薛冲
- 作品数:58 被引量:156H指数:6
- 供职机构:军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生化学工程轻工技术与工程更多>>
- 一种具有促增长作用的融合蛋白及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种具有促进机体增长作用的融合蛋白及其编码基因与应用。其目的是提供一种具有促进机体增长作用的融合蛋白及其编码基因与其在制备儿童及成人生长激素缺乏症治疗性药物中的应用。该融合蛋白的氨基酸残基序列如SEQ ID ...
- 刘志敏王楠赵洪亮薛冲张伟熊向华杨秉芬姚学勤
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- 一种具有抗肿瘤作用的融合蛋白及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种具有抗肿瘤作用的融合蛋白及其编码基因与应用。本发明所提供的融合蛋白的氨基酸残基序列如序列表中的SEQ ID NO:5所示。本发明的具有抗肿瘤作用的融合蛋白可作为预防和/或治疗由人乳头瘤病毒感染引起的适应症...
- 刘志敏张士猛赵洪亮薛冲张伟黎明熊向华
- 文献传递
- 一种具有抗肿瘤作用的融合蛋白及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种具有抗肿瘤作用的融合蛋白及其编码基因与应用,其目的是提供一种具有抗肿瘤作用的融合蛋白及其编码基因与以该融合蛋白为活性成分的预防和/或治疗由人乳头瘤病毒感染引起的肿瘤疫苗。该融合蛋白是具有序列表中的SEQ ...
- 刘志敏张士猛赵洪亮薛冲张伟黎明熊向华
- 文献传递
- 干扰素与转铁蛋白融合蛋白在毕赤酵母中的表达及鉴定被引量:3
- 2005年
- 利用重叠PCR技术将干扰素(interferon,IFN)基因与转铁蛋白N端半分子(transferrinN-terminalhalf-molecule,TFN)基因在体外融合,融合基因和单独的TFN基因分别克隆至真核表达载体pPIC9中,转化毕赤酵母GS115,得到的转化子经诱导表达后在发酵上清中均获得了表达.经SPSepharoseFastFlow阳离子交换层析、PhenylSepharoseFastFlow疏水层析纯化,获得了纯度大于93%的重组融合蛋白IFN-TFN和纯度大于95%的重组TFN样品.生物活性实验证明融合蛋白IFN-TFN具有抗病毒活性.铁饱和实验证明融合蛋白IFN-TFN和单独的TFN具有相同的铁结合能力.因而TFN可望作为IFN的天然运输载体.
- 李晓静张豪薛冲李彦英陈璟苗林方宏清陈惠鹏
- 关键词:转铁蛋白干扰素-Α毕赤酵母
- 高比活人睫状神经营养因子突变体基因的构建及其在巴斯德毕赤酵母中的表达
- 2005年
- 人睫状神经营养因子(hCNTF)及其突变体有望成为治疗肥胖症的新型药物。为了减少hCNTF的副反应,提高其疗效,在hCNTF四重突变体AX15 (R13K)的基础上引入S16 5D Q16 6H突变,构建了高比活的DH_AX15 (R13K)突变体。体外和体内实验表明DH_AX15 (R13K)的活性约是AX15 (R13K)的5倍。同时体内实验还发现DH_AX15(R13K)的作用比AX15 (R13K)更为持久。这种更为持久的作用可能是由于活性提高而非半衰期延长引起的。高比活的hCNTF突变体一方面可以在保证疗效的前提下减少蛋白用量,减少副反应;另一方面可以在不增加副反应的前提下增加最大耐受剂量,提高疗效。
- 赵洪亮薛冲熊向华张伟刘志敏
- 关键词:睫状神经营养因子巴斯德毕赤酵母
- 限制酶介导整合技术:一种克隆新基因的新策略被引量:1
- 2009年
- 限制酶介导整合(REMI)技术是近年发展起来的一种研究新基因的方法,已被用于盘基网柄菌、酵母和丝状真菌等微生物细胞与发育过程的研究。结合质粒拯救技术,可快速分离质粒两侧未知的基因组DNA序列,进而对该序列做进一步分析和研究。我们简要介绍了REMI技术的基本原理、影响因素、缺点及其应用。
- 姚学勤薛冲刘志敏
- 关键词:限制性内切酶线性质粒新基因克隆
- 人血清白蛋白-干扰素融合蛋白及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种人血清白蛋白-干扰素融合蛋白及其编码基因与应用。该蛋白是由序列表中序列1的氨基酸残基序列组成的蛋白质;本发明还公开了所述的人血清白蛋白-干扰素融合蛋白的编码基因,其核苷酸序列是序列表中序列2;本发明的融合...
- 刘志敏赵洪亮薛冲
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- 毕赤酵母醇氧化酶1启动子突变体的分离与鉴定被引量:2
- 2008年
- 目的:通过醇氧化酶1启动子突变,筛选毕赤酵母高水平表达菌株。方法:通过致错PCR构建醇氧化酶1启动子突变体,经酶切连接到改造过的质粒HSA-pPIC9上,转化毕赤酵母GS115感受态细胞,摇瓶培养表达筛选人血清白蛋白(HSA)高表达突变体菌株。结果:克隆测序结果表明,突变的醇氧化酶1启动子-910和-569位点处共2个碱基发生了T→C突变;获得一株高表达菌株,摇瓶中HSA的表达量由200 mg/L提高到335 mg/L。结论:通过醇氧化酶1启动子突变成功构建了HSA高表达菌株。
- 熊向华赵洪亮薛冲王洋陈惠鹏刘志敏
- 关键词:毕赤酵母人血清白蛋白
- 一种信号肽及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种信号肽及其编码基因与应用。该信号肽其氨基酸序列为序列表中序列1。本发明还公开了编码所述多肽的DNA分子。所述DNA分子的核苷酸序列为序列表中序列2。所述多肽和所述DNA分子可在生产蛋白中的应用。本发明还公...
- 刘志敏何庆赵洪亮薛冲
- 文献传递
- 分子伴侣及信号肽对毕赤酵母中分泌蛋白表达水平的影响被引量:2
- 2013年
- 目的:探索定位于细胞质、内质网膜及内质网腔中的分子伴侣及其组合对于带有不同信号肽的胞外β-1,3-葡聚糖酶(EXGl)在巴斯德毕赤酵母GS200中表达水平的影响。方法:通过融合PCR技术分别构建带有酵母a交配因子引导肽序列(仅MF)、酵母仅交配因子信号肽序列(ccPre)和重链结合蛋白(Bip)信号肽序列的报告蛋白EXGl的表达质粒pPIC9-EXG1,同时构建分子伴侣基因及其组合的表达质粒pBLArg-IV,然后将2种重组质粒共转化至毕赤酵母宿主菌GS200,转化子经筛选获得共表达菌株,通过测定EXG1酶活来评价分子伴侣与信号肽对其表达水平的影响。结果:细胞质及内质网膜上的分子伴侣Sec61a、Sec61B及胞质中的分子伴侣Ydjl、Ssal、Hsp104及其组合对各种信号肽引导的报告蛋白EXG1的表达水平没有显著影响。然而,内质网腔中的分子伴侣Bip、EroI、PDI与HacI组合能显著提高报告蛋白EXG1的表达水平,其中,以aMF或ctPre作为信号肽引导的报告蛋白EXG1的表达水平分别提高了2.6倍和3.8倍,以Bip信号肽引导的报告蛋白EXGl的表达水平提高了20%~45%,而对于以EXG1自身信号肽引导的报告蛋白EXG1的表达水平没有显著影响。结论:在酵母表达体系中,内质网腔中的分子伴侣是报告蛋白EXG1表达水平的重要影响因素.但分子伴侣对于信号肽的选择性还须进一步证明。
- 杜济良赵洪亮薛冲任敏刘志敏
- 关键词:分子伴侣信号肽蛋白表达巴斯德毕赤酵母