罗克明
- 作品数：6 被引量：120H指数：6
- 供职机构：西南农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金国家转基因植物研究与产业化专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 棉花PTS2受体基因(GhPex7)的克隆及表达分析被引量：9
- 2003年
- 利用cDNA AFLP差异片段F0 10 ,通过RACE延伸、EST检索等方法获得了一个棉花过氧化物酶体定位信号2受体蛋白基因 (peroxisomaltargetingsignaltype 2receptor,GhPex7p)的编码序列。该cDNA包含一个 95 4bp的开放阅读框 ,编码 317个氨基酸 ,推测其等电点为 5 6 0 3。同源性分析表明 :推测GhPex7与拟南芥、酵母、果蝇、小鼠和人的Pex7p基因存在序列相似性 ,其中与拟南芥的同源性最高 ,为 83% ,并具有 3段WD 4 0蛋白家族的保守域 ,与拟南芥AtPex7的编码蛋白同类。Southern杂交结果表明该基因在陆地棉基因组中存在两个拷贝。Northernblotting和RT PCR分析表明该基因在棉花根、茎、叶、花、胚珠和纤维中均表达 ,但茎、叶组织中的表达水平明显高于胚珠和纤维。
- 李德谋肖月华罗明侯磊罗小英罗克明裴炎
- 关键词：棉花RACE
- 棉花Lea蛋白D-113基因启动子的克隆及序列分析被引量：25
- 2002年
- 为研究植物Lea (lateembryogenesisabundant)蛋白基因启动子在种子中的特异性表达 ,通过PCR扩增 ,从棉花(Gossypiumhirsutumcv .Coker312 )中克隆了Lea蛋白基因家族中D - 113基因上游 10 2 4bp的调控序列。DNA序列分析结果表明 ,该片段与已报道的Lea蛋白基因同一家族该基因的对应序列同源性达 90 %以上。将该启动子序列与GUS基因融合 ,构建成表达载体后 ,通过基因枪轰击导入到经ABA诱导处理的棉花胚性愈伤组织和油菜种子以及棉花的根、茎、叶中 ,组织化学分析结果表明 ,D - 113基因启动子在胚中特异性表达。
- 罗克明郭余龙肖月华侯磊裴炎
- 关键词：启动子分析棉花克隆
- 利用Y-RACE法进行棉花胚珠cDNA末端快速扩增被引量：6
- 2002年
- 在YADE(Y shapedadaptordependentextension)方法的基础上 ,设计了一种新的cDNA末端快速扩增方法 ,称为Y RACE法 .利用该方法只需一次cDNA合成就能进行多个基因的 3′和 5′末端的扩增 .分别利用Y RACE方法和RACE试剂盒 (TaKaRa)扩增了一个棉花胚珠cDNA片段F0 2 7的末端序列 .序列比较表明 ,用Y RACE方法扩增的末端序列较试剂盒所得序列在最末端稍短 ,但同样能进行正确拼接并获得全长编码序列 .对Y RACE法的优缺点和可能的改进作了进一步讨论 .
- 肖月华罗明方卫国罗克明侯磊罗小英裴炎
- 关键词：棉花胚珠CDNA末端快速扩增
- 棉花类LRR抗病蛋白(GhLRR-RL)基因的克隆及表达分析被引量：21
- 2002年
- 从棉花胚珠的cDNA AFLP片段中 ,选取一个与拟南芥类LRR抗病蛋白 (LRR RL)序列相似的片段 ,用RACE方法延伸其 3′和 5′未知序列 ,得到一个棉花类LRR抗病蛋白的全长cDNA序列 (GenBank登录号 :AY0 4 0 5 32 )。该cDNA长 12 5 9bp ,包含一个 987bp的开放阅读框 ,具有Poly(A)加尾信号。推测的蛋白质包含 32 8个氨基酸 ,其中大部分是LRR区 ,其序列符合膜外LRR的共有序列LXXLXXLXXLXLXXNXGXIPXX。序列和结构比较分析表明 :该棉花LRR RL蛋白与拟南芥的两个类LRR抗病蛋白高度同源 ,而与植物的其他LRR蛋白结构不同 ,推测LRR RL蛋白属于一类新的LRR蛋白。斑点杂交和 3′RACE扩增表明 ,棉花LRR RL基因具有组成性表达的特点。
- 肖月华罗明侯磊罗克明罗小英裴炎
- 关键词：棉花
- 高效液相色谱法分离纯化小皱蝽抗菌肽AMP-1被引量：15
- 2001年
- 用昆虫生理盐水浸提小皱蝽成虫 ,浸提液冻干后 ,酸提取法制备粗提液 ,固相萃取 (SPE)初分级分离 ,活性洗脱组分反相高效液相色谱 (RP -HPLC)纯化 ,进一步凝胶渗透色谱 (GPC)及反相高效液相色谱 (RP -HPLC)纯化 ,分离得到一抗菌肽 ,茚三酮反应黄色 ,命名为AMP - 1。在 190nm～ 2 2 5nm短波紫外区 ,AMP - 1有紫外吸收。
- 杨泽宏杨星勇袁小红罗克明罗小英张永军郭余龙裴炎
- 关键词：抗菌肽纯化HPLC
- 利用YADE法进行棉花基因组PCR步行被引量：48
- 2002年
- 设计了一种依靠“Y”形接头延伸未知序列的方法 (YADE ,Y shapedAdaptorDependantExtension) ,成功地抑制了在未知序列扩增中的单引物扩增。用这种方法从棉花基因组中扩增了一个棉花胚珠cDNA片段F0 2 7的相邻序列———F0 2 7S和F0 2 7A。重叠分析表明 ,F0 2 7S与F0 2 7有 10 4bp的重叠 ,F0 2 7A与F0 2 7有 175bp的重叠。两个延伸片段分别含有 1和 3个可能的内含子 ,内含子均具有保守的边界序列GT -AG和与哺乳动物类似的分枝点序列。还对YADE法扩增未知序列的优缺点和可能的改进作了进一步讨论。
- 肖月华罗明方卫国罗克明侯磊罗小英裴炎
- 关键词：棉花基因组
