
- 1998年
- 乙烯在跃变型果实的成熟过程中起着触发呼吸跃变和促进果实成熟的作用。细菌来源的１氨基环丙烷１羧酸（ＡＣＣ）脱氨酶能降解乙烯的直接前体ＡＣＣ，从而抑制植物体内乙烯的合成。我们用ＰＣＲ方法从假单孢杆菌中克隆到ＡＣＣ脱氨酶基因并通过农杆菌介导的方法将其转入番茄（Ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｕｎｅｓｃｕｌｅｎｔｕｍ）中。再生植株经Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ检测证明，ＡＣＣ脱氨酶基因已整合到番茄基因组中并稳定表达。转基因番茄果实成熟期的推迟时间与体内乙烯的抑制程度有相关性。转基因番茄植株乙烯的合成降低８０％左右，果实在离体条件下可保鲜７５ｄ左右。研究ＡＣＣ脱氢酶基因在植物体内的作用可阐明高等植物体内乙烯的作用机理并为培育耐贮藏果蔬品种打下基础。
- 宋俊岐邱并生王荣贺焰赵长生田波
- 关键词：番茄
- 含与不含前导序列的乙肝病毒表面抗原在转基因番茄中表达的研究
- 赵春晖王荣赵长生王关林田波
- 将携带有乙型肝炎病毒(adw亚型)表面抗原(HBsAg) 基因和HBsAg及其前导序列(HBsAg+preS1+preS2) 基因的植物表达载体pRoKII，分别导入农杆菌LBA4404中，通过叶盘转化法得到转基因番茄及...
- 关键词：
- 关键词：乙肝病毒表面抗原基因表达转基因番茄
- 番茄氨基环丙羧酸合酶5'端的顺式调控元件分析
- 1999年
- 氨基环丙羧酸(ACC)合酶基因的LE-ACC2克隆具有成熟果实特异表达和乙烯诱导表达的特点.完成了2.0 kb区段的全序列测定,并用改进的DNaseⅠ法对该基因5’端2.0 kb区段进行系列缺失.通过转基因植物和基因瞬间表达系统对ACC合酶基因5’端的结构和功能进行了分析.对含5种不同缺失片段的转基因番茄的果实、叶片、茎组织中的GUS活性组织检测表明,5种片段均能特定地在成熟果实中激活下游基因的表达.-80～+183区段含有果实成熟特异表达的关键顺式调控元件.-246～80,-1879～1160区段对ACC合酶基因的表达具有增强作用,-11 60～-246区段对ACC合酶基因的表达具有抑制作用.-1879～-585含有非成熟果实和成熟果实中ACC合酶基因的乙烯反应性区域.
- 宋俊歧王荣张永清赵长生赵春晖田波
- 关键词：番茄顺式调控元件
- 葡萄病毒的分离及其间接酶联免疫试验检测
- 1989年
- 从表现扇叶和叶肉褪绿斑驳症状的先锋、葡萄园皇后和北醇的杂交单株中分离到3个病毒分离物。它们在昆诺藜、苋色藜、千日红和菜豆上表现的症状与国外扇叶病毒分离物相似。
- 蔡文启郭德银徐绍华王荣
- 小球藻NADP-谷氨酸脱氢酶的cDNA克隆及转基因烟草分析(英文)被引量：2
- 2002年
- 用RT_PCR方法从小球藻 (Chlorellasorokiniana)中克隆了铵诱导表达的以辅酶Ⅱ为辅基的谷氨酸脱氢酶(NADP_GDH)基因的cDNA片段 ,DNA测序分析表明与已报道的该基因cDNA序列同源性为 94%。将NADP_GDH基因先插入到SPDK6 2 1质粒的 2CaMV35S启动子和Ω增强序列之后 ,然后将 2CaMV35S_Ω_GDH_NOS表达单元构建到RokⅡ质粒的HindⅢ与EcoRⅠ之间 ,从而获得高效植物表达载体。将RokⅡ_GDH质粒转移到根癌土壤杆菌(Agrobacteriumtumefaciens (SmithetTownsend)Conn)EHA10 5中 ,对烟草 (NicotianatabacumL .)进行转化并得到阳性转化后代。对转基因烟草分析表明 ,在低氮培养基或在低氮蛭石中其生长速度和叶片数明显高于对照 ;铵毒性实验表明 ,无论在低铵或高铵条件下 ,接种在MS固化培养基上的转基因绿叶圆片存活时间长 ,叶绿素含量高。这些结果说明外源NADP_GDH增强了植物对氮素的吸收和利用。另外 ,转化后代还表现了对除草剂膦化麦黄酮 (PPT)具有较强的抗性 ;培养在含有不同浓度PPT的MS固化培养基上的转基因绿叶圆片 ,其愈伤化程度明显高于对照 ;在MS培养基中用 0 .5 μg/mL的PPT可以代替卡那霉素对转化后代进行筛选 ,这暗示NADP_GDH基因可以作为一种新的选择标记用于植物基因工程的研究。
- 黄国存孟颂东王荣杨怀义田波
- 关键词：谷氨酸脱氢酶转基因烟草氮素吸收
- 电融合产生黄瓜花叶病毒的单克隆抗体被引量：2
- 1989年
- 用提纯的黄瓜花叶病毒(CMV)种传SS-30株和豇豆株(P株)混合免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0,用BAEKON 2000基因转移仪使其融合。通过2—3次简易、快速的有限稀释,获得6个能持续分泌抗体的杂交瘤细胞株,所获抗体分属IgG和IgG_(2a),并能诱导高滴度腹水抗体。间接ELISA试验证明这些单克隆抗体对种传CMVSS-30株、P株和非种传CMV的黄化、日本、山东、香蕉、向日葵和Q等分离物有特异性反应,与C_((?))分离物的反应性较弱,而对花生矮化病毒(PSV)无交叉反应。利用间接ELISA测定了几个单克隆抗体的亲和力常数。单克隆抗体C_7H_3、A_6H_4与G_4G_3、G_4H_3所抗的抗原决定簇相距较远,而C_7H_3与A_6H_4,G_4G_8与G_4H_5为抗同一抗原决定簇的单克隆抗体。
- 蔡文启王荣覃秉益马顺福田波张成良陈京季良
- 关键词：黄瓜花叶病毒电融合单克隆抗体
- 苹果褪绿叶斑病毒和茎沟病毒的鉴定提纯和酶联法检测被引量：36
- 1992年
- 苹果褪绿叶斑病毒(CLSV)和茎沟病毒(SGV)是感染苹果和其它果树的两种重要潜隐病毒。根据生物学特性和血清学反应,确定 W-55分离物属于 CLSV,W-29分离物属于 SGV。采用皂土澄清,PEG 6000沉淀及超离心等步骤,得到部分提纯的病毒。经电镜观察,W-55和W-29病毒颗粒长度分别为800 nm 和650nm。用 CLSV W-55分离物制备的兔抗血清效价为1/3200,用 SGV PV-71(ATCC)分离物制备小鼠腹水抗体效价为1/800,均用间接 ELISA 法测定。对感染 CLSV 和 SGV 的昆诺藜、苹果叶和花瓣检测结果表明,P/N 值具有显著性。本工作为苹果无毒苗木的生产提供了快速、灵敏的病毒检测手段。
- 王小凤李秋波王荣洪霓王国平刘福昌
- 关键词：茎沟病毒苹果褪绿叶斑病毒
- 葡萄扇叶病毒的分离、鉴定、提纯及血清学研究被引量：28
- 1990年
- 从表现扇叶和叶肉褪绿斑驳症状的先锋、葡萄园皇后和北醇的杂交单株中分离到3个与国外扇叶病毒(GFV)DIL分离物相似的GFY-DIL类似物。它们在昆诺藜、苋色藜、千日红和菜豆上表现症状。提纯病毒颗粒为直径约30nm的球形颗粒。在免疫双扩散试验中均与扇叶病毒抗血清形成完全融合的沉淀线。免疫电镜下病毒颗粒受扇叶病毒抗血清的修饰。利用三种间接异种动物抗体双夹心法和金黄色葡萄球菌蛋白A夹心酶联免疫吸附试验(PAS—ELISA)从感病的葡萄植株或组培苗叶片中检测了GF。间接异种动物抗休双夹心法能检测提纯GFV的最低浓度为1.6ng—8ng/ml。春季的芽和幼叶为合适的检测器官。
- 蔡文启郭德银徐绍华王荣莽克强
- 关键词：葡萄扇叶病毒提纯血清学
