陈京
- 作品数：13 被引量：58H指数：5
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- 烟草上环斑、叶脉坏死症状的病原鉴定
- 1997年
- 烟草上环斑、叶脉坏死症状的病原鉴定陈燕芳陈京白松丁元明（农业部植物检疫实验所１００２９）（昆明动植物检疫局６５００３４）近年国内有人认为我国有些地方烟草叶片上表现出的褪绿环斑或坏死环斑症状是由烟草环斑病毒引致的。为了澄清其病原，１９９３年３月，我们从...
- 陈燕芳陈京白松丁元明
- 关键词：烟草病原
- 几种危险性病毒抗血清的制备及检测方法的建立被引量：8
- 1997年
- 番茄环斑病毒、烟草环斑病毒和南芥菜花叶病毒用改进的方法提纯后免疫兔子，制备出高质量的抗血清。琼脂扩散效价为１／３２０，用ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ方法检测病汁液可达１０－３～１０－４。３种血清之间无交叉反应，与健康寄主和常见的自然寄主蛋白也无反应。应用３种血清分别对２３种植物１００多个采集的样品和进口种子进行了ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ检测。
- 陈京陈燕芳宋淑敏胡伟贞王树琴
- 关键词：抗血清A蛋白酶联免疫吸附番茄环斑病毒
- 南方菜豆花叶病毒单克隆抗体的初步研究被引量：2
- 1991年
- 南方菜豆花叶病毒(Southern bean mosaic virus,SBMV)是一种既能通过种子远距离传播,又有介体带毒扩散力的危险性病毒。目前,国内尚未发现.SBMV主要危害菜豆、豇豆等在我国种植面积大、范围广的豆科植物。随着进出口贸易和种质交换日益增多,此病毒传入机会大大增加。为了提高检疫技术水平,了解病毒特性和建立快速检测技术,本文对SBMV单克隆抗体进行了初步研究。
- 宋淑敏张成良阚晓枫陈京胡伟贞张作芳由雪娟
- 关键词：单克隆抗体
- 三种病毒A蛋白酶联诊断试剂盒的研制简报被引量：3
- 1997年
- 陈京宋淑敏
- 关键词：SPA-ELISA诊断试剂盒植物病毒检疫
- 番茄环斑病毒的灭活处理被引量：3
- 1993年
- 番茄环斑病毒(TmRSV)的病汁液和 PEG 粗提纯液,用温度、甲醛和戍二醛以及超声波进行灭活处理。PEG 粗提纯液经温度(水浴)60℃处理10分钟或使甲醛浓度达0. 3%二种方法后,均丧失侵染性而有抗原性。将其在4℃冰箱中存放,前者抗原性能保持8个月以上,后者只能保持5个月。病汁液不经处理,在4℃冰箱中存放1个月能丧失侵染性,而抗原性也可保持8个月以上。所以阳性对照的灭活处理以病汁液在4℃下存放1个月和 PEG 粗提纯液60℃处理10分钟为最佳方案。
- 胡伟贞陈京吴新华
- 关键词：番茄环斑病毒灭活检疫
- 免疫小鼠制备植物病毒腹水抗体的研究和应用
- 1989年
- 南方菜豆花叶病毒(SBMV)、烟草花叶病毒(TMV)经 PEG 沉淀、差速离心、梯度离心纯化后,以每只鼠0.1、0.5、1 0、1.5、2mg 剂量,每周一次,共三次分别免疫小鼠,末次免疫后8天注射鼠腹水癌细胞(S_(180)),8～13天后鼠腹部膨大,抽取腹水,离心,取上清液,即为特异腹水抗体。实验证明:每只小鼠免疫0.1mg 抗原,获得抗体滴度1:200万(ELISA);免疫1.5mg,可获得最高滴度1:3200万的特异抗体。同时,还研制了大豆花叶病在毒(SMV)、马铃薯×病毒(PVX),马铃薯 Y 病毒(PVY),蚕豆萎蔫病毒(BBWV)、花生矮花病毒(PSV)、芜菁花叶病毒(T_uMV)腹水抗体,滴度为1:400万～3200万。一般一只小鼠可以获得20～40ml,最多66ml 腹水抗体,其抗体性质与同种抗原免疫兔、鼠制备的抗血清相同。这是用微量抗原制备多量特异抗体的好方法。用鼠腹水抗体与兔抗血清组合异种动物抗体双夹心酶联试验,可得到与经典的双抗体夹心法相当或略好的检测效果,又不需自制特异抗体酶标记物,适用于检测大量样品,为植物检疫提供一个好的检验手段。
- 张成良张作芳陆家理陈京宋淑敏阙晓枫
- 关键词：植物病毒抗体免疫小鼠
- 三种外检植物病毒的灭活处理被引量：2
- 1997年
- 番茄环斑病毒（ＴｍＲＳＶ），烟草环斑病毒（ＴＲＳＶ），南芥菜花叶病毒（ＡｒＭＶ）的病汁液和ＰＥＧ粗提纯液，经适宜温度或甲醛处理，均丧失侵染性而有抗原性。ＴｍＲＳＶＰＥＧ粗提纯液经６０℃（水浴）处理１０分钟或２８℃７天，ＴＲＳＶ粗提纯液置２５℃一个月，Ａｒ－ＭＶ在４０℃７天条件下均可做为阳性对照的灭活处理的最佳方案。可保存抗原性在７～１２月以上。为了防止危险性检疫病毒的侵入，对入境种苗进行检疫，需建立快速、准确、标准化检疫程序，而在血清学快速诊断试验中，提供阳性对照，对提高判断准确率是必要的。因此，为了解决在诊断试剂中提供阳性对照但又不能使其检疫性病毒人为扩散这一重要问题，我们在研究三种外检病毒（ＴｍＲＳＶ，ＴＲＳＶ，ＡｒＭＶ）的检验技术的同时，又进行了一些灭活试验，用化学和物理方法钝化病毒，使其失去侵染性而保持抗原性，并应用于酶联诊断试剂盒中。
- 陈京胡伟贞陈燕芳
- 关键词：植物检疫环斑病毒
- 进口甜瓜种子中的南瓜花叶病毒的分离鉴定被引量：7
- 1996年
- 本实验将美国进口甜瓜种子及用该种子在内蒙制种田繁殖的甜瓜种子播种后出现典型症状的病苗，进行生物接种和蚜传实验。该病毒只侵染葫芦科寄主，不蚜传。经电镜和免疫电镜观察、血清学检测和病毒外壳蛋白分子量测定。表明病毒粒体形态和外壳蛋白亚基谱带与南瓜花叶病毒基本一致。血清学反应结果为阳性。实验证明两种甜瓜种子均带有种传的南瓜花叶病毒。种子带毒率为１％～３．２％。
- 陈京胡伟贞宋淑敏陈燕芳
- 关键词：甜瓜种传病毒南瓜花叶病毒植物检疫
- 烟草环斑病毒的检疫检测方法被引量：10
- 1999年
- 通过研究，提出了烟草环斑病毒的血清学、生物学、免疫电镜等检测方法。初步建立了一套烟草环斑病毒的检测程序。
- 陈燕芳陈京宋淑敏李明福
- 关键词：烟草环斑病毒生物鉴定免疫电镜血清学测定
- 番茄环斑病毒的提纯被引量：6
- 1991年
- 通过对番茄环斑病毒繁殖寄主、抽提缓冲液、澄清剂、浓缩方法和悬浮缓冲液等比较试验,初步筛选出得率高,并能保持病毒完整的提纯程序,即:用番杏为繁殖寄主,用0.05M 磷酸钾缓冲液(pH 7.5,内含0.02M 巯基乙醇)抽提,加1%Tritonx-100澄清,经8%聚乙二醇沉淀,接着差速离心(28000转/分,4小时)浓缩病毒,最后用0.01 MPB(pH 7.5内含0.002MEDTA)悬浮,低速离心,上清液为部分提纯的病毒制剂。此提纯制剂具有侵染性;病毒粒体完整,为等轴对称,直径约28μm;且具有典型的核蛋白吸收曲线。
- 胡伟贞陈京由雪娟王树琴
- 关键词：番茄环斑病毒提纯
