汤郡
- 作品数：13 被引量：86H指数：5
- 供职机构：广州医科大学金域检验学院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金卫生部科学研究基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- Epstein-Barr病毒LMP1-exonl反义表达载体对NPC细胞生长的抑制作用被引量：3
- 2002年
- 目的 研究EB病毒LMP1反义基因对人鼻咽癌CNE2细胞恶性表型的逆转作用。方法 用反义LMP1DNA的真核表达载体anti pcDNA3.1 LMP1转染人鼻咽癌细胞CNE2 ,G4 18筛选抗性克隆 ;Western blot法检测转染前、后瘤细胞的LMP1表达 ;用MTT法、细胞生长曲线和软琼脂集落形成能力实验观察转染前后细胞体外生长增殖特性。结果 建立反义CNE2细胞克隆 ;转染后LMP1蛋白表达降低 ;转染后细胞活力和生长速度均有下降 ,集落形成能力显著降低。结论 将反义LMP1真核表达载体导入细胞能成功抑制NPC细胞的生长 ,逆转其恶性表型。本研究还为鼻咽癌的基因治疗提供了实验依据。
- 莫薇谭学方汤郡马桂璋
- 关键词：EB病毒
- 蒲公英水煎液对环磷酰胺诱导的实验性小鼠精子畸形的影响被引量：16
- 1999年
- 目的 :研究蒲公英水煎液对实验性小鼠生殖细胞遗传物质的影响。方法 :应用小鼠精子畸形实验 ,观察蒲公英水煎液本身能否诱发雄性生殖细胞遗物质的损伤 ;以及对环磷酰胺诱导的雄性生殖遗传物质损伤是否具有抑制作用。结果 :蒲公英水煎液本身不能诱发实验性小鼠精子畸形 ;对环磷酰胺诱导实验性小鼠精子畸形具有明显抑制作用。结论 :蒲公英水煎液具有一定的抗突变作用 ,可安全应于临床肿瘤治疗。
- 朱蔚云庞竹林汤郡卢尧
- 关键词：蒲公英环磷酰胺精子畸形
- 校企协同育人平台促进医学检验技术专业发展的探索被引量：14
- 2016年
- 以国务院及教育部推行校企合作协同育人的教育理念为指引,以广州医科大学与广州金域医学检验中心共建金域检验学院为实例,围绕校企协同育人平台搭建、教师团队组建、特色培育方案制定等方面,探索和实践校企协同育人模式促进医学检验教育发展的作用。
- 徐霞周志锋汤郡申子喻林勇平吴晓蔓梁耀铭
- EBV-LMP1基因杆状病毒表达载体的构建及其在昆虫细胞中的表达被引量：2
- 2003年
- 目的 构建EBV LMP1基因的杆状病毒重组供体质粒 ,包装重组LMP1的杆状病毒 ,感染昆虫细胞进行表达。方法 先将已克隆的LMP1cDNA与线性化的pFASTBACHTb进行连接 ,使pFASTBACHTb LMP1与DH1 0BAC感受菌进行转座重组 ,利用抗性及蓝白斑筛选重组Bacmid/LMP1克隆 ,提取Bacmid/LMP1转染昆虫细胞Sf9包装杆状病毒 ,利用病毒感染Sf9细胞进行蛋白表达 ,通过免疫荧光、SDS PAGE和Western blot检测表达情况。结果 获得了重组LMP1的杆状病毒 ,细胞能表达出与LMP1单抗结合的蛋白 ,分子量为 6 3kDa左右 ,细胞可直接分泌LMP1蛋白至上清。结论 LMP1能在昆虫细胞中获得良好表达 。
- 林勇平吴淑华杨英汤郡马桂璋
- 关键词：LMP1杆状病毒表达系统昆虫细胞
- PCR克隆EB病毒潜伏膜蛋白-1基因
- 1999年
- 目的：构建ＥＢ病毒潜伏膜蛋白－１重组表达质粒。方法：ＰＣＲ克隆技术，即用ＰＣＲ方法从Ｂ９５－８细胞中钓出ＥＢ病毒ＬＭＰ１基因ＤＮＡ序列，然后定向克隆到真核表达质粒ｐｃＤＮＡ３．１中，以此构建成ｐｃＤＮＡ３．１－ＬＭＰ重组质粒。结果：经酶切鉴定，确定已获得重组质粒ｐｃＤＮＡ３．１ＬＭＰ１。结论：在真核表达质粒中已成功地克隆了ＥＢ病毒ＬＭＰ１基因。
- 张文汤郡梁希若马炳南钟平宇
- 关键词：PCR克隆EB病毒潜伏膜蛋白-1
- EBV-LMP1反义基因真核表达载体的构建及序列鉴定
- 2000年
- 目的 :构建EB病毒LMP1反义基因的真核表达载体。方法 :通过PCR方法 ,扩增EBV LMP1基因的第一外显子片段 ,使之反向克隆到质粒pcDNA3.1的多克隆位点中。经限制性酶切、PCR扩增和测序鉴定重组载体。结果 :酶切产物和PCR产物的凝胶电泳显示 4 0 0bp左右的目的基因片段 ,测序结果显示与已知LMP1基因序列一致。结论 :成功构建了LMP1反义基因的真核表达载体。
- 谭学方汤郡张雪雁
- 关键词：LMP1反义基因
- EBV-LMP1 cDNA的克隆测序与原核表达质粒构建被引量：4
- 2002年
- 目的 克隆EBV LMP1cDNA ,构建EBV LMP1基因的原核表达重组质粒。方法 通过RT PCR技术从B95 8细胞中扩增EBV LMP1cDNA ,克隆至pGEM Teasy载体上并测序 ;利用引物上的BamHⅠ与HindⅢ酶切位点将LMP1基因插入载体pET 32a,转化JM10 9菌。提取质粒 ,限制性内切酶消化 ,琼脂糖凝胶电泳鉴定。结果 扩增的LMP1cDNA长度为 115 8bp ,测序结果与已知序列吻合 ,重组原核表达质粒经酶切鉴定表明获得正确重组子。结论 成功克隆了EBV LMP1cDNA ,并构建了pET 32a LMP1原核表达载体 。
- 林勇平吴淑华杨英汤郡马桂璋
- 关键词：LMP1CDNA原核表达
- 改革考试命题形式,加强素质教育被引量：1
- 1999年
- 改革考试命题模式是加强素质教育的一个重要环节。本文在论述应试教育带来的负面影响的基础上，提出要转变观念，强化素质教育意识；改革试题的命题形式，充分体现理论联系实际。
- 马桂璋汤郡李剑蔡征涛陈广南李叔田郑小燕方强杨英李群英
- 关键词：素质教育考试命题模式
- Epstein-Barr病毒LMP1蛋白羧基端的克隆与原核表达被引量：2
- 2003年
- 目的 构建PGEX 6P 3 CCT原核表达载体 ,获得大量纯化的LMP1羧基端蛋白。方法 通过RT PCR技术从B95 8细胞中扩增EBVLMP1CCTcDNA ,克隆至PGEM Teasy载体上并测序。利用引物上的BamHI与EcoRI酶切位点将CCT基因插入PGEX 6P 3,转化大肠杆菌BL2 1 ,限制性内切酶消化鉴定。IPTG诱导重组菌株表达 ,用SDS PAGE与Westernblot对表达产物进行鉴定 ,并用Sepharose 4B亲和层析柱对表达产物进行纯化 ,PreScissionProteas酶对融合蛋白进行解离。结果 扩增的LMP1CCT长度为 5 97bp ,测序结果与已知序列吻合。重组子经酶切鉴定 ,获得PGEX 6P 3 CCT原核表达菌株 ,Westernblot表明重组蛋白能被LMP1单克隆抗体特异结合。获得约5 1kDa的PGEX 6P 3 CCT融合蛋白 ,分离纯化出约 2 1kDa的LMP1CCT蛋白。结论 成功获得EBVLM1CCT蛋白 ,为研究LMP1致瘤机制 。
- 张雪雁汤郡杨英马桂璋
- 关键词：LMP1原核表达
- 脑梗死和脑出血患者外周血中循环microRNA表达谱差异的初步分析被引量：21
- 2014年
- 目的:利用microRNA芯片研究急性脑梗死和脑出血患者循环血浆中是否存在相关的miRNAs及有表达差异的miRNAs。方法:分别收集急性脑梗死、脑出血患者和健康对照者全血各3例,运用Norgen血浆外泌体RNA提取试剂盒提取血浆总RNA并通过定量PCR进行质量和浓度检测。采用μParaflorTM microRNA芯片技术进行miRNAs表达谱研究。用相关软件和统计学方法进行数据分析。结果:在脑梗死和脑出血患者血浆中发现8个与脑卒中相关的miRNAs,且有显著差异性表达(P<0.05)。脑梗死和健康对照者、脑出血和健康对照者间分别有11、24个差异表达miRNAs,但两两比较上调或下调2倍以上的差异表达的miRNAs均无统计学意义(P>0.05)。结论:脑梗死和脑出血组间miRNA的表达差异可能与不同类型脑卒中的发生发展相关,可为进一步研究急性脑卒中发生的表观遗传学分子机制提供依据。
- 李武英金俊陈健郭阳汤郡谭盛
- 关键词：脑梗死脑出血循环MICRORNA
