郭立新
- 作品数:35 被引量:194H指数:9
- 供职机构:宁波出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金:国家质检总局科技计划项目国家科技支撑计划宁波出入境检验检疫局科研基金项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 扁浒苔的检测试剂盒及检测方法
- 本发明公开了扁浒苔的检测试剂盒及检测方法,该检测试剂盒包括10×PCR反应缓冲液,MgCl<Sub>2</Sub>溶液,dNTP溶液,TaqDNA聚合酶溶液,正向引物和反向引物,它们的体积比为2.5:1.5:2:0.2:...
- 段维军郭立新朱水芳陈先锋
- 文献传递
- 扁浒苔PCR快速检测方法研究被引量:4
- 2012年
- 扁浒苔(Ulva compressa)能够导致绿潮灾害,对其开展快速检测技术研究是预防和控制其危害的重要技术手段。根据石莼属不同种类核糖体基因转录间隔区域(ITS)的序列设计了一对检测扁浒苔的特异性引物,并对其反应条件和体系进行了优化。PCR特异性检测结果表明,供试扁浒苔均扩增出与预期大小相一致的330 bp产物,而对缘管浒苔(Ulva linza)、浒苔(U.prolifera)、曲浒苔(U.flexuosae)、孔石莼(U.pertusa)的检测结果全为阴性。PCR灵敏度试验表明,该PCR体系最低可以检测到10 pg的扁浒苔DNA模板。本快速检测方法为扁浒苔的早期识别与有效治理提供了科学依据,对相关扁浒苔产业和生态学等研究也具有一定参考意义。
- 段维军郭立新陈先锋朱水芳朱文荣
- 关键词:PCR
- 基于COI基因分析的植物病原性轮枝菌条形码评价被引量:2
- 2013年
- 数以百万计的真菌种类对真菌识别构成了巨大的挑战。本研究以轮枝菌属中的重要植物病原性轮枝菌及其近似种共13种34个菌株为材料,探讨COI基因作为该属DNA条形码的可能性。结果表明,该DNA片段不存在内含子,PCR扩增与测序成功率较高,但部分测试菌种的COI基因存在种内差异大于种间差异的情况,种间和种内距离存在交叉重叠,序列鉴定成功率为73.5%,难以达到便捷、准确鉴定植物病原性轮枝菌种类的目的。因此,COI基因不宜作为植物病原性轮枝菌的DNA条形码。
- 段维军郭立新顾建锋张慧丽张祥林夏侯阳陈先锋
- 关键词:轮枝菌DNA条形码
- 迟钝爱德华氏菌FimA基因的克隆及序列分析被引量:5
- 2006年
- 以迟钝爱德华氏菌Et、XA、EA分离株的DNA为模板,采用PCR技术,扩增菌毛亚基(FimA)基因的DNA片段,将其克隆到pMD18-T载体上。通过序列测定,分析结果表明:Et、XA、EAFimA基因由534个核苷酸组成,编码177个氨基酸。Et、XA、EA之间FimA基因核苷酸同源性为99%,与其它分离物核苷酸同源性为76%~77%,氨基酸同源性为81%~82%。
- 郭立新李寿崧江树勋陈文炳邵碧英杨婕
- 关键词:迟钝爱德华氏菌克隆
- 一种单粒向日葵种子上向日葵茎溃疡病菌的检测方法和试剂
- 本发明公开了一种单粒向日葵种子上向日葵茎溃疡病菌的检测方法和试剂,采用一对向日葵茎溃疡病菌的特有引物进行目标基因片段的扩增及一条可与模板互补配对的荧光探针进行检测,提高了特异性,有效地避免假阳性和假阴性;检测时无需对向日...
- 段维军郭立新段丽君陈先锋
- 文献传递
- 木质包装中松材线虫的实时荧光PCR检测被引量:4
- 2011年
- 松材线虫是进境木质包装中的重要检疫对象之一。本研究以进境木质包装中截获的12种伞滑刃属线虫,包括4种不同来源的松材线虫、3种不同来源的拟松材线虫、豆伞滑刃线虫、大尖尾伞滑刃线虫、阿苏里伞滑刃线虫、伯氏伞滑刃线虫及拟小刺伞滑刃线虫为材料,进行实时荧光PCR检测。结果显示,仅松材线虫可观察到明显的荧光强度变化,而其他线虫的荧光强度没有变化。通过研磨样品的方法,提取单条松材线虫的DNA,进行实时荧光PCR试验,检测成功率为100%,且不论是雄虫、雌虫或幼虫均能检测出来。该研究对于我国口岸进境木质包装中松材线虫的检测具有一定的实际意义。
- 郭立新段维军顾建锋闻伟刚黄海泉
- 关键词:松材线虫实时荧光PCR
- 食用油中增塑剂溶出的原因分析及风险预测被引量:15
- 2012年
- 通过对市场上销售的食用油样品中邻苯二甲酸酯类(PAEs)物质的检测,发现塑料桶装的食用油均有不同程度的PAEs检出,从而对增塑剂溶出的原因进行了分析和验证,并对可能存在的质量安全风险进行分析预测。
- 徐颖郭立新蔡曹盛
- 关键词:食用油增塑剂
- 逆转录环介导等温扩增技术检测菜豆荚斑驳病毒被引量:3
- 2013年
- 菜豆荚斑驳病毒(Beanpodmottlevirus,BPMV)可危害大豆、菜豆等豆科植物,造成品质和产量下降。目前,检测BPMV主要采用DAS-ELISA技术及基于RT.PCR的分子生物学方法。近年来开发的环介导等温扩增(100p—mediatedisothermalamplifi—cation,LAMP)是一种新的核酸扩增技术,该技术依赖于能够识别靶序列上6个特异区域的引物和1个具有链置换特性的DNA聚合酶(BstDNApolymer-ase),在等温条件下高效扩增靶基因,
- 郭立新段维军徐亚飞刘永丰张吉红
- 关键词:菜豆荚斑驳病毒环介导等温扩增分子生物学方法ELISA技术核酸扩增技术DNA聚合酶
- 应用逆转录环介导等温扩增技术检测大豆种子中烟草环斑病毒被引量:3
- 2012年
- 根据烟草环斑病毒(TRSV)外壳蛋白基因序列设计并合成了1组RT-LAMP引物,利用实时浊度仪监测反应过程,初步建立了烟草环斑病毒的RT-LAMP检测方法,并进行了特异性与灵敏度检测。结果显示,RT-LAMP灵敏度与普通RT-PCR法相当,但检测时间明显缩短,1 h即可完成反应。此外,体系中加入钙黄绿素,反应结束后,可通过裸眼观察荧光的有无来判断是否有扩增。对大豆种子中携带的烟草环斑病毒进行了RT-LAMP检测,裸眼判定与仪器监测结果一致。结果证明所建立的TRSV RT-LAMP方法具有快速、特异、灵敏,操作简单的特点,不需复杂仪器设备,适合于TRSV的现场快速检测。
- 郭立新陈先锋徐亚飞邱志君朱迪琦段维军
- 关键词:烟草环斑病毒
- 葡萄茎枯病菌生物学特性及室内药剂筛选研究被引量:4
- 2014年
- 葡萄茎枯病菌是一种适生性十分广泛的检疫性真菌,国内尚未有发生为害报道。2012年宁波检验检疫局全国首次从进境意大利苹果种苗中截获了该病菌,为探索有效检疫处理和病菌防治手段,对该菌生物学特性和防治药剂室内筛选开展了研究。结果表明,葡萄茎枯病菌在供试PDA、OA、MEA、V8、H、CMA培养基上10~30℃条件下均可生长,35℃生长受到完全抑制,以在PDA培养基上25℃条件下生长速度最快。供试菌株对pH值适应范围较广,pH值4~11条件下均可生长,以pH值为8时生长最快。室内药剂筛选试验表明50%速克灵可湿性粉剂等7种药剂处理对病原菌菌落生长抑制率达100%,22.7%二氰蒽醌悬浮剂等12种药剂处理,对病原菌分生孢子萌发抑制率为100%。
- 郭立新段丽君段维军陈先锋
- 关键词:生物学特性