李蓓蓓
- 作品数：128 被引量：181H指数：8
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学化学工程更多>>
- 猪血清淀粉样蛋白3(SAA3)分子SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用
- 本实验利用SYBR GreenⅠ荧光定量技术建立一种绝对定量检测猪血清淀粉样蛋白3(SAA3)的方法。根据GenBank中登录号为NM01044552.1的猪血清淀粉样蛋白3(SAA3)的全长基因序列,设计特异性引物,扩...
- 郇贝丽刘珂马改妮魏建超邵东华李蓓蓓邱亚峰石元元马志永
- 截短侧耳类药物耐药机制研究进展被引量：4
- 2017年
- 截短侧耳类抗菌药物泰妙菌素和沃尼妙林是兽医专用药。随着病原菌对现有药物的耐药性在全球范围蔓延,现在兴起了开发新的截短侧耳衍生物用于治疗人类细菌感染。瑞他帕林(Rapamulin)是第一个用于人医的截短侧耳类药物,2007年被批准用于由金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和酿脓葡萄球菌(Staphylococcus pyogenes)引起的皮肤感染。截短侧耳衍生物在人医上的开发应用使其耐药机制成为国际上的研究热点。本文就截短侧耳类药物耐药机制及其传播机理的研究进展进行综述。
- 刘东良贾海燕魏建超李蓓蓓
- 关键词：耐药性泰妙菌素
- 非洲猪瘟病毒B602L蛋白在杆状病毒表达系统中的表达及多抗制备被引量：1
- 2022年
- pB602L蛋白是非洲猪瘟病毒(ASFV)的非结构蛋白之一。本研究利用杆状病毒表达系统表达了ASFV pB602L蛋白并制备了该蛋白的鼠源多克隆抗体。将B602L基因克隆入杆状病毒载体pFastbac dual中构建pFast dual-B602L重组质粒,将重组质粒pFast dual-B602L转化至DH10Bac感受态中,经过3次蓝白斑筛选,得到杆状病毒重组质粒Bacmid-B602L。将重组质粒转染草地贪夜蛾卵巢细胞系(sf9)细胞,获得重组杆状病毒rBac-B602L,细胞出现病变后,在sf9中传3代。通过间接免疫荧光(IFA)和Western blot试验鉴定pB602L蛋白的表达及其反应原性。然后使用纯化的pB602L蛋白作为免疫原制备鼠源抗pB602L蛋白多克隆抗体,经过4次免疫后,采取血清以获得抗pB602L蛋白的多克隆抗体,为后续应用ASFV B602L蛋白检测做准备。结果:在重组杆状病毒表达系统中成功表达pB602L蛋白,可被His抗体检测,并可被ASFV阳性血清特异性识别,制备的多克隆抗体具有较高的特异性。本研究表明杆状病毒系统表达的pB602L蛋白具有良好的抗原性,为后续开展非洲猪瘟亚单位疫苗研究和检测奠定基础。
- 杨扬张妍张俊杰管志欣李昱昊孙卿李宗杰李蓓蓓刘珂邵东华邱亚峰马志永魏建超
- 关键词：非洲猪瘟病毒杆状病毒表达系统免疫原性
- A型流感病毒NS1与hGBP1结合而拮抗其抗病毒活性
- 人鸟甘酸结合蛋白1 (hGBPl)是一种干扰素诱导蛋白,参与宿主抗病毒免疫反应.A型流感病毒感染后,hGBPl的转录水平和蛋白水平显著上调.体外过表达试验显示hGBP1抑制A型流感病毒复制作用具有剂量依赖性,hGBP1第...
- 朱紫祥马志永史子学晏文君魏建超邵东华邓绪芳王少辉李蓓蓓童光志
- 关键词：兽医学A型流感病毒NS1基因抗病毒活性
- 一种检测埃博拉病毒的荧光定量PCR检测方法及其引物和试剂盒
- 本发明公开了一种检测埃博拉病毒(EBOV)的荧光定量PCR检测方法及其引物和试剂盒。本发明是一种通用型检测方法，只要待检样品中有Z、S、B、C、R五种亚型EBOV中的任何一种或者多种同时存在，就能检测出来阳性。本发明利用...
- 马志永史子学魏建超邵东华王少辉李蓓蓓刘阳王宗尧
- 文献传递
- 乙型脑炎病毒结构蛋白PrM单克隆抗体的制备和分析
- 2023年
- 为了制备乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)结构蛋白PrM单克隆抗体,首先根据NCBI参考序列(GQ918133.2)设计PrM引物扩增目的基因,将目的基因构建至pColdⅠ原核表达质粒上;然后鉴定阳性克隆质粒并转化至BL21(DE3)感受态细胞,经诱导表达蛋白纯化后。免疫6周龄BALB/c小鼠,进行杂交瘤细胞融合,并对融合细胞进行克隆筛选;最后将筛选阳性的杂交瘤细胞制备腹水获取单克隆抗体,采用间接ELISA检测抗体效价,Western blot和间接免疫荧光检测抗体特异性和病毒感染过程。结果显示:成功构建了pCold I-PrM原核表达载体,PrM蛋白在1 mmol/L IPTG 16℃过夜诱导培养时表达量较高,亚克隆后经腹水制备获得2株针对PrM区域的单克隆抗体,Western blot和间接免疫荧光检测2株单抗能够特异性识别JEV的PrM区蛋白,获得的单抗能够鉴定JEV在细胞内的感染过程。本研究为进一步研究JEV鉴别诊断技术和生物学功能提供基础。
- 陈梦莉谢丰玉张彤郑家杨魏建超李宗杰李蓓蓓邱亚峰马志永邵东华刘珂冯秀丽
- 关键词：日本乙型脑炎病毒单克隆抗体
- 中华按蚊源日本脑炎病毒的分离鉴定及其分子特征的分析被引量：4
- 2017年
- 为了解上海市蚊源日本脑炎病毒(JEV)的分子特征,2014年从上海市嘉定区猪场采集蚊媒样品1万余份,采用BHK21和C6/36细胞培养法进行病毒分离,通过RT-PCR和IFA技术对分离株进行鉴定。结果表明,分离到1株JEV,命名为JD-15,源自中华按蚊。用JD-15株分别感染BHK21和C6/36细胞,72 h后所有细胞均发生明显病变(CPE),其细胞半数感染量(TCID50)为1.96×106PFU。用分离株JD-15脑内接种3周龄乳鼠,结果测得半数致死量(LD50)为4.2×101PFU,表明该毒株具有较强的神经毒力。对JD-15株的E基因进行克隆测序及进化分析,结果显示,该株JEV属于基因Ⅲ型,与减毒活疫苗株SA-14-14-2的E基因核苷酸序列的同源性为98.1%,氨基酸序列的同源性为97.5%。本研究为乙型脑炎的流行病学调查提供了科学依据,对上海市蚊虫及蚊媒病的防治具有重要意义。
- 刘茜倩魏建超钟登科吴亚玲石坤张克龙陆美林肖长广李蓓蓓刘珂邵东华邱亚峰石元元马志永范红结
- 关键词：日本脑炎病毒进化分析
- 支原体检验用培养基质控菌株的生长曲线与世代时间测定被引量：8
- 2012年
- 为了摸索用于支原体培养基检验用质控菌株的生长规律,利用活菌计数方法测定滑液支原体、猪鼻支原体不同培养时段的颜色变化单位(CCU),并绘制生长曲线,确定世代时间。结果表明:滑液支原体菌株迟缓期在培养后6 h内,对数期为培养后6～36 h,稳定期为培养后36～54 h,衰老期为培养54 h之后,世代时间G=231.8 min;猪鼻支原体菌株迟缓期在培养后6 h内,对数期为培养后6～18 h,稳定期为培养后18～126 h,衰老期为培养126 h之后,世代时间G=117.1 min。通过对质控菌株生长规律的初步探索,为培养基检验及质控菌株的使用提供了参考。
- 刘轶秋丁家波李蓓蓓徐磊张瑞婷
- 关键词：质控菌株培养基
- 3种禽源支原体替米考星耐药株的体外诱导及23S rRNA基因V域碱基突变分析被引量：5
- 2011年
- 作者拟探讨禽源支原体对替米考星耐药的分子机制。体外诱导得到鸡毒支原体(R株、PG31株和S6株)、鸡滑液支原体、衣阿华支原体的替米考星耐药株;PCR扩增原始敏感株和诱导耐药株的23S rRNA基因V域,测序分析耐药相关碱基突变情况。结果鸡毒支原体R株、PG31株、S6株、鸡滑液支原体、衣阿华支原体分别通过9代、8代、6代、14代、9代诱导获得替米考星耐药(≥128μg.mL-1)株;3种禽源支原体替米考星诱导耐药株均对大环内酯类药物表现交叉耐药,23SrRNA基因发生A2503T突变的诱导耐药株对截短侧耳素类、氯霉素类药物的敏感性明显降低。诱导获得的替米考星耐药鸡毒支原体R株发生了A2058G和A2503T突变,PG31株发生了A2058G和A2059G突变,S6株发生了A2058G和A2503T突变;而诱导获得的替米考星耐药鸡滑液支原体发生了G2162A突变,衣阿华支原体发生了A2059C突变。本研究表明鸡毒支原体和衣阿华支原体在体外较易经替米考星诱导产生耐药性,而鸡滑液支原体相对较难。菌株23SrRNA基因V域2 058、2 059、2 503位点的碱基突变与替米考星耐药表型有密切关系。
- 刘轶秋吴聪明沈建忠李蓓蓓张瑞婷赵晖
- 关键词：支原体替米考星突变
- 自繁自养猪场中不同来源粪肠球菌与屎肠球菌的耐药性调查分析被引量：4
- 2022年
- 为了解新疆某自繁自养猪场中不同来源粪肠球菌和屎肠球菌的耐药情况,采集猪肛拭子和环境样品共计369份进行细菌分离,并利用琼脂稀释法测定最小抑菌浓度。结果表明:共分离到粪肠球菌100株和屎肠球菌88株;该养殖场粪肠球菌与屎肠球菌对红霉素、氟苯尼考以及四环素的耐药率高于50%;粪肠球菌对利奈唑胺的耐药率高于屎肠球菌,而屎肠球菌对氨苄西林、庆大霉素以及环丙沙星的耐药率高于粪肠球菌,未发现万古霉素耐药株。该养殖场不同来源肠球菌耐药性存在差异,可能与不同生产阶段用药不同有关,建议根据耐药性分析进行合理用药,降低不合理用药导致细菌耐药的风险。
- 王舒丰轩慧勇姚晓慧魏建超刘珂邵东华邱亚峰马志永李蓓蓓夏利宁
- 关键词：粪肠球菌屎肠球菌耐药性
