邵东华
- 作品数:143 被引量:231H指数:8
- 供职机构:中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学理学更多>>
- 裂谷热病毒Gn蛋白主要抗原区的表达、纯化及抗原性分析被引量:2
- 2015年
- 目的通过原核表达系统制备裂谷热病毒Gn片段主要抗原区蛋白,获取纯化蛋白,并分析抗原性。方法将合成的裂谷热Gn基因用PCR的方法扩增具有保护性抗原表位的两段Gn1和Gn2,并将其定向插入原核表达质粒pColdⅠ中,构建重组表达质粒pColdⅠ-Gn1和pColdⅠ-Gn2,并将重组质粒转化到BL21(DE3)感受态中,以IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达蛋白和表达量,并利用His-tag Ni柱进行亲和层析纯化,Western-blot鉴定表达蛋白。结果所构建的质粒pColdⅠ-Gn1和pColdⅠ-Gn2序列正确,SDS-PAGE检测到目的蛋白,Western-blot显示截断的Gn蛋白具有很好反应原性。结论成功纯化了裂谷热病毒Gn主要抗原区的表达蛋白。
- 夏鹏魏建超陆莹梅武专昌李蓓蓓刘珂邵东华邱亚峰钟登科温贵兰马志永
- 关键词:原核表达蛋白纯化
- 我国18个省份猪源肠球菌耐药调查及分析被引量:7
- 2021年
- 为研究我国猪源肠球菌的耐药情况,本研究采集18个省市猪养殖场的粪便样品836份进行了肠球菌的分离鉴定,并通过琼脂稀释法测定11种抗菌药物的最小抑菌浓度。结果显示:从836份样品中共分离出225株肠球菌,其中屎肠球菌106株,粪肠球菌56株,小肠肠球菌34株,鹑鸡肠球菌17株,铅黄肠球菌7株,坚忍肠球菌4株,Enterococcus thailandicus 1株。所有的肠球菌对被检抗菌药物耐药程度由高到低依次是四环素(98.2%)、阿米卡星(94.7%)、多西环素(89.3%)、米诺环素(88.9%)、氟苯尼考(88.4%)、红霉素(86.2%)、环丙沙星(63.1%)、氨苄西林(33.8%)、氯霉素(29.8%),未检测到万古霉素和利奈唑胺耐药菌株。除氨苄西林、万古霉素、利奈唑胺外,粪肠球菌对其余8种被检抗菌药物耐药率均高于屎肠球菌。小肠肠球菌对阿米卡星、红霉素、四环素、多西环素、米诺环素5种抗菌药物的耐药率高于屎肠球菌。肠球菌的多重耐药情况集中在6耐、7耐和8耐,占肠球菌总数的72.9%。本研究表明我国猪源肠球菌对常见抗菌药物耐药率较高,应引起更多关注。
- 姚晓慧仝慧娴王舒丰魏建超刘珂邵东华邱亚峰马志永李蓓蓓夏利宁
- 关键词:肠球菌耐药性多药耐药
- 一类N-(2-噻唑)苯甲酰胺衍生物的应用
- 本发明公开了一类如式A所示的N-(2-噻唑)苯甲酰胺类化合物在制备抗乙型脑炎病毒感染药物中的应用;其中,R<Sup>1</Sup>为OH、OCOCH<Sub>3</Sub>、OCOC<Sub>2</Sub>H<Sub>5...
- 马志永史子学邱亚峰沈阳邵东华薛飞群
- 日本血吸虫童虫期体被蛋白Th细胞表位预测及初步鉴定被引量:5
- 2009年
- 目的预测并鉴定日本血吸虫童虫体被蛋白分子的Th细胞表位。方法利用在线服务器分别对有关序列进行跨膜区与信号肽的预测分析;采用结合基序扫描与计分矩阵等算法,以及基于多种分子动力学算法的配体受体相互对接的分子建模方法等进行Th细胞表位预测;人工合成肽采用以多聚赖氨酸为核心的含4个表位肽分支臂的复合抗原多肽;表位肽刺激免疫鼠脾淋巴细胞增殖效果的鉴定采用改良的MTT法。结果从373条日本血吸虫肝期童虫体被蛋白序列中筛得14条具有开放阅读框及信号肽结构的序列;预测得到至少与小鼠的1个MHCⅡ类分子结合的5个15肽表位序列;淋巴细胞增殖试验初步鉴定获得了1个SSLVISYSTVDRLVC(AY815893)候选体被蛋白Th细胞表位。结论初步鉴定了1个潜在的体被蛋白Th细胞表位,为进一步筛选抗血吸虫保护性Th细胞表位提供了理论和实验依据。
- 陈雷杨健美陈虹苑纯秀邵东华冯新港林矫矫
- 关键词:日本血吸虫童虫
- 2014-2015年上海地区PCV2分子流行病学调查
- 2014年到2015年初期间,从上海浦东、闵行、嘉定、奉贤的所有规模化猪场中的疑似PCVD患病猪群和正常猪群中采集组织样品,采用聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)方法,扩增PCV...
- 石坤魏建超邱亚峰张克龙李宗瑞刘茜倩李蓓蓓刘珂邵东华马志永
- 关键词:PCV2ORF2PCR
- 上海副猪嗜血杆菌分离鉴定及其耐药性分析被引量:19
- 2015年
- 本研究旨在调查我国上海副猪嗜血杆菌对临床常用抗菌药的耐药情况,为该病的临床用药与防治提供数据支持。2013-2014年从上海市多个屠宰场采集样品以及送检病料共计484份,采用细菌分离培养及PCR的方法,分离鉴定出62株副猪嗜血杆菌。采用微量琼脂稀释法测定21种临床常用抗菌药的最小抑菌浓度。药物敏感性测定结果表明,所有菌株都对阿奇霉素、替米考星、泰妙菌素、阿米卡星、头孢噻呋和左氧氟沙星敏感,超过90%的菌株对红霉素(60,96.8%)、氟苯尼考(59,95.3%)、氯霉素(60,96.8%)、庆大霉素(60,96.8%)、壮观霉素(61,98.4%)、青霉素(57,91.9%)、氨苄青霉素(57,91.9%)和环丙沙星(61,98.4%)敏感,但对四环素和恩诺沙星耐药率较高,分别为75.8%(47)和30.6%(19)。耐药谱分析显示,37.1%的菌株对两种以上的抗菌药耐受。本研究结果显示上海市副猪嗜血杆菌对临床常用抗菌药物耐药总体状况尚不严重,但针对多个临床常用药物的耐药菌株已经出现,应对其耐药性进行长期监测。
- 张悦李蓓蓓魏建超邵东华刘珂石元元邱亚峰马志永
- 关键词:副猪嗜血杆菌抗菌药耐药
- 表达PRRSV N蛋白稳定细胞系的构建与鉴定
- 2023年
- 旨在通过慢病毒表达系统构建稳定表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) N蛋白的Marc-145细胞系。以PRRSV SH1株感染性克隆质粒为模板,通过PCR扩增N基因,并将其克隆到慢病毒载体中,获得重组慢病毒质粒pSin-Ires-Puro-N,将重组质粒pSin-Ires-Puro-N与辅助质粒psPAS2、pMD2.G、pRSV-Rev共转染293T细胞进行慢病毒包装,获得表达N蛋白的重组慢病毒颗粒并将其感染Marc-145细胞,嘌呤霉素初步筛选阳性细胞,筛选几代后的细胞采用有限稀释法和终点稀释法获得稳定表达N蛋白的Marc-145细胞系。通过PCR鉴定表明细胞系中存在N蛋白基因,通过间接免疫荧光(IFA)和Western blot试验验证N蛋白能在细胞系中能稳定表达。本研究成功构建了稳定表达PRRSV N蛋白的Marc-145细胞系,为研制PRRSV新型复制缺陷型疫苗奠定基础。
- 付宁宁肖长广陈梦莉邱亚峰李宗杰李蓓蓓刘珂邵东华马志永魏建超
- 关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白细胞系慢病毒载体
- 上海市动物源性食品中单增李斯特菌的流行病学及生物被膜形成能力研究被引量:11
- 2015年
- 为了解上海市动物源性食品中单增李斯特菌的污染状况,在上海市不同超市和农贸市场采集479份动物源性食品样品,依据国标方法进行菌株分离,并对分离菌株的耐药性、血清型及生物被膜形成能力进行测定。结果共分离鉴定34株单增李斯特菌,分离率为7.1%(34/479)。药敏试验结果显示单增李斯特菌分离株的耐药率虽然不高,但日趋严重,对氨苄青霉素和万古霉素均敏感,对头孢曲松的耐药性最高(55.88%),林可霉素次之(41.18%)。血清型鉴定表明单增李斯特菌分离株以血清型1/2a(3a)型为主(76.47%),血清型1/2c(3c)次之(17.65%),而致病性强的血清型4b(4d、4e)仅占2.94%。生物被膜形成能力实验表明,所有的菌株均能形成生物被膜,其中76.47%(26/34)分离株生物被膜形成能力微弱。上海市动物源性食品中单增李斯特菌污染情况较为严重,主要流行1/2a(3a)血清型,耐药率日趋严重,均可形成生物被膜。因此,应加强对动物源性食品中单增李斯特菌的监控。
- 王少辉刘萍萍魏建超邵东华史子学李蓓蓓马志永
- 关键词:单增李斯特菌耐药性血清型生物被膜
- 一例猪肺三毛滴虫病的鉴定
- 三毛滴虫,尤其是猪三毛滴虫,作为一种常在的寄生虫寄生于猪的鼻腔、胃以及肠道中。该寄生虫在世界范围内广泛分布,但因地区不同而存在差异。早在上个世纪60年代,Hilbler等报道猪三毛滴虫鼻腔的分离率超过50%。最近我国学者...
- 相笑刘浩蒋蔚石元元黎倩倩魏建超李蓓蓓刘珂邵东华王权马志永邱亚峰
- 关键词:肺灌洗液显微镜观察
- 副猪嗜血杆菌血清13型分离鉴定及其培养特性研究被引量:3
- 2019年
- 上海市某猪场中分离出1株13型副猪嗜血杆菌,动物试验鉴定其为强毒株。为探索血清13型副猪嗜血杆菌的培养特性,以期提高其分离率并优化后续发酵条件,本研究对13型副猪嗜血杆菌生长所需要的血清和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)的浓度进行了筛选,测定了在最适培养条件下的生长曲线。结果表明,副猪嗜血杆菌在TSB培养基中的最适培养条件为5%新生牛血清,10μg/mL NAD;在最适培养条件下生长曲线显示,OD600值为0.2~0.6时为13型副猪嗜血杆菌的对数生长期,在培养14 h时活菌数达到最大值,而OD600值在22 h时达到最大,且在增值过程中产生大量的酸。
- 庞琳琳赵秋华王欣张俊杰郭爽李蓓蓓刘珂邵东华邱亚峰马志永王建魏建超
- 关键词:副猪嗜血杆菌NAD