张书
- 作品数:4 被引量:28H指数:4
- 供职机构:四川大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 盐生杜氏藻3-磷酸甘油脱氢酶不同结构域蛋白的表达纯化及其抗体的制备与分析被引量:6
- 2009年
- 盐生杜氏藻(Dunaliella salina)是迄今为止世界上发现的最耐盐的真核光合生物,而甘油是盐藻用于调节细胞内外渗透压变化的关键调渗物质.3-磷酸甘油脱氢酶(GPDH)是盐生杜氏藻甘油合成途径中的关键酶.与已经报道的其它物种的GPDH基因不同,盐生杜氏藻3-磷酸甘油脱氢酶(Ds.GPDH)基因具有两个独立的功能结构域,即丝氨酸磷酸化酶结构域(SGPP domain)和3-磷酸甘油脱氢酶结构域(GPD domain).本实验在已克隆的Ds.GPDH2基因的基础上,以含GPDH2全基因序列的T质粒载体(pMD18-T-GPDH2)为模板,PCR扩增分别得到两个单结构域片段(SGPP与GPD),以及双结构域片段(GPDH),构建了pET32a-SGPP、pET32a-GPD和pET32a-GPDH三种原核表达载体,并在大肠杆菌中成功表达.纯化蛋白制备抗原,制备出3个多克隆抗体.WesternBlot和交叉反应分析显示通过重组蛋白制备的多克隆抗体具有很高的特异性.
- 黄秦曹瑜吴鹏史岩张书乔代蓉曹毅
- 关键词:盐生杜氏藻3-磷酸甘油脱氢酶纯化多克隆抗体WESTERNBLOT
- 不同光照下盐生杜氏藻光捕获蛋白基因lhcb和叶绿素a合成酶基因cao的表达变化被引量:5
- 2010年
- 由于光捕获天线蛋白(LHCⅡ)编码基因(lhcb)家族同源性较高,以往研究只能从总体上反映家族基因的变化,对各个编码基因的表达研究较少.本研究以光合单细胞生物盐生杜氏藻(Dunaliella salina)为材料,应用实时PCR的方法,系统研究了lhcb基因家族成员在光环境转换过程中的表达变化.结果表明,当由正常培养光环境转移到高光条件下时,lhcb基因家族成员的表达整体上受抑制,但各个基因的表达变化趋势随时间变化不尽相同.在强光照下,lhcb1、lhcb2.1、lhcb2.23h时有最低的表达积累量,而lhcb3却有较高的表达量.细胞转入黑暗环境后,各个基因的转录水平升高,变化趋势基本相同,在3h时均有较高的表达量,只有lhcb2.1在1h时的表达量最高.叶绿素加氧酶编码基因cao的变化与lhcb3基本相同.LHCⅡ蛋白量在高光下降低,在黑暗条件下升高.叶绿素含量在高光条件下明显下降,叶绿素a/b值升高,黑暗条件下则相反.
- 陈卫民张书费保进李伟于荣清徐辉乔代蓉曹毅
- 若尔盖高原湿地纤维素降解菌组成及产酶特性被引量:6
- 2010年
- 以青藏高原湿地若尔盖地区不同生境土壤为材料,通过富集,计算降解圈个数,分析该地区纤维素降解菌的含量.分离得到15株具有纤维素降解能力的菌株,从中复筛得到一株降解能力较强的菌株3C-6.12,经16S rRNA和Biolog鉴定为野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris).该菌株在以质量比例3:2的麸皮与玉米芯为发酵培养基时,酶活最高为66.44U/mL,最适pH值为6~8,最佳生长温度为30℃.该菌株的成功选育为后续高效、充分利用纤维素类物质生产生物能源提供了很好的菌种来源.
- 冯晓虎朱卫华吴弘谢洁张书巨艳乔代蓉曹毅
- 关键词:纤维素降解菌野油菜黄单胞菌湿地青藏高原
- 一株耐高温α-淀粉酶生产菌的分离鉴定及其产酶条件优化被引量:11
- 2008年
- 作者从四川成都及其周边地区的淀粉厂,米厂,面粉厂等样品采集地的土样和污水当中筛选到16株酶活较高的野生型α-淀粉酶生产菌,其中一株编号为C-1的菌株酶活最高,液体发酵酶活达到20 U/mL.这株菌能在高温(50℃)下生长良好.在电子显微镜观察,有明显芽孢,生理生化常规鉴定为枯草芽孢杆菌(B.subtilis),进一步的16S rDNA分子鉴定确定该菌属于枯草芽孢杆菌,命名为B.subtilisC-1.并对B.subtilisC-1的产酶条件进行优化.
- 徐颖刘琦王乐张书朱俊曾竞曹毅乔代蓉
- 关键词:Α-淀粉酶产酶条件酶学特性