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王淑杰: 作品数：65 被引量：233H指数：9; 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>

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猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞受体Sn和CD163 TaqMan荧光定量RT-PCR方法的建立: 2012年; 为建立检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)允许细胞表面的Sn和CD163受体的方法,本研究设计针对Sn和CD163基因的特异性引物和荧光探针,建立了检测PRRSV Sn和CD163受体的荧光定量RT-PCR方法。结果显示,该方法在检测101copies/μL～108copies/μL模板范围内具有良好的线性关系。标准曲线的相关系数r值均大于0.996,扩增效率分别为100%和107%;该检测方法对Sn和CD163的检测下限均为10拷贝,敏感性高;批内重复试验和批间重复试验的变异系数均小于5%,具有良好的重复性。利用该方法对PRRSV感染肺泡巨噬细胞(PAM)72 h后Sn和CD163受体mRNA的转录水平进行了检测,结果表明Sn和CD163受体的转录水平显著上调。本研究为PRRSV病毒感染后两种主要受体变化趋势的研究提供了有效的检测方法。; 韩梓峰刘永刚石文达王刚何玉利王淑杰刘鹤董建国武嘉男蔡雪辉; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光定量RT-PCR

猪链球菌的分型鉴定及其体外形成生物被膜的研究: 2014年; 通过生化试验及PCR等方法对13株猪链球菌进行鉴定分型,用结晶紫染色(CV)和扫描电镜(SEM)的方法对其形成生物被膜的能力进行研究,并对形成的生物被膜进行形态观察。结果显示:经鉴定的13株猪链球菌中1株为1型,4株为9型,2株为7型,另2株为2型,其他菌株为未知;13株菌均能形成生物被膜,其中1号、2号、3号、4号、7号、9号、10号、12号、13号菌形成生物被膜能力较弱,5号、6号、8号、11号菌形成生物被膜能力中等。这些结果为研究猪链球菌致病性及为生物被膜研究提供物质基础。; 周永辉王淑杰黄全勇陈俭清李艳华; 关键词：猪链球菌分型鉴定生物被膜

PRRSV CH-1a株致弱过程中不同代次病毒结构蛋白基因遗传变异分析被引量：1: 2009年; 对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)CH-1a株致弱过程中不同代次病毒(S39、S70、S148、S171)及国内分离株(GD3、JS1、JS5)的结构蛋白基因(ORF2～ORF7)进行了克隆和测序,并与国内外毒株序列进行比较和系统发育进化分析。结果表明,PRRSV CH-1a株各传代毒株和国内分离毒株各个结构蛋白序列均存在不同程度的变异,与GenBank上的登录序列进行了比对,发现GP2～GP5同源性在83.1%～100%,M蛋白同源性在95.4%～100%,N蛋白同源性在87%～100%,其中以GP2、GP3和GP5发生突变几率较大;另外,发现PRRSV CH-1a不同代次病毒GP5的H38突变为Q38(S70),L146突变为Q146(S148),而2006年分离的PRRSV变异毒株由F39突变为I39,而且分离毒株的毒力明显强于经典毒株。进化分析表明,GD3毒株与2006年～2007年分离的毒株以及PRRSV CH-1a株的亲缘关系均较近,处于二者的中间位置。; 刘永刚蔡雪辉石文达马平王淑杰李成君武佳斌徐敏; 关键词：PRRSV CH-1A株致弱

PRRSV新亚型毒株JL580的基因组变异特征研究被引量：4: 2015年; 为了解猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)新分离株JL580遗传变异特征,研究扩增得到了该病毒的全基因组序列,并对GP5和NSP2序列进行了比对分析。结果表明:JL580株属于美洲株,且不同于中国现流行的其他毒株,与中国代表毒株CH-1a的核苷酸同源性是84.9%,与HP-PRRSV代表株JXA1、HuN4、TJ的核苷酸同源性分别是84.8%、84.9%、85%。对基因组的进一步分析表明,JL580株GP5蛋白与CH-1a、VR-2332、HuN4相比,R13→Q13,V27→A27,H38→N38,R151→K151;且NSP2存在3处缺失,与HP-PRRSV的30个氨基酸的缺失有明显的不同。JL580分离株的出现表明中国出现了新的PRRSV亚型,这对于PRRSV的防治和新疫苗的研制提供了科学依据。; 常晓博赵款叶超姜成刚王淑杰蔡雪辉张辉安同庆; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组

分泌CAV-2单克隆抗体的杂交瘤细胞株7D7、由该细胞株分泌的单克隆抗体及应用: 本发明公开了一株分泌CAV-2单克隆抗体的杂交瘤细胞株7D7、由该细胞株分泌的单克隆抗体及应用。所述杂交瘤细胞株7D7保藏编号为CGMCC？No.10877。间接免疫荧光结果表明：7D7杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体能特异...; 王淑杰蔡雪辉; 文献传递

小动物手术用手术台: 一种小动物手术用手术台，属于兽用手术器械领域，解决了目前的小动物手术台的台面都是平的，不能将手术部位适宜的突出的问题，它包含水箱和升降台，所述升降台由多组升降单元平行排列构成，每组升降单元包含一根横柱和垂直于横柱的两根立...; 蔡雪辉王淑杰; 文献传递

牛α干扰素在毕赤酵母中的高效分泌表达及活性鉴定被引量：4: 2013年; 为高效分泌表达牛α干扰素(boIFN-α),本研究通过人工合成boIFN-α基因,将目的基因克隆至表达载体pPIC9K中,构建重组质粒pPIC9K-boIFN-α,将其电转化于毕赤酵母菌株GS115,利用抗药选择压力G418筛选重组菌,对重组菌诱导表达,取上清进行SDS-PAGE和western blot检测,并优化重组菌的诱导表达条件。结果显示:筛选获得高效分泌表达boIFN-α的重组菌,其最佳诱导条件为:250 r/min,26℃培养,1%甲醇浓度诱导,诱导72 h。上清中目的蛋白表达量最高可达200μg/mL,本研究为boIFN-α在生产中的应用奠定了基础。; 王延群张璐李玉明汪志艳金家民刘永刚王刚王淑杰姜成刚涂亚斌蔡雪辉; 关键词：毕赤酵母分泌表达

伪狂犬病病毒gE基因的表达及gE蛋白单克隆抗体的制备被引量：5: 2007年; 以猪伪狂犬病病毒(PRV)Min-A株pMD-gE质粒为模板,利用所合成的特异性引物进行PCR扩增,获得了1 000 bp的DNA片段,并将其克隆至表达载体pET-30a中,转化到大肠杆菌中进行了原核表达,对表达产物进行了抗原性分析;在此基础上,用纯化的gE蛋白免疫BALB/c小鼠,筛选和鉴定了分泌抗gE蛋白单抗的杂交瘤细胞株。结果显示,原核表达的gE蛋白具有良好的抗原性,其分子质量为46 ku。筛选获得3株分泌抗gE蛋白单抗的杂交瘤细胞株,Western-blot和间接免疫荧光试验证实,所获得的3株单抗具有良好的特异免疫反应原性。3株单抗均为IgG1亚类,且轻链均为κ链。; 王淑杰蔡雪辉刘永刚吴国军刘狄萩张琦马平李成君石文达; 关键词：伪狂犬病病毒原核表达单克隆抗体

猪源凋亡相关基因SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR方法的建立被引量：2: 2013年; 为检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染的猪胸腺中凋亡相关因子的变化,本研究针对猪TNF-α、TNFR1、FasL、Fas、Bax、Bcl-2、caspase-3基因及内参β-actin基因设计特异性引物,构建含有各自引物扩增序列的重组质粒作为阳性标准品,建立了检测TNF-α、TNFR1、FasL、Fas、Bax、Bcl-2、caspase-3基因的SYBR Green I qRT-PCR方法。结果显示,该方法线性关系好(R2≥0.998),敏感性高,初始模板的检出下限为10拷贝/μL;特异性强,扩增产物形成单一的特异性熔解峰;重复性好,批内、批间重复试验的变异系数均小于3%,具有良好的重复性。本研究为细胞凋亡相关因子变化趋势的研究提供方法。; 李玉明王刚汪志艳刘永刚涂亚斌王淑杰姜成刚王延群蔡雪辉; 关键词：凋亡相关基因荧光定量PCR SYBR

分泌CAV-2单克隆抗体的杂交瘤细胞株2C1、由该细胞株分泌的单克隆抗体及应用: 本发明公开了一株分泌CAV-2单克隆抗体的杂交瘤细胞株2C1、由该细胞株分泌的单克隆抗体及应用。所述杂交瘤细胞株2C1保藏编号为CGMCC No.10878。间接免疫荧光结果表明：2C1杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体能特异...; 蔡雪辉王淑杰刘鹤刘永刚; 文献传递

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