徐平
- 作品数：7 被引量：59H指数：5
- 供职机构：浙江农业大学农业与生物技术学院生物化学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 一种新的与渗调蛋白基因启动子结合的蛋白基因的分离被引量：9
- 1999年
- 渗调蛋白基因可受多种外界环境因子的诱导表达 ,并与植物细胞的渗透调节、抗逆境及植物抗病性等重要的生理过程有着密切关系 ,通过寻找与渗调蛋白基因启动子中FA区域DNA结合的蛋白 ,克隆参与该基因表达调控的反式作用因子 ,有利于明确渗调蛋白基因在转录水平上的调控机制 ,揭示外界环境因子通过信号传导系统诱导渗调蛋白基因表达的过程 .利用近年来发展起的酵母单杂交系统 ,从适盐的烟草悬浮细胞的cDNA文库中分离到 1个可与渗调蛋基因启动子中FA片段结合的蛋白因子的基因OPBP1.核酸序列分析表明OPBP1包含有一个完整的阅读框架 ,可编码 2 77个氨基酸 ,氨基酸序列的比较分析表明该蛋白与近年来发现的一类新的DNA结合蛋白如EREBP ,AP ,ANT等具有相同的保守区 ,其中一些氨基酸完全相同 ,OPBP1与EREBP3最接近 ,同属该类新的DNA结合蛋白的第 1组 ,仅有 1个保守区 .
- 徐平凌建群李德葆Paul.M.HasegawaRayA.Bressan
- 关键词：启动子烟草蛋白基因
- 甘蓝型油菜芜菁花叶病毒分离物TuMVH_1的生物学研究被引量：6
- 1994年
- 采自杭州甘蓝型油菜上的芜菁花叶病毒分离物ＴｕＭＶＨ１，经寄主反应测定，不侵染茄科普通烟和心叶烟，对多数供试甘蓝型油菜和十字花科蔬菜品种（品系）有强的致病力。枯斑指示植物检测和ＥＬＩＳＡ检测，选择城青２号大白菜作为毒原繁殖寄主，提纯病毒的得率为６—７ｍｇ病毒／１００ｇ鲜病叶，用提纯病毒制备的免抗血清经环状沉淀反应测得其效价为１／２００００，免疫电镜观察，ＴｕＭＶＨ１与同源抗血清有强的阳性反应，与另一个芜菁花叶病毒抗血清亦有阳性反应。提纯病毒经蛋白酶Ｋ处理，酚：氯仿抽提后在琼脂糖凝胶电泳中测定其ＲＮＡ分子量约为９．４ｋｂ。在接种ＴｕＭＶＨ；３０天的城青２号大白菜和甘蓝型油菜的植株细胞中观察到分散的线状病毒粒子和典型的风轮状内含体。ＴｕＭＶＨ１风轮状内含体的结构介于Ｅｄｗａｒｄｓｏｎ等所描述的亚型和Ⅳ型之间。
- 陈集双张耀洲徐平李德葆
- 关键词：芜菁花叶病毒血清学油菜
- 拮抗细菌Enterobacter cloaeae B8的一株抗菌素抗性突变体(英文)被引量：3
- 1992年
- 为了研究拮抗细菌Enterobacter cloacae B8在野外水稻叶面上的定殖情况及拮抗作用,由自然选择和Tn5诱变从B8产生了一株抗菌素抗性突变体BX8.BX8能在含利福平达400μg/ml或卡那霉素达300μg/ml的LB培养基中生长.实验表明该抗菌素抗性的产生没有降低BX8的拮抗活性.该抗性比较稳定,在无抗菌素培养基中培养.BX8至少分裂生长60代内抗性不变.
- 徐平陈卫良朱伟光李德葆
- 关键词：抗菌素拮抗细菌突变体
- 芜菁花叶病毒外壳蛋白基因的序列分析及其在大肠杆菌中的表达被引量：9
- 1994年
- 从杭州郊区感病的甘蓝型油菜上分离到一种致病力较强的芜菁花叶病毒（Ｔｕｒｎｉｐｍｏｓａｉｃｖｉｒｕｓ，ＴｕＭＶ）分离物。大量提取病毒并纯化后，电镜观察病毒粒子约７４０ｎｍ×１２ｎｍ。以寡聚（ｄＴ）１５为引物合成ｃＤＮＡ，并根据外壳蛋白（ＣＰ）基因两端序列设计两个诱变引物进行ＰＣＲ扩增，得到一个特异性ＤＮＡ片段。将该片段克隆到ｐＵＣ１８中，经Ｓａｎｇｅｒ双脱氧法测序，结果表明该ＣＰ基因全长为８６７ｂｐ。与前人报道的两种芜青花叶病毒ＣＰ基因的核苷酸序列的同源性分别为８９．５％和９６．７％。，氨基酸序列的同源性分别为９４．５％和９７．９％。将ＣＰ基因亚克隆到原核表达载体ｐＫＫ２３３－２中，用ＩＰＴＧ诱导含插入片段表达载体的大肠杆菌，Ｗｅｓｔｅｍ印迹检测证明，大肠杆菌能表达病毒的ＣＰ。
- 徐平许建平薛朝阳陈集双张耀洲李德葆
- 关键词：芜菁花叶病毒外壳蛋白基因
- 芜菁花叶病毒外壳蛋白基因克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：2
- 1994年
- 本文报道采用反转录酶—聚合酶链式反应，体外扩增芜菁花叶病毒（ＴｕＭＶ）外壳蛋白基因及其克隆，并在大肠杆菌中获得表达的结果；从抗州市郊区感病的油菜上分离到一株致病力极强的芜菁花叶病毒分离物，提纯后，经５０ｎｇ／ｍＬ蛋白酶Ｋ和０．５％ＳＤＳ处理，苯酚／氯仿和氯仿抽提两次，酒精沉淀，获得了纯化的病毒ＲＮＡ，该ＲＮＡ与ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）＿（１５）退火后，在ＡＭＶ反转录酶的作用下合成了单链ｃＤＮＡ，然后加入用以扩增ＴｕＭＶ－ＣＰ基因的上下游引物，３５个循环后，得到了一条长约０．８５ｋｂ的片段，将该片段克隆到ｐＵＣ１８质粒的ＳａｌⅠ限制性酶切位点，分析了限制性酶切图谱，分析表明该片段含有ＥｃｏＲⅠ和ＸｂａⅠ以及引物设计时带人的ＭｃｏⅠ三个酶切位点，该片段克隆到大肠杆菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ）原核表达载体ｐＫＫ２３３－２质粒的ＮｃｏⅠ和ＨｉｎｄⅡ位点后，经ＩＰＴＧ诱导，以该病毒的抗血清为第一抗体，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测该基因的表达产物，结果表明该基因的表达产物为ＴｕＭＶ－ＣＰ蛋白，因而认为所获得的扩增片段确为芜菁花叶病毒外壳蛋白基因。
- 许建平徐平陈集双李德葆
- 关键词：芜菁花叶病毒外壳蛋白基因表达
- 芜菁花叶病毒杭州分离株外壳蛋白基因序列分析被引量：5
- 1994年
- 从杭州郊区分离出一个ＴｕＭＶ强毒株系，利用分子克隆和Ｓａｎｇｅｒ双脱氢测序方法分析了其外壳蛋白基因的ＤＮＡ序列．该序列与已报道的其他４种ＴｕＭＶ分离物都具有较高的同源性，最高达９７．６％，最低达８９．５％，其氨基酸序列的同源性更高，最高达９７．９％，最低达９４．５％。本文分析了该序列中ＡＴ和ＧＣ含量，计算了４种核苷酸在有意义链中和在密码子不同位置上的出现频率，同时还分析了该病毒外壳蛋白氨基酸遗传密码的使用频率。
- 徐平许建平薛朝阳李德葆
- 关键词：芜菁花叶病毒外壳蛋白
