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伤寒沙门菌毒力及致病分子机制: 黄新祥黄瑞张海方生秀梅吴淑燕徐顺高杜鸿李君荣许化溪; 伤寒沙门菌是沙门菌属中一种重要的人类肠道致病菌，可造成严重的系统性感染—伤寒。伤寒沙门菌有较强的传染性，上世纪八十年代在我国造成过十三个省范围的大爆发流行，近年来在世界范围内每年有二千多万的病例，加之不断出现的多重耐药菌...; 关键词：; 关键词：伤寒沙门菌毒力

Downregulation of Runx3 closely related to the decreased Th1-associated factors in patients with gastric carcinoma: Background:Runt-related transcription factor 3(RunxS)is a tumor suppressor gene and plays an important role in...; 李雅贞纪晓昀黄新祥苏兆亮夏圣王胜军许化溪; 关键词：RUNX3 T-BET; 文献传递

一种新颖简便的荧光实时RT-PCR相对定量方法的建立被引量：182: 2005年; 为建立一种新颖、简便的荧光实时RT-PCR相对定量方法,根据实时定量标准曲线,推导出相对定量基因表达的公式.公式显示相对表达指数只与CT值和标准曲线的斜率相关.构建标准曲线的标准品需要通过克隆和体外转录获得,实验过程繁琐.当人为成比例增减标准品各个稀释度的具体拷贝数时,标准曲线的斜率并不改变,说明标准曲线斜率与标准品的具体拷贝数无关.因此,新的相对定量方法可以用任何一个待测样品的总RNA(或cDNA),经系列稀释后作为标准品,来构建相对定量标准曲线,获得斜率.与绝对定量法比较,新方法获得了基本相同的斜率和非常一致的定量结果(差异小于4%),而传统的2-#$CT法却表现出较大的定量误差.这些结果表明,新的相对定量方法是一种简便、准确和高效的定量基因表达的方法.; 张驰宇徐顺高黄新祥

人T-bet基因的表达、纯化及其免疫原性分析: 2007年; 目的:利用载体pQE30在大肠埃希菌(M15)原核表达人T-bet基因全长序列,并对表达产物进行纯化、免疫动物和制备多克隆抗体。方法:利用PCR技术从克隆载体pGEM-T/T-bet获得人T-bet的全长编码序列,并将其亚克隆至原核表达载体pQE30,形成重组表达质粒pT-bet;酶切鉴定挑选阳性重组质粒转化大肠埃希菌JM109,测序鉴定后转化M15,经IPTG 37℃诱导4 h后,SDS-PAGE电泳、考马斯亮蓝染色判断以包涵体形式存在的带有6×His标签的融合蛋白(表达产物),用Ni2+-IMAC层析柱对融合蛋白进行纯化;将纯化的蛋白免疫BALB/c小鼠,制备人T-bet的多克隆抗体。结果:成功表达和纯化了人T-bet,并制备了多克隆抗体,ELISA和Western blot结果显示了血清抗体的高效价(1∶100 000)和高度特异性。结论:成功构建了原核表达载体pT-bet,并在工程菌M15中获得大量表达,经纯化后获得高纯度的人T-bet蛋白,制备了效价和特异性良好的多克隆抗体,为进一步研究T-bet的生物学功能奠定了的基础。; 杨敏王胜军王锁英许小朋邱谷风苏兆亮邵启祥黄新祥许化溪; 关键词：原核表达蛋白纯化免疫原性

Ⅵ型分泌系统研究进展被引量：1: 2020年; Ⅵ型分泌系统(Type Ⅵ secretion system,T6SS)是存在于约25%革兰阴性细菌中的一种分泌系统。研究表明T6SS不仅具有对抗其他细菌和杀伤真核宿主细胞的能力,还与细菌的生存及致病能力等方面有着密切的联系。T6SS在不同菌种中表达与功能差异较大,多种致病菌T6SS得到了广泛的研究及讨论。本文主要对T6SS的结构、表达及其功能进行综述,为后续相关研究提供思路。; 魏丹丹谢中艺杨帆帆尹芬芬黄新祥张盈; 关键词：生物膜抗菌作用

伤寒沙门菌外膜囊泡通过调控铁死亡抑制结直肠癌细胞的增殖及机制初探: 2024年; 近年来,细菌外膜囊泡(OMVs)在抗肿瘤治疗中展现出的巨大潜力引起了广泛的关注.为探究伤寒沙门菌外膜囊泡(S.Typhi-OMVs)对人结直肠癌细胞株HT-29增殖的影响及可能的作用机制,通过超速离心法提取不同细菌的OMVs,细胞增殖实验(CCK-8)检测各细菌OMVs对细胞活力的影响;转录组测序(RNA-seq)分析处理后细胞基因表达水平的变化;试剂盒检测铁死亡相关标志物的含量变化;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质免疫印迹法(western blot)分别检测相关基因mRNA和蛋白质的表达变化.结果显示,在提取的6种细菌OMVs中,S.Typhi-OMVs对HT-29细胞的增殖产生了最明显的抑制作用,并且呈现出浓度和时间梯度依赖性;RNA-seq显示HT-29细胞可能发生了铁死亡;S.Typhi-OMVs作用后,细胞内发生了铁沉积,氧化产物增多,抗氧化剂减少,符合铁死亡生化特征;SAT1是S.Typhi-OMVs处理后HT-29胞内mRNA表达量变化最大的基因;p53-SAT1-ALOX15是铁死亡的信号通路之一,S.Typhi-OMVs处理后胞内p53、SAT1、ALOX15的mRNA与蛋白表达均增高.以上结果表明,S.Typhi-OMVs能够抑制结直肠癌细胞HT-29的增殖,其机制可能与通过p53-SAT1-ALOX15信号通路诱导HT-29发生铁死亡有关.; 戈艺潼吉滢曾敏敏郑学明黄新祥张盈; 关键词：伤寒沙门菌结直肠癌细胞增殖

转录因子T-bet和GATA-3对小儿肺炎支原体肺炎免疫调控作用的研究: T辅助细胞(Th)是免疫应答的重要调控细胞和效应细胞,其分化受刺激物、细胞因子和转录因子等多因素调控,其中最强烈的调控因素是T细胞所处的细胞因子环境,如白细胞介素-4(IL-4)诱导Th0细胞向Th2分化,而IL-12诱...; 王锁英许化溪杨敏王胜军黄新祥张贇健忻悦马洁马斌; 关键词：T辅助细胞小儿肺炎肺炎支原体免疫调控; 文献传递

鼻疽假单胞菌与类鼻疽假单胞菌的基因分类被引量：3: 2002年; 目的 :对鼻疽假单胞菌和类鼻疽假单胞菌进行基因分类研究。方法 :应用 16SrDNA扩增、基因测序及微孔板定量杂交技术 ,从基因水平对具有不同生物学特性的鼻疽假单胞菌和类鼻疽假单胞菌两个标准菌株进行同源性分析。结果 :尽管两种细菌在生物学特性上有着明显的差异 ,但其 16SrDNA序列相似度达 99%以上 ,且染色体DNA定量杂交也显示大于 70 %的同源性。结论 :鼻疽假单胞菌和类鼻疽假单胞菌的系统发育关系十分密切 ,应归属于同一种 ,是否妥当仍待进一步考证。; 许化溪王卉放李那黄新祥; 关键词：细菌分类假单胞菌属

Downregulation of Runx3 closely related to the decreased Th1-associated factors in patients with gastric carcinoma: Background: Runt-related transcription factor 3 (Runx3) is a tumor suppressor gene and plays an important role...; 李雅贞纪晓昀黄新祥苏兆亮夏圣王胜军许化溪; 关键词：RUNX3 T-BET

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黄新祥