张成良
- 作品数：37 被引量：269H指数：10
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 葡萄卷叶伴随病毒ⅢCP基因在E.coli中的表达被引量：3
- 2001年
- 将葡萄卷叶伴随病毒 的 CP基因克隆到表达载体 p ET- 30 a中 ,转化大肠杆菌 BL2 1,筛选得到阳性克隆 GB- 1,用 IPTG诱导使其表达。SDS- PAGE电泳分析表明 ,该 CP基因在大肠杆菌 BL2 1中得到大量表达。用该病毒的 CP抗血清通过间接 EL
- 赵冬兰朱水芳张满良张成良黄文胜
- 关键词：CP基因基因表达基因克隆
- ODA_H_2O_2-HRP偶合反应伏安酶联免疫分析检测植物病毒GFV、TAV和PVY被引量：9
- 1998年
- 将邻联茴香胺（ＯＤＡ）＿Ｈ２Ｏ２＿辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）偶合反应伏安酶联免疫分析新体系，应用于植物病毒葡萄扇叶病毒（ｇｒａｐｅｖｉｎｅｆａｎｌｅａｆｖｉｒｕｓ，ＧＦＶ）、番茄不孕病毒（ｔｏｍａｔｏａｓｐｅｒｍｙｖｉｒｕｓ，ＴＡＶ）和马铃薯Ｙ病毒（ｐｏｔａｔｏｖｉｒｕｓＹ，ＰＶＹ）的测定。该法对以上各种植物病毒叶澄清液的测定的稀释比均高于酶联免疫吸附分析（ＥＬＩＳＡ）法，检测范围均宽于ＥＬＩＳＡ法。
- 焦奎韦璐张书圣刘澄凡张成良张作芳刘靖宇魏澎
- 关键词：葡萄扇叶病毒番茄不孕病毒马铃薯Y病毒ODA
- 烟草花叶病毒单克隆抗体研究和应用
- 张作芳张成良阙晓枫陈伯权孙月英
- 利用国内现有条件，建立中国第一株植物病毒-烟草花叶病毒(Tobaccomosdicvirus-TMV)单克隆抗体(MCAB)杂交瘤细胞株，其效价、特异性、稳定性等方面相当于国际同类水平。相继研制出20多个TMV-MCAB...
- 关键词：
- 关键词：植物病毒烟草花叶病毒单克隆抗体抗病育种
- MAP-H_2O_2-HRP伏安酶联免疫分析测定南方菜豆花叶病毒被引量：3
- 2000年
- 提出间氨基酚 ( MAP) -H2 O2 -辣根过氧化物酶 ( HRP)伏安酶联免疫分析新体系 ,并用于南方菜豆花叶病毒 ( SBMV)的测定 .以线性扫描二阶导数伏安法检测 HRP催化 H2 O2 氧化 MAP的产物 ,用于游离 HRP及 SBMV的测定 ,灵敏度均高于经典的 ELISA显色光度法 .本法对 HRP测定的线性范围为 1 .0× 1 0 - 8～1 .0× 1 0 - 6 g/L,检测限为 3 .8× 1 0 - 9g/L;对 SBMV测定的线性范围为 4 .0～ 50 0 0 ng/m L,检测限为 4 .0ng/m L.用所建立的方法测定病毒感染病叶澄清液的最高稀释比为 1∶ 1 .5× 1 0 5 ,并与现行的 ELISA显色光度法进行对照 。
- 张书圣焦奎陈洪渊王曼霞张成良张作芳
- 关键词：南方菜豆花叶病毒HRP免疫分析伏安法
- 马铃薯卷叶病毒分离株外壳蛋白基因和17k蛋白基因的克隆及序列分析被引量：9
- 2002年
- 从典型的马铃薯卷叶病毒病株中直接提取出植物总RNA ,根据PLRV外壳蛋白基因序列 ,设计合成了一对寡核苷酸引物 ,经RT -PCR法扩增出全长的cDNA片段 ,将其克隆到质粒pGEM - 3Zf (+)上 ,并进行了序列分析。结果表明 ,克隆的cDNA片段由 6 2 7个核苷酸组成 ,编码 2 0 8个氨基酸组成的理论分子量为2 3k的蛋白 ,与PLRV外壳蛋白的大小一致 ;此外克隆片段还含有一个不同于外壳蛋白基因的阅读框架 ,该框架由 46 5个核苷酸组成 ,编码 15 5个氨基酸组成的理论分子量为 17k的蛋白 ,与PLRV的 17k蛋白大小一致。与国外报道的几个株系相比 ,PLRV分离物的外壳蛋白基因及 17k蛋白基因的核苷酸同源率分别高达97 5 %～ 99 7%和 96 5 %～ 99 6 % ,由此推测的氨基酸同源率高达 97 6 %～ 99 5 %和 96 1%～ 99 4% ,说明所克隆的PLRV外壳蛋白基因和 17k蛋白基因具有高度的保守性 ,本研究克隆了PLRV分离物外壳蛋白和17k蛋白基因的序列 。
- 吴志明朱水芳田文会张成良
- 关键词：马铃薯卷叶病毒外壳蛋白基因基因克隆
- 南方菜豆花叶病毒单克隆抗体的初步研究被引量：2
- 1991年
- 南方菜豆花叶病毒(Southern bean mosaic virus,SBMV)是一种既能通过种子远距离传播,又有介体带毒扩散力的危险性病毒。目前,国内尚未发现.SBMV主要危害菜豆、豇豆等在我国种植面积大、范围广的豆科植物。随着进出口贸易和种质交换日益增多,此病毒传入机会大大增加。为了提高检疫技术水平,了解病毒特性和建立快速检测技术,本文对SBMV单克隆抗体进行了初步研究。
- 宋淑敏张成良阚晓枫陈京胡伟贞张作芳由雪娟
- 关键词：单克隆抗体
- 酶联免疫法检测核果果树病毒被引量：21
- 1996年
- 酶联免疫法检测核果果树病毒李青覃兰英（北京市农林科学院林果所１０００９３）李明福张成良李桂芬相红（农业部植物检疫实验所）核果果树包括桃、李、杏、樱桃，在我国果树生产中占有重要地位。但是目前生产上栽培的核果果树普遍感染病毒。且一经感染，便终生带毒，持久...
- 李青覃兰英李明福张成良李桂芬相红
- 关键词：核果类果树病毒病酶联免疫法
- 用OPD-H_2O_2-HRP伏安酶联免疫法检测植物病毒ArMV、CMV、SBMV和TuMV被引量：9
- 1999年
- 首次将邻苯二胺(OPD) -H2O2-辣根过氧化物酶(HRP)伏安酶联免疫分析体系 ,应用于植物病毒南芥菜花叶病毒(ArMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、南方菜豆花叶病毒(SBMV)和芜箐花叶病毒(TuMV)的血清学检测。该法测定以上植物病毒感染病叶澄清液的最高稀释比(体积比)分别为1∶500000 ,1∶500000,1∶2500000和1∶2500000,而酶联免疫吸附分析(ELISA)测定的最高稀释比分别为1∶2500 ,1∶12500 ,1∶100000和1∶25000。该法测定以上植物病毒的灵敏度和测定范围均优于经典的ELISA光度法。
- 焦奎孙刚张书圣刘澄凡张成良张作芳刘靖宇魏澎
- 关键词：花叶病毒
- PCR和Dig—cRNA探针检测番茄环斑病毒被引量：31
- 1995年
- 利用根据ToRSV加拿大悬钩子株系核酸序列设计、合成的寡核苷酸引物进行PCR扩增试验,能成功地扩增ToRSV悬钩子株系的目标片段,但不能扩增苹果、樱桃株系的目标片段。 而ToRSV苹果株系的克隆pS_(64),经EcoRI酶切,再分别用^(32)P—UTP、Dig—11—UTP和SP_6RNA多聚酶转录出^(32)P标记、Dig标记的cRNA探针后,不仅能有效地检测出ToRSV的苹果株系,而且能有效地检测樱桃株系和悬钩子株系。^(32)P与Dig—标记的探针灵敏度基本相同,而Dig标记的探针无放射性,可以长期保存,多次使用,灵敏、准确、安全、经济,是值得推广应用的检疫新方法。
- 朱水芳相宁张成良A.Hadidi裘维蕃
- 关键词：番茄环斑病毒探针检测
- 香石竹斑驳病毒检疫技术进展被引量：3
- 1991年
- 自1955年发现香石竹斑驳病毒(Carnation mottle virus——CarMoV)以来,至今已有27个国家和地区报道这个病毒。由于它对香石竹的侵染率高,危害严重,引起各国高度重视,已有南非、意大利、马耳他、新西兰、东非等国家将这种病害列为禁止入境的检疫对象或列为限制进口对象。我国自1983年上海首次从荷兰引进香石竹幼苗中检出
- 刘伟张成良
- 关键词：香石竹斑驳病毒检疫
