张中宇 作品数:17 被引量:57 H指数:3 供职机构: 哈尔滨医科大学附属第二医院 更多>> 发文基金: 黑龙江省自然科学基金 国家自然科学基金 黑龙江省海外学人科研资助项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
活体染料羧基荧光素乙酰乙酸对兔眼虹膜色素上皮细胞体外染色的研究 被引量:2 2006年 目的探讨活体染料羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记兔眼虹膜色素上皮(IPE)细胞的可行性。方法使用酶消化加机械分离的方法分离培养兔眼IPE细胞,将传3~4代的IPE细胞用2.5、5、10、20、40μmol/L浓度的CFSE分别作用1、5、10min进行染色,通过观察染色后的细胞荧光强度和细胞贴壁率筛选出最理想的标记条件。采用流式细胞术追踪检测标记的IPE细胞的荧光强度变化。用免疫荧光抗体标记法检测此染色剂有无渗漏以及是否对周围细胞着染。结果浓度为20μmol/L的CFSE 37℃下水浴作用1min为IPE细胞染色、观测、研究的最适条件。流式细胞仪和荧光显微镜观察结果显示,CFSE对IPE细胞染色可持续4周以上,未发生染料渗漏或转染其它细胞,且此浓度的CFSE不影响细胞的性状。结论活体染料CFSE是一种染色率高,追踪时间长,应用简便安全可靠的标记兔IPE细胞的新方法。 彭绍民 张中宇 黎晓新 丛丽丹关键词:荧光染料 虹膜 3D可视技术应用于黄斑前膜剥除术初步研究 被引量:1 2017年 目的:应用3D可视技术显微镜完成黄斑前膜剥除术并观察其疗效.方法:3D手术组9例9只眼,女5例,男4例,对照组为传统手术组,10例10只眼,女6例,男4例.手术采用23G显微技术中轴部PPV常规撕除黄斑前膜.术中两组分阶段记录对比其手术时间的变化,术后随诊两组患者视力、眼压及CRT的变化.结果:传统手术组与3D可视手术组的黄斑前膜染色及撕除的手术时间比较,差异有统计学意义(P<0.05),而术后的眼内压及CRT的变化比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论:3D可视技术在眼科领域是一项新的实用性应用,从初步研究中观察,其能够完成视网膜前膜剥除手术. 张中宇 孙大卫关键词:染色 特发性黄斑前膜早期诊断及内界膜剥除手术治疗疗效观察 张中宇活体染料羧基荧光素乙酰乙酸标记视网膜色素上皮细胞的体外研究 被引量:3 2006年 彭绍民 丛丽丹 张中宇 黎晓新关键词:视网膜色素上皮细胞 体外研究 淋巴细胞增殖 移植细胞 继发性改变 视力丧失 外泌体在眼底疾病发病及治疗中的作用 被引量:1 2021年 外泌体是细胞内的多囊泡体通过与细胞质膜融合后主动分泌到细胞外的小囊泡。外泌体内含有多种活性物质,其在细胞间通讯、疾病进展及作为生物标记物方面的作用已渐被眼底疾病的学者关注。研究显示外泌体参与了湿性年龄相关性黄斑变性病理过程,而间充质干细胞外泌体能够降低湿性年龄相关性黄斑变性患者的血管内皮生长因子转录和翻译;在大鼠糖尿病性视网膜病变血浆中研究发现含有IgG的外泌体可激活视网膜内的经典补体途径促进内皮损伤,应用含有miR-126间充质干细胞衍生的外泌体可限制内皮细胞损伤;在缺血性视网膜病变研究中骨髓间充质干细胞的外泌体可使缺血模型鼠视网膜功能恢复;玻璃体切除联合人脐带组织分离的间充质干细胞外泌体填塞对黄斑裂孔具有辅助治疗作用;视网膜脱离患者使用间充质干细胞分泌的外泌体可抑制光感受器细胞的凋亡;在葡萄膜黑色素瘤患者中外泌体标记物检测有希望成为葡萄膜黑色素瘤的早期诊断手段;在早产儿视网膜病变中小胶质细胞分泌的外泌体具有保护作用等。对外泌体系统的了解及其与眼底疾病中的信号传递机制及疾病转归过程的认识,对优化眼底疾病防治具有重要意义。 范晓乐 蒋博 孙大卫 张中宇关键词:外泌体 眼底疾病 CFDA-SE标记虹膜色素上皮细胞的自体移植 被引量:3 2007年 目的探讨兔眼自体虹膜色素上皮细胞(iris pigment epithelial cells,IPECs)羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)标记后,采用单通道内路移植方法将传代的IPECs移植于视网膜神经上皮层下的可行性。方法取兔眼自体虹膜细胞分离培养并传代,于第3代经CFDA-SE染色后移植到自体视网膜神经上皮层下。术后不同时间应用彩色眼底照相、激光扫描检眼镜、光学相干断层扫描进行活体观察,不同时间点对移植眼进行切片并常规染色及免疫组化,用光学显微镜对移植细胞进行观察和评价。实验数据采用两均数的等效检验,以0.5倍标准差作为等效界值观察移植前后ZO-1和Actin表达情况。结果移植术后观察显示移植区界限清晰;激光扫描检眼镜可观察到移植区内荧光;光学相干断层扫描和HE染色均显示移植区神经上皮层下有色素上皮细胞堆积,并随时间推移堆积逐渐变平。经免疫组化显示移植区ZO-1、Actin呈棕色点,有规律的间断分布在Bruch膜上,IPECs嵌插在原始的RPECs间,且形成完整的单层。结论CFDA-SE是一种快捷、稳定、安全的活体细胞染料,在IPECs移植中可作为理想的标记物应用;我们首次使用的单通道内路移植方法具有手术快捷简单、安全、并发症少等优点。 孙大卫 丛丽丹 彭绍民 宁静 鲍延丽 张中宇关键词:虹膜 色素上皮 上皮细胞 细胞移植 T&E方案治疗糖尿病性黄斑水肿 2021年 糖尿病性黄斑水肿(diabetic macular edema,DME)的临床一线治疗方法为玻璃体注射抗血管内皮生长因子药物。治疗并延长方案(treat and extend,T&E)是一种主动治疗方案,患者接受治疗至病灶稳定,在随访期间可根据疾病是否稳定来延长或缩短治疗间隔,该方案正逐步应用于DME。与现有常用的治疗方案相比,T&E方案降低每月固定方案注射次数及过度治疗的风险,同时避免每2个月方案治疗不足的可能;与按需治疗方案相比,可依据最佳矫正视力或中央视网膜厚度来调整随访间隔,通过规律地治疗提高视力并改善解剖结构。但目前T&E方案设计尚无统一标准,尚需更多的临床研究进一步规范。 尹立东 蒋博 张中宇 孙大卫关键词:糖尿病性黄斑水肿 抗血管内皮生长因子 二元应对干预对糖尿病视网膜病变患者及其配偶应对能力与家庭功能的影响 被引量:18 2019年 目的探讨二元应对干预对糖尿病视网膜病变患者及其配偶应对能力与家庭功能的影响。方法采取方便抽样的方法,选取2017年12月至2018年12月在本院接受治疗的糖尿病视网膜病变患者及其配偶136对为研究对象。随机分为对照组69对和试验组67对。对照组采用常规护理模式进行护理,试验组患者在常规护理基础上采用二元应对干预措施。6个月后,比较两组患者及其配偶应对能力与家庭功能情况的差异。结果试验组患者及其配偶的压力沟通、情感支持、合作问题、授权应对及满意度得分均高于对照组(P<0.05);消极应对得分低于对照组(P<0.05)。试验组患者及其配偶的家庭亲密度、适应性两个维度得分均高于对照组(P<0.05)。结论二元应对干预提高了糖尿病视网膜病变患者及其配偶的应对能力与家庭功能状况,为维护夫妻间长期、良好的照护关系提供帮助。 杨金丽 张中宇 李新雨关键词:糖尿病视网膜病变 配偶 家庭功能 双氯酚酸钠在玻璃体切割术中的应用及其对视网膜结构的影响 被引量:3 2007年 目的研究非甾体类抗炎药双氯酚酸钠(diclofenacsodium,DFS)在兔眼玻璃体切割术灌注液中的应用及其对视网膜结构的影响,寻找此药眼内应用的安全剂量。方法30只健康成年青紫蓝兔随机分为5组,每组6只,左右眼均行玻璃体切割术,左眼为对照组,玻璃体切割术中灌注液为平衡盐溶液(BSS);右眼为实验眼,术中各组500mL灌注液BSS中分别加入25mg、50mg、75mg、100mg、150mgDFS。术前及术后1d、4d、7d、14d、21d、28d分别行双眼闪光视网膜电图(electroretinography,ERG)检查,在14d、28d分别摘除眼球行光学显微镜和透射电镜检查。结果25mg、50mg剂量组,术后1dERG明、暗适应b波波幅比率显著下降,且与术前相比具有显著意义(P<0.05),4d后进入恢复期,10d达到正常水平(P>0.05);75mg、100mg、150mg剂量组,术后1dERG明、暗适应b波波幅比率显著下降,且与术前相比具有显著意义(P<0.05),4d后进入恢复期,14d达到稳定,但仍低于正常(P<0.05)。150mg剂量组可见晶状体后囊混浊、视网膜前少许出血、视盘血管迂曲扩张等改变;75mg、100mg、150mg剂量组光学显微镜和透射电镜检查结果为视网膜组织已出现水肿、细胞核染色质浓缩集聚、细胞坏死等可逆或不可逆变化。结论DFS在玻璃体切割术灌注液中的安全剂量为100mg·L-1,150mg·L-1剂量时对视网膜各层结构产生毒性。 彭绍民 王绍伟 张中宇 孙大卫关键词:双氯酚酸钠 毒性 玻璃体切割术 视网膜电图 一种体外培养兔眼色素上皮细胞的新方法 2009年 目的建立一种体外培养的兔眼视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞的新方法。方法采用Dispase对兔眼RPE细胞进行原代培养,免疫组化通过MNF116和s-100鉴定细胞纯度。将细胞接种于铺有laminin的Transwell滤膜上,观察到细胞融合后对膜切面行透射电子显微镜观察;并通过细胞ZO-1免疫荧光化学法了解紧密连接的形成情况。结果成功培养了原代兔眼RPE细胞并且无其它细胞污染。透射电镜可见细胞表面有大量微绒毛并形成紧密连接。ZO-1免疫荧光化学结果可见细胞形态基本呈多边形,紧密连接基本形成。结论兔眼RPE细胞能够用Dispase成功分离并培养。 代丽丽 丛丽丹 孙大卫 焦万秋 张中宇 彭绍民关键词:视网膜色素上皮 细胞培养