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人B7-H4-Fc融合蛋白的表达及其应用研究被引量：2: 2013年; B7-H4分子是近年发现的一个新的协同刺激分子，它通过抑制T细胞的增殖、细胞因子的分泌以及细胞周期的进行，进而下调T细胞的免疫功能。为获取人B7．H4IgG融合蛋白，研究其对T细胞的调节效应，采用PCR法分别从pEGZ—Term／PD—L1-Fc和含人B7．H4基因序列的重组质粒中扩增出人IgGFc恒定区基因及人B7＋H4基因的胞外段序列，将两者插入逆转录病毒载体pEGZ—Term中，构建pEGZ．Term／B7．H4一Fc逆转录病毒重组载体，用脂质体法与两个辅助病毒载体共转染293T包装细胞，用含病毒颗粒的培养上清反复感染CHO细胞。用Zeocin筛选能稳定分泌人B7-H4-Fc融合蛋白的基因转染细胞并亚克隆之，经大量培养增殖，裂解细胞后收集裂解上清用ProteinG柱纯化，再经Westernblot鉴定。以体外T细胞活化体系观察其对T细胞活化的抑制作用。结果表明，成功地构建了表达人B7-H4-Fc融合蛋门的重组逆转录病毒载体；获得的CHO／B7-H4-Fc细胞能稳定分泌人B7-H4-Fc融合蛋门，该融合蛋白可以有效地抑制T细胞的活化。; 邵联波侯爵张宁顾宗江; 关键词：T细胞活化

人CD160基因转染细胞株的构建及其单克隆抗体的研制: CD160分子是糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白，是免疫超家族成员，与其特异性配体HVEM分子结合所提供的共刺激信号在T细胞的增殖，活化，细胞因子产生和B细胞增殖，活化，分泌抗体产生等方面发挥着重要的调节作用。CD160分子作为一...; 侯爵; 关键词：基因转染细胞株单克隆抗体; 文献传递

小鼠抗人CD160分子单克隆抗体制备及其生物学功能初步分析被引量：1: 2014年; CD160分子是糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定蛋白,是免疫超家族新成员,与其特异性配体HVEM分子结合所提供的共刺激信号在T细胞的增殖,活化,细胞因子产生和B细胞增殖,活化,分泌抗体产生等方面发挥着重要的调节作用。目前,市面上效果较好的IgG亚型的CD160抗体并不多,通过常规的基因克隆技术,基因重组技术,小鼠免疫技术以及经典的B淋巴细胞杂交瘤技术,获得能持续稳定分泌特异性鼠抗人CD160分子的IgG亚型单克隆抗体的杂交瘤细胞株;采用westen blot和竞争结合抑制实验,对获得的杂交瘤细胞进行生物特性方面的鉴定;采用间接免疫荧光法和流式细胞术分析CD160在健康人PBMC中T细胞表面的表达;T细胞增殖实验表明,此株单抗对于T细胞的体外增殖具有抑制作用。为进一步研究CD160分子的生物学效应提供了新的工具。; 侯爵邵联波张宁顾宗江; 关键词：单克隆抗体抗体制备生物学功能分子小鼠 T细胞增殖

鼠抗人B7-H4单克隆抗体的制备及初步鉴定: 2012年; 目的制备鼠抗人B7-H4单克隆抗体,并对其生物学特性进行初步鉴定。方法用稳定表达B7-H4分子的L929/B7-H4转基因细胞免疫6-8周龄的Balb/c小鼠。取脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合后,采用流式细胞术筛选阳性克隆,制备稳定分泌抗B7-H4单克隆抗体的细胞株,并用Western blot和Dot blot鉴定其生物学特性。细胞计数试剂盒8(CCK-8)测定T细胞增殖情况。结果成功获得1株稳定分泌抗人B7-H4单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为5C8。Western blot和Dot blot结果表明,5C8能与人B7-H4蛋白特异性结合。CCK-8实验显示,5C8可以阻断B7-H4分子对T细胞增殖的抑制作用。结论成功获得鼠抗人B7-H4单克隆抗体,为研究B7-H4分子在肿瘤中的作用提供了手段。; 房鹏徐慧刘艳平邵联波侯爵顾宗江; 关键词：杂交瘤

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侯爵