魏建超
- 作品数：187 被引量：367H指数：10
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学化学工程更多>>
- 裂谷热病毒Gn蛋白主要抗原区的表达、纯化及抗原性分析被引量：2
- 2015年
- 目的通过原核表达系统制备裂谷热病毒Gn片段主要抗原区蛋白,获取纯化蛋白,并分析抗原性。方法将合成的裂谷热Gn基因用PCR的方法扩增具有保护性抗原表位的两段Gn1和Gn2,并将其定向插入原核表达质粒pColdⅠ中,构建重组表达质粒pColdⅠ-Gn1和pColdⅠ-Gn2,并将重组质粒转化到BL21(DE3)感受态中,以IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达蛋白和表达量,并利用His-tag Ni柱进行亲和层析纯化,Western-blot鉴定表达蛋白。结果所构建的质粒pColdⅠ-Gn1和pColdⅠ-Gn2序列正确,SDS-PAGE检测到目的蛋白,Western-blot显示截断的Gn蛋白具有很好反应原性。结论成功纯化了裂谷热病毒Gn主要抗原区的表达蛋白。
- 夏鹏魏建超陆莹梅武专昌李蓓蓓刘珂邵东华邱亚峰钟登科温贵兰马志永
- 关键词：原核表达蛋白纯化
- 猪口蹄疫重组免疫复合肽的制备方法及应用
- 本发明涉及猪口蹄疫重组免疫复合肽的构建方法和应用，属于生物工程技术领域。该免疫多肽佐剂为口蹄疫病毒新型辅助T细胞表位(I－S－I－S－E－I－K－G－V－I－V－H－K－I－E－T－I－L－F)和囊素模拟肽(T－P－N－...
- 陈溥言王臣魏建超曹瑞兵周斌
- 文献传递
- 旋风立体式消毒屋的空间杀菌性能研究
- 2022年
- 出于生物安全考虑,畜禽养殖场人员进场前必须进行严格的病菌消杀,但目前消杀方式对人体有副作用,危害较大。本文利用先进的精控双离子消毒因子发生技术,结合传统的风淋净化除尘设备相结合,开发了一种新型养殖厂入口人员旋风立体式消毒屋,并对设备进行了消杀效果分析。结果表明,消毒屋运行15秒对空气自然菌的杀灭率可达到90%,对空间内枯草芽孢杆菌和畜禽致病性病原菌(金黄色葡萄球菌、猪链球菌、鸡白痢沙门氏菌)的杀灭率可达到99%;消毒屋运行30秒以上对空间内枯草芽孢杆菌和畜禽致病性病原菌(金黄色葡萄球菌、猪链球菌、鸡白痢沙门氏菌)的杀灭率可达到99.9%,符合空气消毒机通用卫生要求中现场试验测试要求,具有很强的病菌消杀效果和应用价值。
- 赵健魏建超管志欣诸华杰李宗杰
- 关键词：畜禽养殖细菌杀灭率消毒因子
- 人源抗菌肽LL-37在毕赤酵母中的高效表达及其活性检测被引量：15
- 2008年
- 根据GenBank CAA86115中的LL-37氨基酸序列,选择毕赤酵母偏好密码子,采用SOE方法合成了人源抗菌肽LL-37基因。所合成的LL-37基因全长为141bp,并在其N端引入kex2裂解位点,以保证表达抗菌肽具有天然N端。基因克隆入pPICZα-A质粒,构建分泌型重组酵母表达载体pPICZα-A-LL-37。pPICZα-A-LL-37经SacⅠ酶切线性化后电转化导入毕赤酵母菌株X-33。PCR鉴定为阳性的酵母转化子经甲醇诱导分泌LL-37于发酵上清液,其表达量为206mg/L。表达产物LL-37耐热性强,在100℃条件下40min内抗菌活性不变,煮沸3h以上仍具有活性。琼脂糖孔穴扩散法检测显示LL-37对多种革兰氏阴性菌和阳性菌均具有很好的抑制活性,其对金黄色葡萄球菌CowanⅠ(Staphylococcus aureus)、致病性大肠杆菌K99(Enteropathogenic E.coli)和鸡白痢沙门氏菌(Salmonella pullorum)的最小抑菌浓度(Minimal Inhibitory Concentration,MIC)分别为1.56μg/mL、3.12μg/mL和1.56μg/mL。
- 申艳敏魏建超尚书文牛明福周玉珍周斌曹瑞兵陈溥言侯继波
- 关键词：基因设计分泌表达活性检测
- 我国18个省份猪源肠球菌耐药调查及分析被引量：7
- 2021年
- 为研究我国猪源肠球菌的耐药情况,本研究采集18个省市猪养殖场的粪便样品836份进行了肠球菌的分离鉴定,并通过琼脂稀释法测定11种抗菌药物的最小抑菌浓度。结果显示:从836份样品中共分离出225株肠球菌,其中屎肠球菌106株,粪肠球菌56株,小肠肠球菌34株,鹑鸡肠球菌17株,铅黄肠球菌7株,坚忍肠球菌4株,Enterococcus thailandicus 1株。所有的肠球菌对被检抗菌药物耐药程度由高到低依次是四环素(98.2%)、阿米卡星(94.7%)、多西环素(89.3%)、米诺环素(88.9%)、氟苯尼考(88.4%)、红霉素(86.2%)、环丙沙星(63.1%)、氨苄西林(33.8%)、氯霉素(29.8%),未检测到万古霉素和利奈唑胺耐药菌株。除氨苄西林、万古霉素、利奈唑胺外,粪肠球菌对其余8种被检抗菌药物耐药率均高于屎肠球菌。小肠肠球菌对阿米卡星、红霉素、四环素、多西环素、米诺环素5种抗菌药物的耐药率高于屎肠球菌。肠球菌的多重耐药情况集中在6耐、7耐和8耐,占肠球菌总数的72.9%。本研究表明我国猪源肠球菌对常见抗菌药物耐药率较高,应引起更多关注。
- 姚晓慧仝慧娴王舒丰魏建超刘珂邵东华邱亚峰马志永李蓓蓓夏利宁
- 关键词：肠球菌耐药性多药耐药
- 日本脑炎病毒入胞机制及其靶向抑制分子的研究
- 日本脑炎(Japanese encephalitis, JE),又称流行性乙型脑炎(Epidemic Encephalitis B),是由日本脑炎病毒(Japanese Encephalitis Virus, JEV)引...
- 魏建超
- 关键词：日本脑炎病毒噬菌体展示受体
- 文献传递
- 猪血清淀粉样蛋白3(SAA3)分子SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用
- 本实验利用SYBR GreenⅠ荧光定量技术建立一种绝对定量检测猪血清淀粉样蛋白3(SAA3)的方法。根据GenBank中登录号为NM01044552.1的猪血清淀粉样蛋白3(SAA3)的全长基因序列,设计特异性引物,扩...
- 郇贝丽刘珂马改妮魏建超邵东华李蓓蓓邱亚峰石元元马志永
- 截短侧耳类药物耐药机制研究进展被引量：4
- 2017年
- 截短侧耳类抗菌药物泰妙菌素和沃尼妙林是兽医专用药。随着病原菌对现有药物的耐药性在全球范围蔓延,现在兴起了开发新的截短侧耳衍生物用于治疗人类细菌感染。瑞他帕林(Rapamulin)是第一个用于人医的截短侧耳类药物,2007年被批准用于由金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和酿脓葡萄球菌(Staphylococcus pyogenes)引起的皮肤感染。截短侧耳衍生物在人医上的开发应用使其耐药机制成为国际上的研究热点。本文就截短侧耳类药物耐药机制及其传播机理的研究进展进行综述。
- 刘东良贾海燕魏建超李蓓蓓
- 关键词：耐药性泰妙菌素
- 非洲猪瘟病毒B602L蛋白在杆状病毒表达系统中的表达及多抗制备被引量：1
- 2022年
- pB602L蛋白是非洲猪瘟病毒(ASFV)的非结构蛋白之一。本研究利用杆状病毒表达系统表达了ASFV pB602L蛋白并制备了该蛋白的鼠源多克隆抗体。将B602L基因克隆入杆状病毒载体pFastbac dual中构建pFast dual-B602L重组质粒,将重组质粒pFast dual-B602L转化至DH10Bac感受态中,经过3次蓝白斑筛选,得到杆状病毒重组质粒Bacmid-B602L。将重组质粒转染草地贪夜蛾卵巢细胞系(sf9)细胞,获得重组杆状病毒rBac-B602L,细胞出现病变后,在sf9中传3代。通过间接免疫荧光(IFA)和Western blot试验鉴定pB602L蛋白的表达及其反应原性。然后使用纯化的pB602L蛋白作为免疫原制备鼠源抗pB602L蛋白多克隆抗体,经过4次免疫后,采取血清以获得抗pB602L蛋白的多克隆抗体,为后续应用ASFV B602L蛋白检测做准备。结果:在重组杆状病毒表达系统中成功表达pB602L蛋白,可被His抗体检测,并可被ASFV阳性血清特异性识别,制备的多克隆抗体具有较高的特异性。本研究表明杆状病毒系统表达的pB602L蛋白具有良好的抗原性,为后续开展非洲猪瘟亚单位疫苗研究和检测奠定基础。
- 杨扬张妍张俊杰管志欣李昱昊孙卿李宗杰李蓓蓓刘珂邵东华邱亚峰马志永魏建超
- 关键词：非洲猪瘟病毒杆状病毒表达系统免疫原性
- 乙型脑炎病毒EⅢ结构域蛋白的表达及多克隆抗体的制备与鉴定
- 流行性乙型脑炎(Japanese encephalitis,JE)是由乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)引起的以中枢神经系统发生病变为主的急性、人畜共患的自然疫源性疾病.该病的...
- 沈强魏建超史子学李满赵凡凡蒋春英王水明马志永
