张弢
- 作品数：11 被引量：40H指数：4
- 供职机构：中国药科大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- IL-21在自身免疫性疾病中的作用被引量：1
- 2008年
- 白细胞介素21（IL-21）是IL-2家族中的新成员，主要由活化的CD4^＋T细胞产生。IL-21具有广泛的生物学功能，主要调节T细胞、B细胞、NK细胞的功能。近年来IL-21与自身免疫性疾病的关系得到了广泛的研究，为自身免疫性疾病的治疗提供了新的思路和方法。
- 浦迪张弢王旻
- 关键词：IL-21自身免疫性疾病T细胞B细胞NK细胞
- 全人源抗白介素21单链抗体的筛选与鉴定被引量：1
- 2012年
- 白介素21是具有免疫调节功能的I型细胞因子,在异常状态下可介导类风湿关节炎、系统性红斑狼疮和炎性肠病等多种自身免疫性疾病。为了拮抗白介素21的生物学活性,采用固相亲和筛选的方法,从Griffin1全人源噬菌体单链抗体库中筛选出抗白介素21的单链抗体。经过4轮亲和筛选,可溶性ELISA结果表明65%的噬菌体克隆可与IL-21发生特异性结合,经基因测序挑选出高亲和力的单链抗体FG8,转化至大肠杆菌HB2151中进行可溶性表达,采用镍柱亲和层析对表达的蛋白进行纯化后,SDS-PAGE和Western blot检测单链抗体相对分子质量为30 k。定量ELISA分析显示,单链抗体FG8与白介素21的结合呈浓度依赖性,可进一步研究用于炎症及自身免疫性疾病的诊断及靶向性治疗。
- 吴沁航王彤张弢张娟王旻
- 关键词：白介素21噬菌体展示单链抗体酶联免疫法自身免疫性疾病
- 抗体药物研究进展与趋势被引量：9
- 2008年
- 自1986年第1个抗体药物OKT-3上市以来,抗体药物经历了20年的发展。在1986-1996年间,早期的鼠源抗体药物存在抗原性强、耐受性差的缺点,随后通过基因工程手段发展了低抗原性的嵌合抗体、人源化抗体。随着噬菌体呈现、大肠杆菌呈现、酵母呈现和核糖体呈现技术的成熟,最终通过体外筛选发展出了全人源抗体。抗体药物经历了早期10年的低谷期,1996年开始进入快速发展的轨道.在人源化抗体技术成熟后,进入临床试验的药物中抗体药物增长率显著高于小分子药物。同靶点类似抗体药物同时进入市场说明了抗体药物专利无法形成有效垄断。笔者概述了抗体药物的发展简史,列出自OKT-3上市以来美国FDA批准的用于诊断、预防、治疗的抗体药物,并对其中具有代表性的Vectibix与Humira进行了概述,并提出抗体药物现在所面临的4个方面的挑战。
- 张弢陈卫浦迪张娟王旻
- 关键词：抗体药物
- 全人源抗人白介素21单链抗体
- 本发明属基因工程抗体技术领域，具体涉及基因工程设计、表达的与人白介素21有特异性亲和力的全人源多肽类单链抗体。此工程抗体多肽是由一条柔性连接肽将抗体的轻链和重链可变区首尾相连而形成的，轻链和重链可变区的骨架与互补决定区均...
- 王旻张弢浦迪陈卫张娟李海鑫
- 文献传递
- 杜氏藻多糖生物活性研究被引量：5
- 2008年
- 研究杜氏藻(Dunaliella.Salina)多糖的生物活性,杜氏藻总多糖PDS及酸性多糖组分PDS1、PDS2对Hela细胞、Lovo细胞以及SGC7901细胞株的毒性实验表明PDS1在10～500μg/ml浓度下均有类似于5-氟脲嘧啶的作用,但大剂量长时间后有促进细胞增殖的作用;抗流感病毒实验表明PDS对细胞有明显的保护作用,其病毒抑制作用随多糖浓度增强而增强;淋巴细胞转化实验中PDS、PDS1和PDS2均对淋巴细胞增殖有刺激作用,在200μg/ml浓度以上时效果显著(P<0.01)
- 徐莹王颖张弢王旻
- 关键词：杜氏藻硫酸多糖生物活性抗肿瘤抗病毒
- 全人源抗人肿瘤坏死因子-α单链抗体
- 本发明公开了与人肿瘤坏死因子-α(hTNF-α)特异性结合的全人源单链抗体。本发明的抗体由一条柔性连接肽将抗体的轻链和重链可变区首尾相连而形成。本发明抗体在体外测试可中和hTNF-α的活性，可以用于检测hTNF-α，也适...
- 王旻陈卫张娟李海鑫张弢
- 文献传递
- 高纯度木瓜蛋白酶的分离纯化和性质研究被引量：19
- 2006年
- 目的建立木瓜蛋白酶的分离纯化工艺路径。方法采用初步采集处理,20%,40%硫酸铵分级沉淀、SP-sephadex C50柱色谱、羟基磷灰石柱色谱,从番木瓜乳汁中分离纯化木瓜蛋白酶。结果获得比活为1 184 U/mg的纯酶,活力回收率为55.79%,纯化的酶经SDS-PAGE呈单一条带,高效液相色谱呈单一条带,纯度达到99.31%。该酶耐高温,最适pH值为7.2,对酪蛋白的动力学常数(Km)为3.5×10-5mol/L。结论应用此方法成功纯化了高纯度的木瓜蛋白酶。
- 王丽彬张弢王旻
- 关键词：木瓜蛋白酶木瓜纯化酶学性质
- 人白介素21Trx融合表达、纯化、复性以及活性检测被引量：4
- 2009年
- 全合成人IL-21基因,将IL-21编码区使用XhoI和NcoI位点插入pET32a构建原核表达载体,IPTG诱导表达,经DEAE-SepheroseFF柱和HisTrapFF柱纯化,SDS-PAGE和Western印迹检测融合蛋白的表达,MTT法检测Trx-hIL-21对Jurkat细胞的作用。获得了人IL-21的基因序列,SDS-PAGE检测可见33ku大小的融合蛋白表达,Western印迹表明其可以与抗IL-21单抗反应。Trx-hIL-21以剂量依赖的方式作用于Jurkat细胞的生长,当PHA浓度小于2μg/ml时,IL-21能刺激细胞增殖;当PHA浓度大于2μg/ml时,IL-21能抑制细胞增殖。
- 张弢浦迪陈卫王旻
- 关键词：原核表达复性纯化
- 人血管内皮生长因子受体KDR胞外3区的表达与配体结合活性的鉴定被引量：1
- 2008年
- 血管内皮生长因子受体(VEGFR)是血管内皮生长因子的特异性受体,VEGFR-2在介导VEGF刺激内皮细胞增殖及血管通透性等生物学活性中起重要作用。在大肠杆菌中实现可溶性的人血管内皮生长因子受体KDR胞外3区的表达,并鉴定其与配体结合的活性。采用重叠PCR的方法合成人血管内皮生长因子受体KDR胞外3区基因,将该基因与高效表达载体pET-32a重组,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)中,表达产物依次经过CM阳离子交换树脂和镍柱亲和层析纯化。利用ELISA法和体外抑制VEGF刺激的人脐静脉内皮细胞增殖实验检测表达产物与配体结合的活性。SDS-PAGE显示,目的蛋白主要以可溶性Trx-KDR3融合蛋白表达于胞质,30oC时1 mmol/L IPTG诱导细菌5 h融合蛋白表达量约占胞质可溶性总蛋白的20%,经CM阳离子交换树脂和镍柱亲合层析纯化得到纯度为95%的产物,Western blotting鉴定是目的蛋白。ELISA和体外HUVEC细胞增殖实验显示,表达产物具有特异性结合hVEGF165的活性,且该作用呈一定的浓度依赖性。具有配体特异性结合活性的可溶性人血管内皮生长因子受体KDR胞外3区成功表达,为靶向血管抗肿瘤治疗和相关抗体的研究奠定了基础。
- 张娟张艳丽李海鑫陈卫张弢王旻
- 关键词：血管内皮生长因子KDR
- 全人源抗人肿瘤坏死因子－α单链抗体
- 本发明公开了与人肿瘤坏死因子－α(hTNF－α)特异性结合的全人源单链抗体。本发明的抗体由一条柔性连接肽将抗体的轻链和重链可变区首尾相连而形成。本发明抗体在体外测试可中和hTNF－α的活性，可以用于检测hTNF－α，也适...
- 王旻陈卫张娟李海鑫张弢
- 文献传递
