孙大卫 作品数:37 被引量:93 H指数:6 供职机构: 哈尔滨医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 黑龙江省自然科学基金 黑龙江省卫生厅科研项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 电子电信 更多>>
外泌体在眼底疾病发病及治疗中的作用 被引量:1 2021年 外泌体是细胞内的多囊泡体通过与细胞质膜融合后主动分泌到细胞外的小囊泡。外泌体内含有多种活性物质,其在细胞间通讯、疾病进展及作为生物标记物方面的作用已渐被眼底疾病的学者关注。研究显示外泌体参与了湿性年龄相关性黄斑变性病理过程,而间充质干细胞外泌体能够降低湿性年龄相关性黄斑变性患者的血管内皮生长因子转录和翻译;在大鼠糖尿病性视网膜病变血浆中研究发现含有IgG的外泌体可激活视网膜内的经典补体途径促进内皮损伤,应用含有miR-126间充质干细胞衍生的外泌体可限制内皮细胞损伤;在缺血性视网膜病变研究中骨髓间充质干细胞的外泌体可使缺血模型鼠视网膜功能恢复;玻璃体切除联合人脐带组织分离的间充质干细胞外泌体填塞对黄斑裂孔具有辅助治疗作用;视网膜脱离患者使用间充质干细胞分泌的外泌体可抑制光感受器细胞的凋亡;在葡萄膜黑色素瘤患者中外泌体标记物检测有希望成为葡萄膜黑色素瘤的早期诊断手段;在早产儿视网膜病变中小胶质细胞分泌的外泌体具有保护作用等。对外泌体系统的了解及其与眼底疾病中的信号传递机制及疾病转归过程的认识,对优化眼底疾病防治具有重要意义。 范晓乐 蒋博 孙大卫 张中宇关键词:外泌体 眼底疾病 视网膜色素上皮细胞移植中CFDA-SE及免疫组化研究 被引量:3 2006年 目的探讨新型染料羧基荧光素乙酰乙酸[5-(and-6)-carboxyfluresceindiacetate,succinimidylester,CFDA-SE]与免疫组化方法相结合在视网膜色素上皮细胞(retinalpig-mentepithelialcells,RPECs)移植中应用的可行性。方法用CFDA-SE(10μmol·L-1)标记供体RPECs,37℃下孵育1min,通过玻璃体视网膜显微手术将细胞悬液植入同种异体青紫蓝兔视网膜下腔,分别在30d和60d时处死实验兔,荧光显微镜下观察标记的供体细胞,同时作紧密连接的结构蛋白ZO-1和细胞骨架蛋白Actin的免疫组化分析。结果荧光显微镜下观察到标记的供体RPECs可嵌插于宿主RPECs之间,铺成单层结构,并形成新的细胞间紧密连接,ZO-1、Actin的免疫组化结果经统计分析表明与原位RPECs之间的表达无显著差异(ZO-1:︱t︱=2.05,P<0.05;Actin:︱t︱=2·14,P<0.05)。结论CFDA-SE是一种快捷、稳定、安全的活体细胞染料,可作为理想的标记物应用于RPECs移植中。 刘春艳 孙大卫 宁静 彭绍民关键词:视网膜色素上皮细胞 免疫组化 CFDA-SE标记虹膜色素上皮细胞的自体移植 被引量:3 2007年 目的探讨兔眼自体虹膜色素上皮细胞(iris pigment epithelial cells,IPECs)羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)标记后,采用单通道内路移植方法将传代的IPECs移植于视网膜神经上皮层下的可行性。方法取兔眼自体虹膜细胞分离培养并传代,于第3代经CFDA-SE染色后移植到自体视网膜神经上皮层下。术后不同时间应用彩色眼底照相、激光扫描检眼镜、光学相干断层扫描进行活体观察,不同时间点对移植眼进行切片并常规染色及免疫组化,用光学显微镜对移植细胞进行观察和评价。实验数据采用两均数的等效检验,以0.5倍标准差作为等效界值观察移植前后ZO-1和Actin表达情况。结果移植术后观察显示移植区界限清晰;激光扫描检眼镜可观察到移植区内荧光;光学相干断层扫描和HE染色均显示移植区神经上皮层下有色素上皮细胞堆积,并随时间推移堆积逐渐变平。经免疫组化显示移植区ZO-1、Actin呈棕色点,有规律的间断分布在Bruch膜上,IPECs嵌插在原始的RPECs间,且形成完整的单层。结论CFDA-SE是一种快捷、稳定、安全的活体细胞染料,在IPECs移植中可作为理想的标记物应用;我们首次使用的单通道内路移植方法具有手术快捷简单、安全、并发症少等优点。 孙大卫 丛丽丹 彭绍民 宁静 鲍延丽 张中宇关键词:虹膜 色素上皮 上皮细胞 细胞移植 糖尿病性黄斑水肿的全身相关因素 被引量:5 2020年 以往对糖尿病性黄斑水肿(diabetic macular edema,DME)防治的基础与临床研究多在眼部,对其与全身因素相关性的研究较少。近年有较充足的证据表明,控制全身相关因素如高血糖、高血压、高血脂等,可在一定程度上降低DME的治疗成本。如能早发现、早治疗,可改善DME的预后。 杨塑 孙大卫关键词:糖尿病视网膜病变 糖尿病性黄斑水肿 全身因素 T&E方案治疗糖尿病性黄斑水肿 2021年 糖尿病性黄斑水肿(diabetic macular edema,DME)的临床一线治疗方法为玻璃体注射抗血管内皮生长因子药物。治疗并延长方案(treat and extend,T&E)是一种主动治疗方案,患者接受治疗至病灶稳定,在随访期间可根据疾病是否稳定来延长或缩短治疗间隔,该方案正逐步应用于DME。与现有常用的治疗方案相比,T&E方案降低每月固定方案注射次数及过度治疗的风险,同时避免每2个月方案治疗不足的可能;与按需治疗方案相比,可依据最佳矫正视力或中央视网膜厚度来调整随访间隔,通过规律地治疗提高视力并改善解剖结构。但目前T&E方案设计尚无统一标准,尚需更多的临床研究进一步规范。 尹立东 蒋博 张中宇 孙大卫关键词:糖尿病性黄斑水肿 抗血管内皮生长因子 活体染料标记原代IPEC眼内移植的研究 2007年 目的探讨应用活体染料羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)标记原代的兔自体虹膜色素上皮细胞(iris pig-ment epithelial cell,IPEC),并移植于视网膜神经上皮层下的可行性。方法取原代兔眼自体虹膜色素上皮细胞消化分离,经CFDA-SE染色后移植到视网膜神经上皮层下。术后不同时间应用彩色眼底照相、激光扫描检眼镜(SLO)、光学相干断层扫描(OCT)进行活体观察,不同时间点对移植眼进行切片并常规染色及免疫组化,用光学显微镜对移植细胞进行观察和评价。结果自体移植术后观察显示移植区界限清晰;SLO可观察到移植区内荧光分布;OCT和HE染色均显示移植区神经上皮层下有移植物堆积,并随时间推移逐渐变平。免疫组化显示移植区ZO-1、Actin呈棕色点,有规律地间断分布在Bruch膜上,IPEC嵌插在原始的视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelial cell,RPEC)间,且形成完整的单层。结论CFDA-SE作为活体染料标记自体IPEC进行移植时,是一种快捷、稳定、安全的活体细胞染料,可作为理想的标记物应用。 孙大卫 鲍延丽 焦万秋 彭绍民关键词:虹膜色素上皮细胞 细胞移植 原代细胞 CFDA-SE标记兔眼色素上皮细胞视网膜下移植的研究 目的:探讨应用活体染料羧基荧光素乙酰乙酸[CFDA-SE]分别标记乳兔视网膜色素上皮(RPE)细胞和成兔虹膜色素上皮(IPE)细胞的可行性,观察标记的供体细胞在体内移植后的分布、移行和与受体RPE细胞的整合及屏障重建情况... 孙大卫关键词:视网膜疾病 细胞器移植 血管造影 3D可视技术应用于黄斑前膜剥除术初步研究 被引量:1 2017年 目的:应用3D可视技术显微镜完成黄斑前膜剥除术并观察其疗效.方法:3D手术组9例9只眼,女5例,男4例,对照组为传统手术组,10例10只眼,女6例,男4例.手术采用23G显微技术中轴部PPV常规撕除黄斑前膜.术中两组分阶段记录对比其手术时间的变化,术后随诊两组患者视力、眼压及CRT的变化.结果:传统手术组与3D可视手术组的黄斑前膜染色及撕除的手术时间比较,差异有统计学意义(P<0.05),而术后的眼内压及CRT的变化比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论:3D可视技术在眼科领域是一项新的实用性应用,从初步研究中观察,其能够完成视网膜前膜剥除手术. 张中宇 孙大卫关键词:染色 双氯芬酸钠滴眼液在家兔房水中的吸收 被引量:2 2001年 目的 建立房水中双氯芬酸钠的高效液相色谱测定方法 ,并测定家兔用药后眼房水中药物浓度。方法 采用C18色谱柱 ,流动相为甲醇 水 冰醋酸 (80∶2 0∶0 .5 ) ,房水用甲醇沉淀蛋白后 ,上清液挥干 ,再用甲醇复溶后进样。结果 本方法线性范围为 10~ 5 0 0ng·mL-1,最低检测浓度为 10ng·mL-1。 3种浓度的平均回收率达到 99.7% ,日内和日间RSD均小于 10 % ,家兔单剂量应用 0 .1%双氯芬钠滴眼液 5 0 μL后 ,房水中 15min即可检测到药物 ,在给药后 1h达到最高浓度。 结论 本方法灵敏 ,准确 ,精密。 孙考祥 彭绍民 王绍伟 孙大卫 吴如金关键词:双氯芬酸钠 滴眼液 房水 家兔 血管黏附蛋白-1在眼科疾病中的研究进展 2013年 血管黏附蛋白-1(vascular adhesion protein-1,VAP-1)是一种具有黏附功能和酶催化活性双重功能的黏附分子。目前研究发现,VAP-1在炎症部位与其他黏附分子一起引导白细胞聚集、外渗,是葡萄膜炎、年龄相关性黄斑变性、糖尿病视网膜病变、结膜肿瘤等眼科疾病的重要治疗靶点。VAP-1还可作为靶分子进行活体炎症成像,这可能是一种早期诊断和描述炎症性疾病的新途径。VAP-1很可能为眼科疾病提供新的研究方向和治疗策略,本文对VAP-1在眼科疾病中的研究进展作一综述。 罗文婷 孙大卫关键词:葡萄膜炎 年龄相关性黄斑变性 糖尿病视网膜病变 结膜肿瘤