高彦君
- 作品数：4 被引量：16H指数：3
- 供职机构：南方医科大学检验与生物技术学院抗体工程研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 干扰RN181基因的表达抑制SMMC7721肝癌细胞的凋亡被引量：1
- 2016年
- [目的]探讨稳定干扰RN181基因对顺铂诱导的SMMC7721肝癌细胞凋亡的影响。[方法]采用RN181干扰慢病毒感染SMMC7721,流式分选出带绿色荧光的细胞,Western Blot鉴定RN181干扰情况;采用DAPI染色法、Western Blot检测RN181对顺铂诱导SMMC7721肝癌细胞凋亡的变化情况。[结果]重组细胞株荧光表达良好,7721KD中RN181蛋白表达量明显低于其对照组。DAPI染色法观察到在顺铂作用下,7721KD的细胞凋亡阳性率低于其对照组(P<0.05)。WB检测到7721KD activated caspase-3、cleaved PARP的表达量低于对照组,而pro-caspase-6、pro-caspase-8的表达量与对照组相比升高。[结论]稳定干扰RN181的表达能够抑制顺铂诱导的SMMC7721细胞凋亡,其机制可能是通过参与死亡受体凋亡途径。
- 石相宜王穗海彭迎霞高彦君董宁宁何沛嵘牛文博吴英松李明李纪良
- 关键词：顺铂细胞凋亡
- 构建稳定干扰RN181的RKO细胞系并研究其生长现象被引量：8
- 2014年
- 目的构建稳定干扰RN181的重组RKO细胞系,并研究下调RN181水平后,重组细胞系在体内外生长的规律。方法 RN181干扰慢病毒感染RKO细胞系,荧光与Western blotting鉴定该重组细胞系,CCK-8法、平板克隆实验研究该重组细胞系在体外增殖规律,裸鼠成瘤实验研究其在体内增殖情况。结果重组细胞系荧光良好,Western blotting证实重组细胞干扰组与对照组的RN181表达量差异有统计学意义(P<0.05)。体外细胞生长曲线实验与平板克隆结果显示,干扰组与对照组之间增殖能力差异无统计学意义(P>0.05)。干扰组的瘤体生长速度明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建稳定干扰RN181的肠癌细胞系,并证实了下调RN181对RKO细胞在体外生长无影响但在体内能显著抑制细胞生长。
- 张贤王穗海彭迎霞高彦君张雪峰孙政李纪良
- 关键词：结直肠癌
- RN181过表达影响SMMC7721肝癌细胞凋亡的初步研究被引量：6
- 2014年
- 目的构建过表达RN181基因的SMMC7721重组细胞株,研究RN181对顺铂诱导肝癌细胞凋亡的影响,并初步探讨其凋亡机制。方法构建高表达RN181逆转录病毒感染SMMC7721细胞,显微镜观察其细胞株荧光强弱,Western blot鉴定RN181蛋白表达水平;采用DAPI染色法、Western blot检测RN181对顺铂诱导SMMC7721细胞株凋亡的变化情况。结果重组细胞株荧光表达良好,7721RN181细胞中RN181蛋白表达量高于其对照,差异有统计学意义(P<0.05)。DAPI染色法观察到在顺铂作用下,7721RN181的细胞凋亡阳性率高于其对照,差异有统计学意义(P<0.05);Western blot检测到7721RN181的activated caspase-3、cleaved PARP的表达量高于对照组,procaspase-6,pro-caspase-8的表达量低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 RN181表达能促进肝癌细胞的凋亡,其可能通过参与死亡受体凋亡途径来促进肝癌细胞凋亡。进而推测RN181基因可能成为肝癌靶向治疗的一个新靶点。
- 彭迎霞张贤张雪峰高彦君王穗海李纪良
- 关键词：顺铂细胞凋亡
- 沉默RNF181基因表达可促进结肠癌SW480细胞的生长被引量：9
- 2016年
- 目的 :研究沉默环指蛋白181(ring finger protein 181,RNF181)基因表达对结肠癌细胞SW480生长的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 :采用慢病毒感染的方法将靶向沉默RNF181基因表达的重组慢病毒颗粒LV3-RNF181-KD转入人结肠癌SW480细胞中[以感染重组慢病毒颗粒LV3-negative control(NC)为阴性对照)]。病毒感染48 h后,分别采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测SW480细胞中RNF181m RNA及蛋白的表达水平;CCK-8法和平板克隆法检测RNF 181基因沉默对SW480细胞增殖的影响;蛋白质印迹法检测对细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)及其磷酸化ERK(phospho-ERK,p-ERK)表达的影响。结果 :实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测结果显示,重组慢病毒颗粒LV3-RNF181-KD转入SW480细胞后,细胞中RNF181 m RNA和蛋白的表达水平均较阴性对照组(感染重组慢病毒颗粒LV3-NC的SW480细胞)明显下调,差异均有统计学意义(P值均<0.01)。CCK-8及平板克隆实验证实,沉默RNF181基因表达后SW480细胞的增殖能力明显增强(P值均<0.01)。细胞中ERK蛋白的表达水平无明显变化(P>0.05),而p-ERK蛋白的表达水平明显升高(P<0.01)。结论 :沉默RNF181基因的表达可增强人结肠癌细胞SW480的增殖能力,其机制可能与丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activate protein kinase,MAPK)/ERK信号转导通路的活化有关。
- 牛文博王穗海李鹏王明清高彦君董宁宁何沛嵘石相宜李纪良
- 关键词：结肠肿瘤慢病毒感染细胞增殖
