钟登科
- 作品数：49 被引量：96H指数：6
- 供职机构：上海农林职业技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生文化科学生物学更多>>
- 裂谷热病毒Gn蛋白主要抗原区的表达、纯化及抗原性分析被引量：2
- 2015年
- 目的通过原核表达系统制备裂谷热病毒Gn片段主要抗原区蛋白,获取纯化蛋白,并分析抗原性。方法将合成的裂谷热Gn基因用PCR的方法扩增具有保护性抗原表位的两段Gn1和Gn2,并将其定向插入原核表达质粒pColdⅠ中,构建重组表达质粒pColdⅠ-Gn1和pColdⅠ-Gn2,并将重组质粒转化到BL21(DE3)感受态中,以IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达蛋白和表达量,并利用His-tag Ni柱进行亲和层析纯化,Western-blot鉴定表达蛋白。结果所构建的质粒pColdⅠ-Gn1和pColdⅠ-Gn2序列正确,SDS-PAGE检测到目的蛋白,Western-blot显示截断的Gn蛋白具有很好反应原性。结论成功纯化了裂谷热病毒Gn主要抗原区的表达蛋白。
- 夏鹏魏建超陆莹梅武专昌李蓓蓓刘珂邵东华邱亚峰钟登科温贵兰马志永
- 关键词：原核表达蛋白纯化
- 中华按蚊源日本脑炎病毒的分离鉴定及其分子特征的分析被引量：3
- 2017年
- 为了解上海市蚊源日本脑炎病毒(JEV)的分子特征,2014年从上海市嘉定区猪场采集蚊媒样品1万余份,采用BHK21和C6/36细胞培养法进行病毒分离,通过RT-PCR和IFA技术对分离株进行鉴定。结果表明,分离到1株JEV,命名为JD-15,源自中华按蚊。用JD-15株分别感染BHK21和C6/36细胞,72 h后所有细胞均发生明显病变(CPE),其细胞半数感染量(TCID50)为1.96×106PFU。用分离株JD-15脑内接种3周龄乳鼠,结果测得半数致死量(LD50)为4.2×101PFU,表明该毒株具有较强的神经毒力。对JD-15株的E基因进行克隆测序及进化分析,结果显示,该株JEV属于基因Ⅲ型,与减毒活疫苗株SA-14-14-2的E基因核苷酸序列的同源性为98.1%,氨基酸序列的同源性为97.5%。本研究为乙型脑炎的流行病学调查提供了科学依据,对上海市蚊虫及蚊媒病的防治具有重要意义。
- 刘茜倩魏建超钟登科吴亚玲石坤张克龙陆美林肖长广李蓓蓓刘珂邵东华邱亚峰石元元马志永范红结
- 关键词：日本脑炎病毒进化分析
- 蛋鸡群发生马立克氏病继发H9亚型禽流感的诊治被引量：13
- 2008年
- 马立克氏病是一种重要的免疫抑制病,严重影响养鸡业的健康发展。通过对一例发生马立克氏病继发H9亚型禽流感的蛋鸡群的症状进行分析、剖检变化及实验室诊断,提出了治疗和预防措施,为马立克氏病和H9亚型禽流感的防治提供参考。
- 钟登科魏建超张训海路振香
- 关键词：马立克氏病H9亚型禽流感继发感染
- 鸭疫里氏杆菌的分离鉴定及药敏试验被引量：8
- 2008年
- 从安徽省某养鸭场送检疑似鸭传染性浆膜炎的发病鸭中分离到3株细菌,通过细菌形态、培养特怔、生化试验和血清学试验鉴定为1型鸭疫里氏杆菌,给健康鸭注射该分离株可复制出心包炎、肝周炎、气囊炎等典型病理变化并引起死亡。药敏试验结果表明,3株分离细菌对头孢曲松、复方新诺明高度敏感,对红霉素、四环素、氯霉素中度敏感,对庆大霉素、丁胺卡那、卡那霉素、新霉素、氨苄青霉素、青霉素、环丙沙星不敏感。本研究为该场鸭传染性浆膜炎的防治提供了参考。
- 钟登科魏建超张训海路振香金光明王立克
- 关键词：鸭疫里氏杆菌药敏试验
- 不同禽源副黏病毒分离株F基因的克隆与序列分析被引量：1
- 2010年
- 分别对鸡源、鸭源、鹅源新城疫病毒（NDV）强毒分离株（WF00C、WF00D、WF00G）的F基因进行RT-PCR扩增、克隆和序列测定,并对其核苷酸和推导氨基酸序列进行分析。结果表明,各分离株F基因均含1个完整的开放阅读框（ORF）,全长为1 662 bp,编码553个氨基酸,有6个潜在的糖基化位点,裂解位点区的氨基酸序列均为112R-R-Q-K-R-F117,与强毒株特征相符,具有第101位的K（赖氨酸）和121位的V（缬氨酸）,符合基因Ⅶ型NDV特征;WF00C株有13个半胱氨酸（Cys）残基,WF00D株和WF00G株各有12个Cys残基;在限制性内切酶（RE）位点（nt334~1 682）的分布上,3个毒株均存在多数鹅源分离株特有的973 nt和1 249 nt RsaⅠ位点;WF00D株与WF00C株、WF00G株以及GenBank的15株各基因型代表株的F基因编码区同源性进行比较,其核苷酸序列同源性为84.7%~99.3%,推导的氨基酸序列同源性为88.4%~98.9%;3个分离株间的同源性较高,其与ZJ1、SF02和NA_1等鹅源毒株之间差异较小,而与LaSota、F48E9等毒株之间差异明显。根据NDV系统发育进化树、酶切位点分析以及基因分型结果,证明它们的基因型均为Ⅶd亚型。
- 王旋黄兵张训海于可响钟登科宋敏训龚争赵磊
- 关键词：新城疫病毒F基因
- 日本脑炎病毒弱毒疫苗株全长cDNA的体外合成及恢复病毒的拯救被引量：1
- 2014年
- 将病毒的全基因组分成3个重叠的区段分别扩增出来,把这3个片段连接到载体中。以这3个片段为模板,通过融合PCR方法,获得JEV的全长cDNA。以cDNA为体外转录的模板,体外转录获得病毒mRNA,转染BHK-21细胞,拯救JEV病毒。通过生物学特性、分子生物学、蛋白水平等几个方面对恢复病毒进行鉴定,并测定恢复病毒的生长曲线和LD50。结果显示,获得了全长cDNA,体外转录获得的病毒RNA转染BHK-21细胞后,二代恢复病毒可引起明显的细胞病变,间接免疫荧光试验和RT-PCR均为阳性。空斑试验表明,拯救病毒与原病毒空斑表型类似;恢复病毒与亲本毒相比在BHK-21细胞上生长更快;恢复病毒的LD50与亲本毒类似。
- 蒋春英魏建超钟登科朱紫祥武专昌史子学邵东华李蓓蓓马志永
- 关键词：日本脑炎病毒全长CDNA体外转录
- 一种犬类导尿模型
- 本实用新型公开了一种犬类导尿模型，其包括公犬导尿模型和母犬导尿模型，公犬导尿模型包括公犬臀部模型壳体，公犬臀部模型壳体内设有公犬膀胱模型，公犬臀部模型壳体上设有第一连接孔，第一连接孔上可拆卸地设有公犬生殖器模型，公犬臀部...
- 滑志民郑江平李尚同王金福赵熤群孙维平战晓燕钟登科尚月丽
- 文献传递
- 一种犬类肢体静脉输血模型
- 本发明公开了一种犬类肢体静脉输血模型，其包括：不锈钢肢体骨架；肌肉层，肌肉层设置在不锈钢肢体骨架上，肌肉层的内部设有若干个静脉血管孔，肌肉层的外表面设有若干个静脉血管槽；若干个静脉血管管路，每个静脉血管孔内可拆卸地安插一...
- 滑志民郑江平李尚同王金福赵熤群孙维平战晓燕钟登科尚月丽
- 文献传递
- 鹅新城疫病毒P基因的RNA编辑及其相关蛋白的分子特征
- 2009年
- 应用RT-PCR方法对鹅新城疫病毒安徽分离株WF00GP基因进行了RNA编辑分析,发现WF00GP基因在保守的编辑位点上插入一个G,使得P基因增加编码V蛋白,而且它的最大ORF的长度为1188 bp,编码395个氨基酸的P蛋白。WF00G株和参考毒株的P基因的同源性和系统发育分析表明,WF00G株与水禽源毒株NA-1、ZJ1、FP1/02、PX2/03、Duck/1/05和SF02等亲缘关系较近,与传统疫苗株或弱毒株HB92、LaSota和Clone30以及F48E9等的亲缘关系相对较远。进一步对其V蛋白羧基端序列分析发现,虽然编辑位点氨基酸序列(132KKG134)和羧基端的5个Cys残基位点是高度保守的,但是V蛋白C末端氨基酸存在较大变异,APMV-1毒株V蛋白羧基端氨基酸的突变呈现"基因型一致性"。
- 钟登科魏建超张训海黄兵于可响路振香王立克
- 关键词：P基因RNA编辑
- 副猪嗜血杆菌病实验室诊断方法研究进展被引量：5
- 2009年
- 钟登科魏建超张训海路振香
- 关键词：副猪嗜血杆菌病规模化猪场细菌性疾病纤维素性浆膜炎
