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李自安: 作品数：41 被引量：53H指数：4; 供职机构：成都军区昆明总医院更多>>; 发文基金：国家科技支撑计划云南省科技厅科研基金云南省科技计划项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学机械工程更多>>

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胎儿肌肉来源细胞的分离及其成肌分化研究: 2015年; 目的观察胎儿肌肉来源细胞(f MDC)体外成肌分化能力以及在mdx鼠体内再生抗肌营养不良蛋白。方法使用含10%新生牛血清的DMEM/F12培养液,采用预贴壁方法从胎儿肌肉组织中分离f MDC。采用免疫染色鉴定肌肉特异标志的表达。肌内注射f MDC到6.5 Gy照射3 d后的mdx小鼠股直肌,1个月后采用免疫荧光染色法和RT-PCR方法检测人抗肌营养不良蛋白和基因的表达。结果采用预贴壁方法可从胎儿肌肉组织中分离到贴壁生长、梭型的f MDC。可在f MDC的一些长纤维细胞包浆中检测到MHC的表达,在一些细胞胞核中检测到成肌素的表达。可在注射f MDC的mdx小鼠肌肉中检测到人抗肌营养不良蛋白和基因的表达。结论 f MDC中存在MHC和成肌素的阳性表达,注射f MDC到照射过的mdx小鼠体内可以再生抗肌营养不良蛋白表达。; 庞荣清李自安王强杨建勇朱慧何洁朱向情; 关键词：DUCHENNE型肌营养不良动物模型

自主开发神经外科手术用便携式视频显微镜: 朱兴宝杨云华魏洪林罗俊力王振洲潘险峰李自安; 自2008年06月至2014年12月，自主开发神经外科手术用便携式视频显微镜、进行视屏图像引导显微镜手术的研究，主要内容如下：1、定制强照度环形灯，改装便携式视频显微镜使之适合神经外科手术、组装神经外科手术用便携式视频显...; 关键词：; 关键词：视频显微镜

骨髓胚胎样干细胞体内重建dystrophin的表达: 目的：观察骨髓胚胎样干细胞体内再生dystrophin的可行性. 方法：采用SSP-PCR方法鉴定mdx小鼠的基因型.分离扩增人骨髓胚胎样干细胞,采用DIR标记后,注射细胞到mdx小鼠腹股沟三角皮下,采用活体成...; 庞荣清王强杨建勇朱光旭李自安何洁朱向情阮光萍潘兴华; 关键词：DUCHENNE型肌营养不良抗肌萎缩蛋白蛋白表达; 文献传递

新生猕猴UCMSC的制备、鉴定及对老年猕猴自发DM的治疗作用被引量：1: 2018年; 目的探讨新生猕猴脐带间充质干细胞(UCMSC)对老年猕猴自发性糖尿病(DM)的治疗作用。方法利用组织贴壁法获得猕猴UCMSC,流式检测UCMSC的免疫表型,进行体外分化能力分析。将UCMSC进行e GFP标记后,经静脉输入24周岁的自发DM猕猴体内。分别在UCMSC输入前和输入后1个月,测定DM猕猴血清葡萄糖(Glu)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、血清胰岛素(INS)、血清C-肽(C-P)含量,比较输入前后的变化。结果建立猕猴UCMSC分离、培养方法,并获得UCMSC,猕猴UCMSC高表达CD44和CD29,不表达CD34和CD45,可被诱导分化为软骨、骨、脂肪、胰岛样细胞。UCMSC输入到自发DM老年猕猴体内后,血清Glu、TG、TC水平降低,而INS、C-P水平升高。结论成功分离扩增新生猕候UCMSC,该细胞对老年猕猴自发DM有一定治疗作用。; 朱向情王强蔡学敏李自安庞荣清魏玲潘兴华; 关键词：猕猴脐带间充质干细胞老年糖尿病

山羊胎肝内定位注射不同体积间充质干细胞对胎羊发育的影响被引量：2: 2018年; 目的探索山羊胎肝内定位注射不同体积间充质干细胞(MSC)对胎羊发育的影响。方法以B超探查10只疑似怀孕的母山羊,观察胎羊数量、胎羊性别,确定胎肝位置。怀孕约3个月时,在B超引导下穿刺至胎肝,注射不同体积和不同数量的雄性山羊骨髓MSC悬液到胎肝实质区域,精心护理并观察穿刺母羊是否流产。结果借助B超探查10只疑似怀孕母羊中的6只怀孕,可以发现胎心跳动和胎肝血流并确定胎肝的位置,在B超引导下能够准确注射MSC悬液至胎肝实质区域,注射1 ml MSC悬液,不会引起流产,安全可行;而注射同等细胞数量的4 ml MSC悬液,则导致穿刺山羊流产。结论 B超显影可确诊山羊怀孕和确定胎肝位置,胎肝内注射1 m山羊骨髓MSC悬液不会导致胎羊流产,MSC数量不变而体积增加至4 ml时易导致胎羊流产。; 黄小昆龙海苏锡雄苏锡雄李自安杨艾梅王强李自安王金祥余璞庞荣清王强; 关键词：超声引导定位注射山羊

Notch1基因沉默抑制骨髓源性脂肪祖细胞向成熟脂肪细胞分化: 2016年; 目的探讨Notch1对骨髓源性脂肪祖细胞（BMAPCs）向脂肪细胞分化的影响。方法无菌取sD大鼠股、胫骨骨髓制作细胞悬液，差速贴壁法培养，流式分析检测细胞表面标志表达；实时荧光定量聚合酶链式反应（real-timeqPCR）检测脂肪相关基因和Notch信号分子表达。Notch1基因沉默实验分为空载体组和Notch1小RNA干扰组。Westernblotting检测干扰效率；STEMPRO Adipogenesis Differentiation Kit行细胞成脂诱导。结果BMAPCs表达CD34、CD44、CD45及CD90，且表达6种脂肪相关基因及Notch信号分子；成脂诱导促进Notch1mRNA表达（P〈0．01）；Notch1小RNA干扰抑制Notch1蛋白表达（P〈0．05）。Notch1小RNA干扰组的Cebpa、Lpl和Ppqγ、Slc2a4与Fabp4 mRNA表达均较对照显著降低，而pread1mRNA表达显著增加（P〈0．05-P〈0．01）；Notch小RNA干扰显著抑制脂肪细胞百分率（P〈0．05）。结论Notch1基因沉默抑制BMAPCs向成熟脂肪细胞分化。; 王金祥王小华白盈盈周芳蔡学敏刘菊芬李自安余争平朱光旭潘兴华

干细胞转染CMV-Luciferase-PGK-Puro慢病毒后化学发光成像: 2016年; 目的研究用化学发光成像的方法观察脐带间充质干细胞转染CMV-Luciferase-PGK-Puro慢病毒后的情况,代替活体成像仪的可行性。方法用CMV-Luciferase-PGK-Puro慢病毒转染树鼩脐带间充质干细胞,用最适浓度的嘌呤霉素筛选,存活的细胞用6孔板的3个孔培养,贴壁后,3个孔依次加入底物D-荧光素钾盐,用化学发光成像仪拍照,再用软件进行活体成像转换。将转染成功的细胞注入麻醉后的树鼩皮下,树鼩静脉注射底物。结果细胞加入底物后有生物发光,发光强度随底物作用时间延长而减弱。树鼩皮下也观察到发光细胞。结论 CMV-Luciferase-PGK-Puro慢病毒能成功转染树鼩脐带间充质干细胞,转染成功的细胞用于动物模型治疗后,可进行活体成像,观察细胞在动物体内的分布。; 阮光萍刘菊芬李自安王金祥吕燕波庞荣清潘兴华; 关键词：树鼩转染

骨髓单个核细胞体外培养诱导分化为脂肪细胞: 2016年; 目的体外培养骨髓单个核细胞（BMNCs），并观察其成脂肪细胞分化能力。方法无菌取SD大鼠骨髓制作细胞悬液，差速贴壁法培养第三次贴壁细胞，传代扩增，取3-5代细胞用于实验。流式细胞分析检测CD34、CD44、CD45、CD90、CD144（VE—cadherin）和血管内皮细胞生长因子受体．2（KDR）表达；STEMPRO Adipogenesis Differentiation Kit检测细胞成脂肪分化能力。结果通过差速贴壁法可获得相对单一的BMNCs，流式细胞分析表明培养的BMNCs细胞表达CD34、CD44、CD45及CD90等表面标志，但不表达CDl44和KDR；在未经诱导的情况下，培养的BMNCs能自发分化为脂肪细胞；培养BMNCs成脂肪细胞诱导后在第3、5、7d，成脂率分别为（22．4±3．8）％、（55．6±11．4）％以及（82．4±17．7）％，显著高于诱导培养第1d[（1．3±1．1）％，P〈0．011。结论骨髓单个核细胞体外培养后可以诱导分化为脂肪细胞。; 周芳王金祥李自安刘菊芬白盈盈杨建勇朱光旭潘兴华; 关键词：骨髓单个核细胞间充质干细胞脂肪细胞分化

骨髓源性脂肪祖细胞培养及生物学特性研究: 2016年; 目的体外培养骨髓脂肪祖细胞（BMAPs），比较其与骨髓间充质干细胞（BMSCs）在形态、表型特征、成脂肪分化能力以及脂肪分化相关基因表达方面的差异。方法无菌取1-2月龄雄性SD大鼠的股骨和胫骨骨髓制作细胞悬液，EBM-2（含20％FBS、15μg／ml ECGs）培养基差速贴壁法培养第3次贴壁细胞，取传代至第3-5代细胞用于实验。流式细胞分析检测CD34、CD44、CD45及CD90表达；STEMPRO Adipogenesis Differentiation Kit检测细胞成脂肪分化能力；实时荧光定量聚合酶链式反应（real-timeq PCR）检测过氧化物酶体增殖激活受体γ（Ppaγ）、脂肪酸结合蛋白4（Fabp4）、脂蛋白脂肪酶（Lpl）、CCAAT／增强子结合蛋白α（cebpa）、葡萄糖转运蛋白4（Slc2a4）及前脂肪细胞因子1（preadl）mRNA表达水平。结果传代接种培养24h后，BMSCs形态上呈宽大、扁平状，而BMAPs大部呈长三角状；接种48h后，BMSCs排列更为有序，而BMAPs多交织成网状。BMAP表达CD34、CD44、CD45及CD90，BMSC表达CD44及CD90，未检测到CD34和CD45表达。诱导培养后第4d，BMAPs成脂率显著高于BMSCs（P〈0．01）；到第8d。BMAPs成脂率为（87．2±1L67）％，BMSCs成脂率为（18．5±10．2）％，差异具有统计学意义（P〈0．01）。诱导分化后第4、8d，Cebpa、Fabp4、Lp1、Ppaγ和Slc2a4mRNA在BMAPs表达水平均显著高于BMSCs（P〈0．01）。结论本实验获得了1种具有干细胞的生物学特性，高表达脂肪分化相关的特异性基因，可高效均质性地分化为脂肪细胞的BMAPs。; 朱光旭王金祥周芳李自安刘菊芬阮光萍白盈盈潘兴华; 关键词：骨髓脂肪细胞

树鼩急性放射损伤模型的建立被引量：1: 2016年; 目的建立树鼩急性放射损伤模型。方法将树鼩32只随机分为对照组(16只)和照射组(16只),照射组给予X射线全身一次性4 Gy照射。分别在照射后7、14、21和28 d,检测两组血象、血生化指标,并于照射后第2 w,处死树鼩做病理检查。结果照射组经4 Gy射线照射后,总死亡率为50%,对照组无树鼩死亡;照射后照射组白细胞计数(WBC)、淋巴细胞绝对值(LYM)先降低后升高;谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血小板计数(PLT)、血红蛋白(HGB)与对照组相比先降低后升高,之后又降低;血清尿素(BUN)、肌酐(CREA)含量与对照组相比先升高后降低,之后又升高。照射组肺、肝、肾、胃、脾及小肠等重要脏器病理改变明显。结论成功地建立了树鼩急性放射损伤模型。; 王强王永刚马洪磊李自安杨建勇朱慧朱向情何洁潘兴华庞荣清; 关键词：树鼩急性放射损伤

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