柳强
- 作品数：6 被引量：32H指数：3
- 供职机构：黑龙江八一农垦大学更多>>
- 发文基金：黑龙江农垦总局科技攻关项目大庆市科技局资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 牛冠状病毒和轮状病毒的双重RT-PCR检测方法的建立及应用被引量：19
- 2009年
- 为建立一种快速诊断牛病毒性腹泻疾病的方法,利用本研究室分离鉴定的牛冠状病毒(BCV)和牛轮状病毒(BRV)毒株,根据GenBank中登录的BCV、BRV核苷酸序列分别设计并合成了两对能特异性扩增BCV、BRV的引物,经过条件优化,建立了检测BCV、BRV的双重PCR方法,扩增两种病毒的片段分别为244bp和382bp。该方法检测BCV和BRV的敏感度分别为1个和100个TCID50/100μL。应用这一方法能从病料中检测出这2种病毒。结果表明该双重RT-PCR方法具有很好的特异性和敏感性,可用于这2种病毒性疾病的快速诊断。
- 柳强侯喜林车车刘双翼刘合义
- 关键词：牛冠状病毒牛轮状病毒双重PCR
- 奶牛乳房炎链球菌亚单位疫苗GapC蛋白及其制备方法和应用
- 本发明提供了一种奶牛乳房炎链球菌亚单位疫苗GapC蛋白及其制备方法和应用，所述GapC蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明利用牛源链球菌GapC蛋白制备的亚单位疫苗对奶牛乳房炎常见的三种链球菌都具有交叉保...
- 朱战波崔玉东车车张军于立权周玉龙柳强朱洪伟王鹤杨玉英
- 文献传递
- 牛源空肠弯曲杆菌及其HSP43重组蛋白免疫原性研究
- 2010年
- 为评价牛源空肠弯曲杆菌(C.jejuni)及其HSP43重组蛋白(rHSP43)的免疫原性,本研究采用常规方法分别制备白油、铝胶佐剂和不加佐剂的全菌体免疫原和rHSP43免疫原,分别以不同剂量经皮下接种途径免疫6周龄小鼠,应用间接ELISA方法检测两种免疫原免疫小鼠后抗体消长情况,并通过攻毒实验评价其保护效果。结果显示,其产生的抗体水平白油佐剂组要高于铝胶佐剂组,两者明显高于未加佐剂组(p<0.05)。在全菌体免疫原组中,5×109cfu/mL组免疫保护率高于5×107cfu/mL组,前者与5×105cfu/mL组相比较差异极显著(p<0.01)。在小鼠免疫后21d以1×1010剂量的C.jejuni攻菌,全菌体免疫原能够提供完全保护,而以白油佐剂乳化的rHSP43仅能提供75%的保护。本研究结果为C.jejuni的疫苗研制提供了实验依据。
- 张佩鑫侯喜林柳强谢金鑫孙留霞周玉龙
- 关键词：空肠弯曲杆菌免疫原性
- 牛传染性腹泻综合征多重PCR诊断方法建立及初步应用
- 以消化道症状为主的牛传染病常见的有牛冠状病毒感染,牛轮状病毒感染,弯曲杆菌性腹泻,牛产肠毒素大肠杆菌病,牛沙门氏菌病等。本研究是将实验室所保存的病原体进行培养后建立PCR方法,希望为诊断此类疾病提供一种新的途径。牛冠状病...
- 柳强
- 关键词：牛冠状病毒牛轮状病毒产肠毒素大肠杆菌空肠弯曲菌鼠伤寒沙门氏菌
- 文献传递
- 牛传染性鼻气管炎病毒DQ株gD基因表达及其间接ELISA方法的建立和初步应用被引量：7
- 2011年
- 以原核表达的牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)重组gD蛋白作为包被抗原,建立检测IBRV抗体的间接ELISA方法。构建pET30a-gD重组质粒,在大肠杆菌中表达IBRV重组gD蛋白,Western-blot检测该重组蛋白具有良好的免疫活性。通过方阵试验确定了抗原的最适包被浓度为2.5μg/mL,血清最佳稀释倍数为1∶200,酶标二抗最佳稀释倍数为1∶5 000,与病毒中和试验、全病毒ELISA方法的检测结果符合率分别为87.5%、92.5%。用该法对黑龙江部分地区采集到的863份牛血清样品进行检测,结果阳性率为82.27%。本试验建立的间接ELISA方法可用于IBR的检测和流行病学调查。
- 董华兴侯喜林谢金鑫张佩鑫柳强刘鹏王延涛
- 关键词：牛传染性鼻气管炎病毒间接ELISA抗体检测
- 新生牛轮状病毒的分离及其基因型鉴定被引量：5
- 2010年
- 为了解轮状病毒在腹泻奶牛中的流行情况,从2008年12月到2009年6月,我们在大庆某牛场共收集117份小于7日龄新生牛的腹泻标本,用A群轮状病毒抗原诊断试剂盒对腹泻标本进行检测;应用MA104细胞对阳性标本进行分离,扩增细胞分离株保护性抗原VP7基因,并对该基因进行序列分析。腹泻标本中有10份标本(8.5%)经A群轮状病毒抗原检测试剂盒确认为阳性,成功的分离出一株轮状病毒,命名为:DQ-75,分离株DQ-75VP7基因的基因型是G10,该分离株中VP7基因与现有G10型轮状病毒毒株的VP7编码区氨基酸的系统进化树分析提示其可能是随着奶牛的购入而进入我国。
- 谢金鑫侯喜林董华兴柳强张佩鑫刘鹏侯美如
- 关键词：牛轮状病毒基因型G10
