夏肖萍
- 作品数：20 被引量：64H指数：6
- 供职机构：浙江大学医学院附属第四医院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金卫生部科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 百日咳鲍特菌外膜蛋白的致病性与免疫原性
- 2002年
- 百日咳鲍特菌外膜蛋白是存在于细菌表面的一组功能性蛋白质,包括P69、FhaC和BrkA,其中以P69最为重要。P69分子中的RGD-(GGxxP)_5和(PQP)_5两个富含脯氨酸结构区分别具有粘附作用和很强的免疫原性,其抗体具有较强的保护作用,可作为无细胞型百日咳疫苗中的一个重要抗原成分。P69具有多态性,百日咳流行菌株的P69已从P69A转变成以P69B或P69C为主,所引起的抗原性漂移与疫苗预防效果下降有直接关系。FhaC是该菌的一种外膜蛋白,能特异地辅助丝状血凝素分泌;BrkA不仅具有蛋白转运功能,且能抵抗抗体依赖补体介导的细胞毒作用。
- 夏肖萍
- 关键词：百日咳鲍特菌外膜蛋白免疫原性
- 甲壳素纤维织品体外抗细菌和癣菌活性的研究被引量：7
- 2003年
- 目的 观察甲壳素含量不同的针织布体外抑制或杀灭细菌或癣菌的作用。方法 采用不同细菌或癣菌接种量 (1× 10 6～ 1× 10 2 /mL) ,用体外抑菌试验和杀菌试验检测 10 0 %甲壳素纤维无纺布、2 0 %甲壳素针织布和 10 %甲壳素针织布对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、红色毛癣菌、紫色毛癣菌和石膏状毛癣菌的抗菌作用 ,实验中以普通全棉布作为对照。结果 作为对照的普通全棉布对上述细菌或癣菌无任何抑制作用。与普通全棉布比较 ,10 0 %甲壳素纤维无纺布、2 0 %甲壳素针织布和 10 %甲壳素针织布对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、红色毛癣菌、紫色毛癣菌和石膏状毛癣菌的抑制率 [抑制率 =(每毫升CFU值 每毫升接种量 ) /每毫升CFU值× % ]分别高于普通全棉布的 99.8%～ 99.9%、85 .2 %～ 89.6%和 74.2 %～ 85 .8% ,表明随甲壳素纤维含量逐渐增高 ,抑菌作用逐渐增强 (χ2 ≥ 18.2 5 ,P <0 .0 1)。所有甲壳素纤维织品均未发现有体外杀菌活性。结论 受试的甲壳素纤维织品无体外杀菌活性 ,但均有一定的体外抑制细菌或癣菌作用 ,以 10 0 %甲壳素纤维无纺布抑制作用最强 ,2 0 %甲壳素针织布次之 ,10 %甲壳素针织布较弱。
- 钟晓芝夏肖萍严杰
- 关键词：甲壳素纤维抑菌试验杀菌试验
- 大肠杆菌LTKA63突变体的构建及重组LTKA63免疫佐剂活性机理的研究被引量：1
- 2006年
- 目的 构建大肠杆菌不耐热肠毒素A亚单位（heat-labile enterotoxin subunitA，LTA）基因减毒突变体LTKA63及其原核表达系统，探讨重组LTKA63（rLTKA63）粘膜免疫佐剂活性的机制。方法采用高保真PCR从大肠杆菌44815株基因组DNA中扩增LTA基因，利用定位突变技术构建LTKA63突变体，T-A克隆后测序。采用无His-tag的原核表达载体pET-15b。构建LTKA63原核表达系统，通过SDS-PAGE鉴定表达产物。采用三色流式细胞术确定rLTKA63激活T细胞途径。结果从大肠杆菌44815株DNA模板中扩增获得预期大小的LTA基因条带。与报道的LTA序列比较，所克隆的LTA基因核苷酸和氨基酸序列相似性分别为99．03％～99．61％和98．33％～99．22％。LTA基因定位突变后获得序列正确的LT-KA63突变体。rLTKA63表达量占细菌总蛋白的15％左右。rLTKA63作用后Th1和Th2细胞较阴性对照组分别增加21．9％和36．2％。结论本文成功地构建了LTKA63原核表达系统，所表达的rLTKA能同时激活Th1和Th2细胞。
- 全胜夏肖萍胡伟航
- 关键词：大肠杆菌TH1/TH2
- 葛根素对SD大鼠全身炎症反应综合征的治疗作用及其机制研究被引量：8
- 2008年
- 目的建立全身炎症反应综合征(SIRS)SD大鼠模型,探讨葛根素对SIRS的治疗效果及其作用机制。方法采用腹腔注射酵母多糖-石蜡悬液制备SD大鼠SIRS模型。通过SIRS大鼠静脉注射葛根素后动物死亡率变化,了解葛根素治疗SD大鼠SIRS的效果。采用ELISA定量检测试剂盒,测定葛根素对SIRS大鼠外周血肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素6(IL-6)和白介素10(IL-10)水平的变化。结果注射剂量分别为750mg/kg和1000mg/kg酵母多糖-石蜡悬液时,均可诱导大鼠发生SIRS。腹腔注射1000mg/kg酵母多糖-石蜡悬液后48h,大鼠的死亡率为73.3%,但同时再静脉注射62.5mg/kg葛根素后死亡率可降至20.0%(P<0.01)。腹腔注射750mg/kg酵母多糖-石蜡悬液后24h和48h,大鼠外周血中TNF-α、IL-6和IL-10浓度分别为(32.89±5.58)pg/ml、(578.20±92.45)pg/ml、(1.35±0.21)ng/ml和(31.57±5.26)pg/ml、(546.15±89.45)pg/ml、(1.31±0.19)ng/ml,静脉注射62.5mg/kg葛根素后24h和48h的TNF-α、IL-6浓度分别降至(16.71±3.75)pg/ml、(385.30±76.34)pg/ml和(15.32±3.41)pg/ml、(363.29±68.59)pg/ml(P<0.01),IL-10浓度升至2.05±0.19ng/ml和2.08±0.20ng/ml(P<0.01)。结论本研究成功地建立了稳定的SIRS大鼠模型。葛根素对SIRS大鼠有良好治疗效果,下调促炎因子TNF-α和IL-6水平、上调抗炎因子IL-10水平可能是葛根素抗SIRS的作用机制之一。
- 夏肖萍费春荣叶爱青
- 关键词：全身炎症反应综合征大鼠模型葛根素细胞因子
- 16S rDNA多重PCR检测牙周组织感染菌及混合感染与慢性牙周炎病变程度关系的研究被引量：9
- 2005年
- 目的 建立多重 16SrDNAPCR检测慢性牙周炎 (CP)标本中牙龈卟啉单胞菌 (Pg)、伴放线杆菌 (Aa)和齿垢密螺旋体 (Td) ,了解不同感染情况与CP严重程度的关系。方法 将轻、中和重度15 2例CP患者牙周袋标本和 30名牙周健康者龈沟标本置于 2 0 0 μl裂解缓冲液中 ,10 0℃水浴 10min后取 10 μl上清液作为聚合酶链反应 (PCR)模板。常规酚 氯仿法提取的PgATCC332 77株、AaY4株、TdFM株和E .coliDH5α株DNA分别作为PCR阳性和阴性对照。采用Pg、Aa和Td 16SrDNA特异性引物 ,建立多重PCR检测上述标本。 3例Pg、Aa和TdPCR结果均阳性标本的目的扩增片段T A克隆后测序。采用 χ2 检验分析不同混合感染情况与牙周炎严重程度之间的关系。结果所建立的多重 16SrDNAPCR最低可检出 10个Pg、2 0个Aa和 2 0个Td细胞。Pg、Aa和Td 16SrDNA扩增片段与已报道的序列比较 ,相似性分别高达 99.4 5 %、97.0 8%和 96 .5 9%。 30名牙周健康者龈沟标本中 ,仅有 1名Pg(3.3% )、2名Aa(6 .7% )的 16SrDNA扩增结果阳性 ,其余标本均阴性。 15 2例CP患者牙周袋标本中 ,14 7例 (96 .7% )检出Pg、Aa和 /或Td的 16SrDNA ,5例 (3.3% )扩增结果均阴性。Pg的PCR检测阳性率 (91.5 % ,139 15 2 )明显高于Aa(72 .4 % ,110 15 2 )或Td(80 .9% ,12 3
- 占定凤刘志伟夏肖萍胡建成陈莉丽严杰
- 关键词：多重PCR检测慢性牙周炎扩增片段放线杆菌
- PhoQ/PhoP与外膜蛋白OprH在铜绿假单胞菌对氨基糖甙类抗生素耐药性中的相互关系和作用机制
- 夏肖萍严杰
- 空肠弯曲菌fliG基因敲除突变株动力、体外趋化和小鼠定植能力的改变
- 2009年
- 空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)是人类细菌性胃肠炎的病原体。趋化是细菌向合适的寄生部位定向运动,也是空肠弯曲菌在宿主空肠黏膜表面实现定植的关键起始步骤,该趋化运动由趋化相关二元信号系统(che-TCS)以MCPs→Ches→Flis/Mots方式调控。FliG是Fli蛋白家族成员,一些病原菌的FliG被证明是鞭毛马达蛋白,也是细菌鞭毛马达中开关复合体的必需组分,但空肠弯曲菌FliG在细菌趋化中的作用未明。本研究中,我们根据同源重组原理,构建空肠弯曲菌NCTC11168株fliG基因敲除(fliG-)突变株,然后对fliG-突变株的动力、趋化和定植能力进行测定。动力实验和体外趋化实验结果证实,fliG-突变株在半固体琼脂平板上的菌落直径、在硬琼脂平板上对0.2mol/L脱氧胆酸钠(SDC)的趋化聚集环直径均明显小于野生株(P<0.05)。与野生株比较,黏附于BALB/c-ByJ小鼠空肠黏膜表面以及空肠内容物中的fliG-突变株数量也明显减少(P<0.05)。实验结果表明,fliG是空肠弯曲菌鞭毛动力以及细菌感染时向空肠黏膜趋化运动的必需基因。
- 全胜夏肖萍赵欣罗依惠严杰
- 关键词：空肠弯曲菌基因敲除趋化定植
- 大肠杆菌LTKA63及LTB和霍乱弧菌CTB基因的克隆、表达和鉴定
- 基因工程疫苗多以单一蛋白作为抗原,其免疫效果常不尽人意,通常需要使用佐剂来提高此类疫苗的免疫效果.霍乱肠毒素B亚单位(CTB)一直是效果较为公认的粘膜免疫佐剂,但近年文献报道重组CTB与抗原混合后诱导S-IgA产生的能力...
- 夏肖萍
- 关键词：B亚单位基因克隆琼脂免疫扩散试验ELISA
- 文献传递
- 肺炎链球菌comD/E/C基因重组表达及ComD/C与β-内酰胺类抗生素耐药的相关性被引量：4
- 2009年
- 目的：构建肺炎链球菌调控感受态形成的二元信号传导系统（TCS）基因comD/comE/comC的原核表达系统,探讨ComD和ComC封闭后细菌耐药性变化。方法：采用PCR扩增全长comD、comE和comC基因,并用常规基因工程技术建立其原核表达系统。采用SDS-PAGE及Bio-Rad凝胶图像分析系统检测目的重组蛋白rComD、rComE和rComC表达量。免疫家兔制备rComD、rComE和rComC抗血清。检测肺炎链球菌菌株ComD和ComC被抗血清封闭后对青霉素和头孢胺噻耐药性的变化。结果：与报道序列比较,所克隆的comD、comE和comC基因核苷酸和氨基酸序列相似性分别为98.4%-99.3%和99.1%-100%。所构建的工程菌E.coli BL21DE3pET42a-comD、E.coliBL21DE3pET42a-comE和E.coli BL21DE3pET32a-comC能有效表达目的重组蛋白rComD、rComE和rComC,其产量分别为细菌总蛋白的28%、25%和35%。rComD、rComE和rComC抗血清免疫双扩散效价分别为1∶4、1∶4和1∶8。ComD和/或ComC被抗血清封闭后,头孢胺噻敏感菌株可出现耐药性,但耐药菌株耐药性无明显改变,也不影响各菌株对青霉素的耐药性。结论：本研究成功地构建了肺炎链球菌comD/come/comC基因原核表达系统,为深入研究感受态形成相关TCS与耐药性关系奠定了基础。ComD和ComC与肺炎链球菌对头孢胺噻耐药性有关。
- 樊欢孙爱华夏肖萍孙琦严杰
- 关键词：Β内酰胺酶类基因表达重组蛋白质类
- 内置LTB幽门螺杆菌UreB-HpaA两价口服基因工程疫苗的实验研究
- 严杰毛亚飞孙爱华罗冬娇潘建平陈学军范兴丽夏肖萍陈喆梁韶辉徐飏
- 幽门螺杆菌感染可引起胃炎、消化道溃疡，且与胃癌发病直接相关。人类对幽门螺杆菌易感，各国家人群中感染率均高达50%以上。药物治疗幽门螺杆菌感染有良好疗效，但存在停药后再感染、诱导耐药、药物副作用等问题。接种疫苗是预防和控制...
- 关键词：
- 关键词：幽门螺杆菌基因工程疫苗口服
