刘韬
- 作品数：16 被引量：20H指数：3
- 供职机构：第二军医大学东方肝胆外科医院更多>>
- 发文基金：国家杰出青年科学基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学哲学宗教更多>>
- 马鹿-牛种间核移植胚胎的克隆和培养
- 本试验旨在探索天山马鹿细胞核在牛卵母细胞的去分化潜能性。本试验用体细胞核移植的方法分别构建了马鹿-牛异构胚和牛-牛同构胚.试验结果表明,马鹿细胞可在牛去核卵母细胞内去分化并发育至囊胚阶段,但马鹿异构胚8-16细胞发育阻滞...
- 刘韬赛务加甫彭新荣钱其军
- 关键词：马鹿体细胞核移植细胞发育
- 文献传递
- 一种能无限自我更新的神经干细胞、其制备方法及其用途
- 本发明提供一种神经干细胞株(NSC)，该类NSC细胞株可以分离自不同种属的动物脑组织，也可以由胚胎干细胞、诱导多能干细胞和其它干细胞分化而来。其特征在于这类NSC可在体外快速增殖并稳定传代；可持续表达标记蛋白Oct4和S...
- 钱其军彭欣荣高海霞刘韬李琳芳吴孟超
- 诱发负性情绪对健康人群心脏自主神经活动的影响被引量：8
- 2011年
- 目的研究负性情绪应激对健康人群心脏自主神经活动的影响,初步探讨负性情绪在冠心病发病过程中可能的作用机制。方法健康大学生69名,采用计算机游戏诱发负性情绪,采集皮电、心率和心率变异性(HRV)等生理指标,比较各阶段各项指标的差异。结果在预期阶段和应对阶段低频功率(LF)值上升[F(2,67)=5.620,P<0.01],高频功率(HF)值下降[F(2,67)=10.773,P<0.01],LF/HF比值上升[F(2,67)=40.327,P<0.01],表明被试者在应激任务中心脏交感-迷走神经活动产生了明显改变,表现为交感神经功能的相对兴奋及迷走神经功能的相对抑制,交感-迷走神经的不平衡性增加。结论健康个体暴露于负性情绪应激时,心脏自主神经功能产生与冠心病病理状态下相似的变化特征,提示长期的负性情绪应激可能是导致个体迷走神经功能受损的原因之一。
- 刘韬邓光辉经旻
- 关键词：负性情绪心率变异性心脏自主神经通路
- 人肝癌细胞系EH-H1的建立及其相关生物学特性被引量：3
- 2009年
- 目的:采用原代培养的方法建立一株人肝癌细胞系EH-H1,并对其生物学特性进行分析。方法:将取自东方肝胆外科医院诊断为原发性肝细胞癌的组织标本分离成单细胞悬液,用含10%胎牛血清的DMEM培养液进行原代和传代培养,在普通显微镜以及电子显微镜下观察细胞的形态,并绘制细胞的生长曲线。用放射免疫法检测细胞系AFP和HBV的含量,采用染色体G显带方法进行细胞染色体核型的分析,裸鼠皮下接种细胞检测该细胞的成瘤能力。结果:成功建立一株新的人肝癌细胞系,命名为EH-H1。EH-H1细胞体外连续传代80代以上,细胞形态不变,生长周期恒定在24 h。放射免疫检测EH-H1各代细胞HBV均为阴性,AFP分泌微量(0.6μg/L)。染色体G带显示,EH-H1细胞染色体为非整倍体,以超2倍体为主。该细胞经皮下接种可使裸鼠致瘤(10/10),移植瘤病理组织学类型和分化程度与肝细胞癌一致。结论:通过原代培养建立的肝癌细胞系EH-H1与原发癌保持相似的生物学特性,可望成为一个稳定的细胞系。
- 钱炎珍黎江李林芳刘辉刘韬姜梨华施乐华苏长青吴孟超钱其军
- 关键词：肝癌细胞系原代培养生物学特性
- 人Oct4与细胞穿膜肽融合蛋白的表达
- 2010年
- 目的通过原核表达获得人Oct4(hOct4)与细胞穿膜肽融合蛋白,优化其表达方法并观察其穿膜效果。方法通过基因工程手段构建了pET原核表达载体,利用BL21(DE3)和Rosetta2(DE3)蛋白表达菌表达蛋白。Ni亲和纯化方法纯化蛋白,蛋白质印迹分析检测融合蛋白组成。将融合蛋白用罗丹明染色后加入人正常皮肤成纤维细胞株BJ观察其穿膜进入细胞情况。结果构建了pET21a(+)-hOct4-11R-His和pET21a(+)-EGFP-11R-His表达载体,转入大肠杆菌中后诱导获得了hOct4-11R-His和EGFP-11R-His融合蛋白,经蛋白质印迹分析检测表明融合蛋白正确。经BJ细胞测试,观察到融合蛋白进入细胞中。结论成功获得了hOct4-11R-His和EGFP-11R-His融合蛋白,且融合蛋白能够高效进入BJ细胞并聚集于细胞核周围。
- 周承亮徐凤青王春红刘韬彭新荣钱其军
- 关键词：重组融合蛋白质类
- 健康男性中A型行为模式对心脏自主神经活动的影响被引量：6
- 2012年
- 目的:在诱发负性情绪条件下,研究健康男性中A型行为模式对心脏自主神经活动的影响。方法:采用两因素重复测量设计,分别考察A型和B型、高TH组和低TH组、高CH组与低CH组,在三种情绪应激状态下心率变异性各频域指标的差异。结果:无论按AB型整体分类,还是按CH和TH特质分类,在心率变异性(HRV)各频域指标上组间均无显著差异,被试类型与负性情绪应激水平均无显著交互作用。而三种情绪应激状态主效应显著,均表现为:在预期阶段和应对阶段两种应激状态下,交感神经功能的相对兴奋及迷走神经功能的相对抑制,交感-迷走神经的不平衡性增加。结论:健康男性中A型行为及其部分特质对心脏自主神经活动的影响均不显著,情绪应激对心脏自主神经活动的影响是直接而显著的,并且表现为冠心病病理状态下相似的变化特征。
- 刘韬邓光辉张龙严经旻
- 野生天山马鹿皮肤成纤维细胞分离培养及核重编程初探
- 由于生态环境的不断恶化、人为的过度捕杀等诸多因素的影响，导致很多野生动物品种灭绝或处于濒临灭绝状态，品种的灭绝意味着进行细胞和分子生物学研究基本材料的永远丧失。为此，从保护生物多样性和保存种质资源的实际出发，利用现代生物...
- 刘韬
- 关键词：马鹿野生动物保护原始生殖细胞
- 文献传递
- 人HBV、HBx定向敲入p53位点大鼠胚胎干细胞株的建立
- 2012年
- 目的建立人HBV、HBx定向敲入p53位点的大鼠胚胎干细胞株,为建立相关动物模型奠定基础。方法通过PCR方法扩增出人p53基因上下游同源臂、HBV全基因组序列、HBV的X蛋白编码基因(HBx),将其插入本实验室自主构建的基因打靶通用载体pKO中,分别构建pKO-gHBV及pKO-X打靶载体。载体经SalⅠ酶切线性化后,电转入状态良好的大鼠胚胎干细胞株中,经3轮药物筛选,获得单细胞克隆。通过PCR技术筛选获得阳性细胞克隆,并进行支原体污染鉴定和核型分析。结果成功构建pKO-gHBV及pKO-X打靶载体;电转大鼠胚胎干细胞株,经3轮药物筛选,分别挑取若干细胞克隆,其中2个pKO-X细胞克隆和1个pKO-gHBV细胞克隆经PCR鉴定、支原体检测和核型分析确定结果正确。结论成功建立了人HBV、HBx定向敲入p53位点的大鼠胚胎干细胞株,为后续建立动物模型奠定了基础。
- 王艳叶真龙金华君刘韬李林芳钱其军
- 关键词：HBX基因P53基因胚胎干细胞
- 红色荧光蛋白标记的小鼠胚胎干细胞系建立及体内成瘤的初步研究
- 2015年
- 建立能够稳定表达红色荧光的小鼠胚胎干细胞系,并研究其在体内不同部位形成畸胎瘤的能力。构建含红色荧光蛋白(DsRed-Express)的表达质粒,并采用磷酸钙法包装成慢病毒转染小鼠胚胎干细胞(mESCs)。筛选得到强阳性克隆,对其进行RT-PCR检测和裸鼠、C57小鼠体内成瘤实验验证细胞特性,最后获得稳定表达红色荧光的胚胎干细胞(Red-ESCs)。Red-ESCs能够表达多能性基因,如Oct4,Sox2,Nanog等,也能在裸鼠体内成瘤。不同部位的畸胎瘤在基因表达上有差异,其中肝部形成的畸胎瘤表达肝特性基因。成功建立稳定表达红色荧光的小鼠胚胎干细胞系,其在体内形成的畸胎瘤性质受到体内环境的影响。
- 赵无恙刘韬钱其军
- 关键词：胚胎干细胞红色荧光蛋白畸胎瘤
- 重编程肝癌细胞系Huh7为多潜能干细胞样细胞
- 2012年
- 目的重编程肝癌细胞系Huh7细胞为多潜能干细胞。方法包装携带有Oct4、Sox2、Nanog、Lin28基因的慢病毒,将包装好的病毒共感染Huh7细胞,诱导多潜能干细胞样克隆细胞。采用碱性磷酸酶染色、免疫荧光、实时定量RT-PCR等方法对诱导出的细胞进行鉴定,并采用畸胎瘤实验鉴定细胞的分化潜能。结果 Huh7细胞被重编程为多潜能干细胞样细胞(命名为iHuh7),碱性磷酸酶染色呈阳性,免疫荧光实验证明其表达多潜能因子Oct4和TRA-1-60,实时定量RT-PCR实验证明其高水平表达内源性的多潜能相关基因及干细胞特异的microRNAs,体内分化实验结果表明iHuh7可以形成畸胎瘤。结论通过携带4种多潜能基因Oct4、Sox2、Nanog、Lin28的慢病毒介导的重编程,Huh7细胞可以被诱导为多潜能干细胞样细胞。
- 张建高海霞范丽金华君张敬磊李林芳刘韬钱其军
- 关键词：肝细胞癌慢病毒重编程
