丁润生
- 作品数：108 被引量：220H指数：8
- 供职机构：南通大学附属医院更多>>
- 发文基金：江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目南通市科技局社会发展科技计划项目江苏省医学重点人才培养基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 地西他滨对MDS细胞株SKM-1的作用研究被引量：7
- 2007年
- 目的:探讨去甲基化制剂地西他滨(5-aza-2’-deoxycytidine,Decitabine)对MDS-RAEB(骨髓增生异常综合征-原始细胞增多型)细胞株SKM-1株的影响以及机制。方法:用台酚蓝拒染法研究药物对SKM-1细胞生长曲线的影响,用NBT(硝基四氮唑蓝)还原试验和流式细胞技术研究药物对细胞的分化作用,用AnnexinⅤ-FITC标记了解药物对细胞的早期凋亡作用,用RT-PCR研究药物作用后P15INK4BmRNA表达的变化。结果:地西他滨对SKM-1细胞有生长抑制作用,能促进SKM-1细胞分化和诱导早期凋亡,上调细胞P15INK4BmRNA表达。结论:地西他滨可能通过上调P15INK4BmRNA表达而促进SKM-1株的分化和诱导细胞早期凋亡。
- 杨力徐瑞容黄红铭丁润生姜胜华
- 关键词：地西他滨SKM-1
- 下调TRAF6基因表达对多发性骨髓瘤细胞增殖的影响及其机制研究被引量：4
- 2013年
- 目的探讨下调肿瘤坏死因子受体相关因子6（TRAF6）表达对多发性骨髓瘤（MM）细胞增殖的影响及其机制。方法采用RT-PCR及Westemblot技术检测TRAF6在MM细胞系KM3、U266、RPMl8226细胞及MM原代细胞的表达；构建TRAF6小干扰RNA（siRNA），转染RPMl8226细胞，荧光显微镜观察、RT-PCR和Western blot检测转染效率，CCK-8法测定不同浓度siRNA沉默TRAF6表达后细胞增殖情况，Hoechst33258／碘化丙锭（PI）双染法分析细胞凋亡率；Wester nblot法观察沉默TRAF6基因表达前后凋亡相关蛋白Bcl-2、BAX表达情况和下游NF．KB信号通路蛋白的变化。结果TRAF6mRNA和蛋白表达水平在MM细胞系和MM原代细胞均明显增高，尤以MM原代细胞为甚。50nmol／LsiRNA转染RPMl8226细胞后TRAF6mRNA相对表达水平（0．49±0．24）明显低于未转染组（1．87±0．23）及阴性对照转染组（1．74±0．35）。siRNA干扰后细胞增殖受抑，且呈剂量依赖性。细胞凋亡率由11．20％上升到51．82％，同时Bcl．2蛋白表达下调、BAX表达升高，NF—wB通路蛋白P．p65、p52的活性下降。结论TRAF6在骨髓瘤细胞中表达增高，下调TRAF6表达可明显抑制骨髓瘤细胞增殖并诱导其凋亡，其作用可能与影响骨髓瘤细胞的NF—KB经典和旁路途径信号传递有关。
- 黄红铭王信峰刘新新徐瑞容丁润生姜胜华施维
- 关键词：RNA干扰
- 硼替佐米联合NK细胞对骨髓瘤细胞株KM-3作用的影响被引量：1
- 2010年
- 目的:探讨硼替佐米联合自然杀伤(NK)细胞杀伤及诱导多发性骨髓瘤细胞株KM-3凋亡的作用。方法:WST-1法观察加入硼替佐米后,NK细胞对KM-3细胞杀伤作用的变化;Annexin-Ⅴ、PI及CD45三重免疫荧光标记,流式细胞术检测Annexin-Ⅴ+/PI-凋亡细胞及线粒体跨膜电位的变化。结果:效靶比为5∶1、10∶1和20∶1的NK细胞联合5nmol/L硼替佐米处理后12、24和48h,均显著杀伤KM-3细胞(P=0.003),杀伤率的升高呈时间依赖性(P=0.002),且显著高于NK细胞单独处理,P<0.01。效靶比为5∶1、10∶1和20∶1的NK细胞联合5nmol/L硼替佐米处理,Annexin-Ⅴ+/PI-细胞比例均增加(P=0.003),呈时间依赖性(P=0.002),且高于NK细胞单独处理,P<0.01。效靶比为5∶1、10∶1和20∶1的NK细胞联合5nmol/L硼替佐米处理后6、12和24h,KM-3细胞线粒体跨膜电位明显降低(P=0.025),呈时间依赖性(P=0.022),且低于NK细胞单独处理,P<0.05。结论:硼替佐米联合NK细胞具有更显著地杀伤并诱导KM-3细胞凋亡的作用,提示硼替佐米与NK细胞具有协同作用。
- 沈茜陆德炎陈冬梅丁润生陆伟姜胜华
- 关键词：多发性骨髓瘤细胞凋亡
- 免疫表型分析在多发性骨髓瘤诊断及鉴别诊断中的应用
- 秦燕丁润生陆伟
- 再生障碍性贫血患者血清抑制CFU-MK的增殖及调控被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨再生障碍性贫血(再障)患者血小板减少的原因,建立模型并寻找治疗对策。方法:应用甲基纤维素半固体体外培养法建立CFU-MK培养体系;混合再障血清进行培养建立再障患者血小板减少的模型;使用不同的造血细胞生长因子进行组合观察模型中CFU-MK集落生成情况和集落中巨核祖细胞的含量。结果:经过14d的培养,模型组CFU-MK集落、集簇数量明显低于正常对照组,以TPO/IL-3/IL-11/FL细胞因子组合使模型组CFU-MK的数量恢复及巨核细胞的扩增效果最好。结论:本实验建立了CFU-MK体外培养体系及再障血小板减少的模型,体外试验表明治疗再障血小板减少以TPO/IL-3/IL-11/FL为最佳组合。
- 宋国齐刘红姜胜华丁润生
- 关键词：贫血
- 慢性粒细胞白血病骨髓细胞体外培养净化作用实验研究
- 2004年
- 目的 :采用 FISH方法直接在干细胞水平对慢性粒细胞白血病 (CML )患者自体骨髓体外培养前后的间期细胞进行 bcr/abl融合基因检测 ,从而探讨 CML 骨髓细胞体外培养对自体骨髓移植物的净化作用。方法 :分离初治的慢性期 Ph+ CML 7例骨髓单个核细胞 (MNCs) ,体外培养 10 d,用免疫磁珠 (MACS)富集培养前后的 CD34+ 细胞 ,通过流式细胞仪检测培养前后 MNCs中 CD34+ 干细胞比例 ,然后用 FISH方法检测其中 bcr/abl融合基因 ,同时分别用正常人细胞及 K5 6 2细胞株作阴性及阳性对照。结果 :(1) 7例患者骨髓细胞培养前后 CD34+ 细胞中 bcr/abl融合基因平均检出率分别为 85 .3%± 4 .9%和 78%± 5 .1% ,有统计学意义 (P<0 .0 5 ) ,(2 )培养前培养体系中 CD34+ 细胞数量为 (6 .0 6 0± 1.5 6 4 )× 10 5个 ,培养后体系中的 CD34+细胞数量为 (5 .974± 1.4 2 4 )× 10 5个 ,两者无明显差异 (P>0 .0 5 )。 (3)在对照组中假阳性率为 2 .5 % ,假阴性率为 2 %。结论 :自体骨髓细胞体外培养对 CML 病人的骨髓肿瘤细胞有一定程度的净化作用 ;FISH技术直接在干细胞水平检测 bcr/abl融合基因 ,且能定量分析 ,较传统方法更适合对骨髓净化进行评价 ,为骨髓净化提供了一种更方便。
- 戴厚永陈秀芳陆德炎丁润生姜胜华徐瑞容
- 关键词：慢性粒细胞白血病体外净化荧光原位杂交BCR/ABL融合基因
- 网织血小板检测及影响因素的探讨
- 2004年
- 目的 :建立流式细胞术检测网织血小板的方法 ,探讨网织血小板的影响因素。方法 :(1)用流式细胞术双标法 ,Cellquest软件 ,CD4 1a/ SSC设门 ,检测健康人 2 6名 ,特发性血小板减少性紫癜 (ITP) 16例 ,重型再生障碍性贫血(SAA) 6例 ,慢性肝病 7例 ,骨髓增生异常综合征 (MDS) 10例的外周血网织血小板 ,并对部分病例用 RNAase处理实验进行验证。 (2 )以不同噻唑橙 (TO)浓度、TO孵育时间及实验温度条件对 10例正常人外周血网织血小板进行检测 ,探讨这些因素对实验结果的影响。结果 :(1) TO浓度 ,TO的孵育时间及温度等超过一定范围对结果均有影响。 (2 )确定了把TO的量控制在 2 0 0 μl、孵育温度在 2 0℃左右、时间为 30 min。结论 :要严格控制影响因素 。
- 陆伟丁润生王迎春
- 关键词：网织血小板流式细胞术
- 三氧化二砷治疗原发性浆细胞白血病复发一例被引量：4
- 2005年
- 徐瑞容陈秀芳丁润生
- 关键词：三氧化二砷原发性浆细胞白血病复发
- 流式细胞术检测急性淋巴细胞白血病微小残留病
- ＜正＞目的建立一种基于细胞表型异常的流式细胞术,检测急性淋巴细胞白血病微小残留病 （MRD）的方法,初步探讨其临床价值。方法对初发急性淋巴细胞白血病（ALL）患者,根据免疫分型中出现的白血病相关抗原表达异常的特征,确定检...
- 丁润生陆德炎徐瑞容陆伟尤学芬秦燕
- 文献传递
- 重组人血管内皮抑制素对多发性骨髓瘤内皮细胞增殖和迁移的影响
- 2012年
- 目的观察重组人血管内皮抑制素注射液(内皮抑素)对人脐静脉内皮细胞株(HUVEC)和多发性骨髓瘤细胞株KM3抑制增殖及诱导凋亡的作用,研究其对KM3细胞培养上清诱导的HUVEC迁移效果的影响。方法 WST-1法观察不同浓度的内皮抑素分别对HUVEC和KM3细胞株的增殖抑制作用,Annexin V-FITC法检测有效浓度的内皮抑素对HUVEC和KM3细胞株的凋亡作用,改良的Boyden小室法检测内皮抑素对KM3细胞株培养上清诱导的HUVEC迁移的影响。结果 50～500 ng/mL内皮抑素对HUVEC具有抑制增殖作用,而对KM3细胞未见明显作用。100、200 ng/mL的内皮抑素对HUVEC具有诱导凋亡作用;而对KM3细胞未见明显作用。与不加药组相比,内皮抑素能抑制KM3细胞培养上清促内皮细胞迁移的作用(P<0.01)。结论内皮抑素能抑制HUVEC的增殖及诱导其凋亡,并能抑制骨髓瘤细胞的促内皮细胞迁移作用。
- 薛英姿黄红铭徐瑞容丁润生
- 关键词：多发性骨髓瘤内皮抑素内皮细胞细胞运动
